GBLUP 是应用最广泛的基因组预测 (GP) 方法,由于需要求基因组关系矩阵 (GRM) 的逆,因此随着训练群体规模的增加,该方法会消耗大量且不断增加的计算资源。因此,在本研究中,我们结合随机 Haseman - Elston (HE) 回归 (RHE-reg) 和预条件共轭梯度 (PCG),开发了一种新的基因组预测方法 (RHEPCG),该方法避免了直接求 GRM 的逆。模拟结果表明,在大多数情况下,RHEPCG 不仅能达到与 GBLUP 相似的预测精度,而且还能显著减少计算时间。对于实际数据,与 GBLUP 相比,RHEPCG 对拟南芥 F2 群体的 7 个性状和高粱双色 RIL 群体的 4 个性状表现出相似或更好的预测精度。这表明 RHEPCG 是 GBLUP 的一个实用替代方案,并且具有更好的计算效率。
染色体碎裂、染色体合成和染色体复合等现象被称为染色体再生,它们构成了新型的复杂重排,包括许多仅位于少数染色体区域的基因组改变。近十年来,这些现象的发现改变了我们对染色体异常的形成及其病因的认识。尽管这些新的灾难性机制各有特点,但它们通常发生在单个细胞周期内,并且它们的出现与基因组不稳定性密切相关。人们已经提出了各种能够产生染色体再生的非排他性外源性或细胞机制。然而,最近的实验数据揭示了两个主要过程,这两个过程在染色体有丝分裂分离出现缺陷后,可产生一系列细胞事件,从而导致染色体再生。这些机制包括整合分离染色体物质的微核的形成,以及由于端粒融合而导致染色体物质周围出现染色质桥。在这两种情况下,受损染色体物质的碎裂、修复和传递的细胞和分子机制与染色体再生相关的复杂染色体重排的特征一致。在本综述中,我们介绍了每种类型的染色体再生,并描述了实验模型,这些模型可用于验证染色体再生事件的存在,并更好地了解其形成和传递的细胞机制,以及它们对基因组稳定性和可塑性的影响。21
摘要:本文研究了马尔堡正病毒种(包括马尔堡病毒 (MARV) 和 Ravn 病毒 (RAVV))的遗传多样性和进化动态。利用自然宿主和疫情期间报告的人类病例的序列数据,我们进行了全面的分析以探索遗传变异性,在基因组和基因水平上构建单倍型网络以阐明病毒动态和进化途径。我们的研究结果揭示了 MARV 和 RAVV 的不同进化轨迹,MARV 在不同生态区域表现出更高的适应性。MARV 表现出丰富的遗传多样性和多种进化压力的证据,表明其能够适应不同的环境。相比之下,RAVV 表现出有限的遗传多样性,没有检测到重组事件,表明其进化稳定性。这些差异表明,尽管 MARV 继续在各个地区多样化和适应,但 RAVV 的进化潜力可能受到限制,这可能反映了马尔堡正病毒物种病毒生态学中的不同作用。我们的分析解释了这些病毒的进化机制,强调 MARV 正在经历人际传播的进化适应,令人震惊地强调了全球对 MARV 引发下一次大流行的担忧。然而,有必要进一步开展跨学科的“同一个健康”研究,以回答一些剩余的问题,包括家养和野生动物物种的宿主范围和遗传易感性,以及生物多样性网络在该疾病生态动态中的作用。
通常通过 PCR 对淋巴肿瘤中的微小残留病 (MRD) 进行灵敏的定量分析,使用免疫球蛋白或 T 细胞受体基因重排作为靶标,并使用患者或等位基因特异性寡核苷酸 (ASO) 作为引物。自 30 年前首次描述以来,ASO-qPCR 得到了广泛的应用,尤其是在欧洲,欧洲MRD 联盟成员发表的论文提供了有关该方法执行的指南和通用反向引物的推荐序列 [1-3]。如果候选患者特异性正向引物可以将 MRD 定量到 10 −4 的水平,则可以使用它,该引物的序列是患者独有的并且是特定于患者的。一些引物可以定量到 10 −4 以下,但有些会失败 [4]。失败有时可能是由于假阳性,但原因通常不清楚。 HAT-PCR(高 A/T PCR 或高退火温度 PCR)是 qPCR 的一种最新改进,其涉及引物设计和扩增条件的改进,以提高特异性并降低 MRD 检测中假阳性结果的频率 [5]。当检测 20 μg DNA 时,它的检测限为 10 −65 。在开发 HAT-PCR 之后,研究了根据欧洲 MRD 指南使用患者特异性正向引物和推荐的反向 J 引物进行的传统 qPCR 的灵敏度。单个引物对通常可以检测到低至 10 −4 的 MRD 水平,但经常无法检测到更低的水平。PCR 可以潜在地将单个靶标扩增到检测点 [6],但靶标的扩增有时会被与基因组 DNA 同时纯化的外在物质或另一种内在扩增反应所抑制。引物二聚体扩增引起的抑制很常见,人们已对 PCR 进行了多项技术改进以尽量减少这种抑制 [ 7 , 8 ]。其他脱靶 DNA 序列的扩增反应也已被观察到 [ 9 ],但此类反应的特征不甚了解,其重要性尚不清楚。传统 qPCR 无法将 MRD 定量低于 10 −4,这被证明是由于引物与基因组 DNA 相互作用造成的。除了有报道称碎片化的基因组 DNA [ 10 ] 可能会抑制 PCR 外,基因组 DNA 在 PCR 中的作用并未引起人们的兴趣。但是,我们认为分析这种现象很重要,原因有二。首先,了解和预防它可以提高 MRD 定量的灵敏度。其次,其他 PCR 检测需要在存在基因组 DNA 的情况下灵敏地检测靶标,因此可能容易受到抑制。因此,分析抑制及其预防机制可能与许多 PCR 检测的设计相关。
基因组 DNA 纯化试剂盒是一种简单快速的系统,可从各种来源纯化高质量的基因组 DNA,包括:全血、血清、细胞系、细菌细胞、植物和哺乳动物组织。该试剂盒基于从粗裂解物中进行选择性洗涤剂介导的 DNA 沉淀。整个过程非常快速,仅需 20-25 分钟,通常可从 0.2 mL 血液中得到 2-10 μg 基因组 DNA。
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结果 TP53 和 DNMT3A 突变是最常见的突变。在我们队列中检测到了在 HGESS( ZC3H7B- BCOR 和 NUTM2B-YWHAE )和 LGESS( JAZF1-SUZ12 )中常见的经典融合。CCND1 在 HGESS 中显著上调,而编码雌激素受体 (ER) 和孕激素受体 (PR) 的 GPER1 和 PGR 的表达在 HGESS 和 LGESS 之间没有显著差异。60% 的 HGESS 患者检测到了富集同源重组修复、细胞周期和磷酸肌醇 3-激酶/AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白途径的可操作突变。HGESS 中上调表达的基因在 5 个免疫相关途径中显著富集。大多数 HGESS 患者(85.7%)具有免疫治疗疗效的阳性预测因子。免疫微环境分析显示HGESS具有较高的免疫浸润程度,其中ZC3H7B-BCOR融合的HGESS患者免疫浸润程度相对高于NUTM2B-YWHAE融合的患者。
•所有样品必须视为潜在的生物危害。戴上适当的防护眼镜,衣服和手套。•避免与套件试剂直接接触皮肤。如果接触,请立即用水彻底洗涤。•最小化化学物质的吸入。请勿打开化学容器。•出于安全原因,应在设备齐全的设施中进行所有工作(即物理控制设备)。•在使用潜在的传染性材料之前,应根据公司/机构的相关法规和要求对个人进行培训。
“乳酸细菌基因组联盟”(LABGC)。LABGC的任务是在实验室上转发功能基因组研究。每个实验室菌株均与指定的研究者有关,他们将主要负责闭合差距和出版基因组序列。在2002年,JGI生成了11个名称的草稿序列。这是通过对每个微生物DNA的shot弹枪小插入库(2-3 kb)进行测序来实现的,以达到10倍的覆盖范围。在可能的情况下,该覆盖范围得到了来自大插入宇宙库(40 kb)的5倍覆盖范围。将序列数据合并到一个组件中,然后订购为支架。然后,橡树岭国家实验室对草稿序列进行了计算注释。可以从联合基因组研究所网站(http://www.jgi.doe.gov/)中查看此注释。该网站还允许研究人员通过代谢途径或功能基因类别的“注释草案”扫描。此外,可以通过网站内的基本局部比对搜索工具(BLAST)工具进行特定的DNA或蛋白质搜索。LABGC集团目前正在与一家私人公司Fidelity Systems合作,以关闭所有11个基因组,并期望在2004年完成。在LABGC项目中完成和发布基因组测序将是自100年前最初隔离和使用乳酸启动培养物以来实验室研究中最重要的英里。此外,累积序列数据的公众可用性将促进对美国和国外实验室的基因组学研究的实施。在美国,这些微生物与20至300亿美元的食品产生至关重要,因此这一里程碑将对食品和饮料发酵行业产生重大影响。