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弓形虫Gondii DNA
触摸羊水，劳动：无杂质（无色帽或白色帽）或无菌试验血液：K2E/K3E管（紫色帽）羊水的搁板寿命，血浆类型，血浆在室温下12小时，+4°C +4°C +4°C五天，-20
CRISPR介导的转录抑制作用弓形虫Gondii
用于调整内源基因表达的抽象工具是确定各种细胞表型的遗传基础的关键。尽管在弓形虫中可以使用合成的可调节性，但基因表达的靶向和组合下调的可扩展方法（如RNA干扰）尚未得到发展。为了研究CRISPR介导的转录调控的可行性，我们研究了来自甲状腺链球菌和嗜热链球菌的两个催化无活性Cas9（DCAS9）直系同源物的功能。在添加靶向启动子的单个指定RNA（SGRNA）和表面抗原基因SAG1的5 9个未翻译区域（UTR）后，我们对靶基因的蛋白质刺激蛋白质的变化通过流量细胞仪的蛋白质刺激变化，用于转录报告基因和immu-immu-nosu-nosu-noce。我们发现DCAS9直系同源物产生了一系列靶基因表达水平，并且抑制程度持久且稳定地遗传。因此，化脓性链球菌和嗜热链球菌DCAS9可以有效地产生弓形虫中的基因表达水平。两个DCAS9的独特的SGRNA支架要求允许通过转录调制，基于显微镜的研究标记或其他基于DCAS9的方法同时检查两个不同的基因座。利用新近获得的基因组转录起始站点数据，这些工具将有助于开发弓形虫的新功能筛查方法。
弓形虫b1亚型的检测及序列分析...
弓形虫是一种单细胞寄生虫，能够感染几乎所有的恒温动物，对全球公共卫生构成严重风险。关于尼日利亚高原州鸟类中传播的弓形虫毒株的现有文献有限。因此，本研究旨在识别和确认弓形虫感染，并确定 DNA 序列与世界其他地区鸟类 DNA 序列的关系。为此，对 25 种鸟类的大脑和心脏组织进行了取样，并进行了嵌套聚合酶链式反应 (nPCR) 和 B1 基因序列分析。在 7/7（100.0%）的野生鸟类和 15/18（83.3%）的家鸡（Gallus gallus domesticus）的心脏和脑组织中发现了弓形虫的 DNA。本研究对弓形虫病原体序列进行最大似然法系统发育树分析，结果表明该序列与I型RH株（GenBank: AF179871）具有共同祖先，弓形虫病原体序列
弓形虫疫苗候选物：简要回顾
摘要 弓形虫是一种专性细胞内寄生虫，可引起弓形虫病。研究表明，症状的严重程度取决于宿主免疫系统的功能。虽然弓形虫感染通常不会导致健康人患上严重疾病，感染后会诱发稳定的免疫力，但它可能导致免疫功能低下的个体（艾滋病、骨髓移植和肿瘤）患上严重甚至致命的弓形虫病。在各种研究中，已提议用于候选疫苗的抗原包括表面抗原和分泌物，这些抗原和分泌物已在不同研究中合成和评估。在一些研究中，分泌抗原在刺激宿主免疫反应中起着重要作用。已经合成了来自不同弓形虫菌株的各种抗原，例如 SAG、GRA、ROP、ROM 和 MAG，并在包括重组抗原、纳米颗粒和 DNA 疫苗在内的不同疫苗平台的动物模型中评估了它们的保护作用。在 Science Direct、PubMed Central (PMC)、Scopus 和 Google Scholar 四个书目数据库中搜索了截至 2020 年发表的文章。本评论文章重点关注重组抗原、纳米颗粒和 DNA 疫苗的使用和实用性的最新研究。
弓形虫的新兴治疗靶点
弓形虫是动物和人类弓形虫病的病原体。这种感染通过猫科动物粪便中释放到环境中的卵囊或摄入未煮熟的肉类传播给人类。这意味着弓形虫病是一种人畜共患疾病，而弓形虫是一种食源性病原体。此外，山羊和绵羊的慢性弓形虫病是导致反复流产并给该行业造成经济损失的原因。它也是猫和狗等宠物的健康问题。虽然有针对急性期感染的治疗方法，但它们无法永久消除寄生虫，有时耐受性不佳。为了开发更好、更安全的药物，我们需要阐明弓形虫生物学的关键方面。在这篇综述中，我们将讨论同源重组修复 (HRR) 通路在寄生虫溶解周期中的重要性，以及这些过程的组成部分如何成为新药开发计划的潜在分子靶点。从这个意义上讲，我们将描述不同的 DNA 损伤剂或 HHR 抑制剂对弓形虫生长和复制的影响。列表中包括与其他靶点相关或属于一般筛选一部分的多靶点药物，从而对可在其他场景中测试的药物进行了彻底的修订。
mGBP2 与 Galectin-9 结合，产生针对弓形虫的免疫力
鸟苷酸结合蛋白 (GBP) 是一种大型干扰素诱导 GTP 酶，可执行针对弓形虫的重要宿主防御活动，弓形虫是一种具有全球重要性的侵入性细胞内 api-complexan 原生动物寄生虫。弓形虫会建立寄生空泡 (PV)，保护寄生虫免受宿主细胞内防御机制的侵害。鼠 GBP (mGBP) 可识别弓形虫 PV，并组装成超分子 mGBP 同源和异源复合物，这些复合物是破坏 PV 膜所必需的，最终导致对空泡驻留病原体的细胞自主免疫控制。我们之前已表明 mGBP2 在弓形虫免疫控制中起着重要作用。在此，为了阐明 mGBP2 的功能，我们报告了半乳糖凝集素 9 (Gal9) 是参与对弓形虫免疫的关键 mGBP2 相互作用伙伴。有趣的是，Gal9 也在弓形虫 PV 处积累并与 mGBP2 共定位。此外，我们可以通过 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑证明 Gal9 是弓形虫生长控制的必要条件。这些发现清楚地表明，Gal9 是 mGBP2 协调的细胞自主宿主防御弓形虫机制的关键因素。
弓形虫裂解物刺激树突状细胞产生的外泌体在眼部免疫原性
摘要：研究弓形虫裂解物 (TLA exo) 刺激的树突状细胞衍生外泌体与霍乱毒素混合作为佐剂，在通过两种黏膜途径 (眼部和鼻内) 免疫的小鼠中的免疫原性。BALB/c 小鼠每隔 2 周注射 3 次 TLA exo 疫苗，并测量血清中的 IgG 水平以及泪液、唾液、粪便和阴道洗液中的 IgA 水平。为观察弓形虫特异性 B1 基因的表达，用 TLA exo 或 PBS exo (未用 TLA 刺激) 免疫感染 ME49 弓形虫囊肿的小鼠，并检查其脑组织。与仅用 PBS 处理的小鼠相比，通过鼻内途径接种的小鼠引起的体液和黏膜免疫反应明显更高。此外，与 PBS 对照组相比，通过眼部途径（滴眼液）接种的小鼠血清中弓形虫特异性 IgG 和泪液和粪便中的 IgA 含量明显更高。TLA exo 疫苗接种小鼠的 B1 基因表达明显低于 PBS 或 PBS exo 疫苗接种小鼠。这些结果表明，用 TLA exo 疫苗对小鼠进行眼部免疫有可能刺激全身或局部抗体反应。这项研究还强调了滴眼液疫苗作为弓形虫鼻腔疫苗替代品的优势。
重新评估弓形虫和犬新孢子虫基因组，发现错误组装、核型差异和染色体重排
新孢子虫主要感染牛，导致牛流产，估计每年对全球经济造成 10 亿美元的损失。然而，对其生物学的研究一直被忽视，因为既定范式认为它与其近亲、广泛研究的人类病原体弓形虫几乎完全相同。通过使用第三代测序技术重新审视基因组序列、组装和注释，我们在此表明，新孢子虫基因组最初是在与弓形虫同源的假设下错误组装的。我们表明这些物种之间发生了重大染色体重排。重要的是，我们表明最初命名为 Chr VIIb 和 VIII 的染色体确实融合了，从而将新孢子虫和弓形虫的核型都减少到 13 条染色体。我们重新注释了新孢子虫基因组，揭示了 500 多个新基因。我们对非光合质体和线粒体基因组进行了测序和注释，并表明尽管顶质体基因组几乎相同，但物种和菌株之间存在高水平的基因碎片化和重组。我们的结果纠正了目前在 N. caninum 和 T. gondii 基因组数据库中广泛分布的组装伪影，更重要的是，突出了线粒体是以前被忽视的变异源，并为改变同源性范式铺平了道路，鼓励重新思考基因组作为这些病原体比较独特生物学的基础。
在弓形虫感染期间宿主防御和寄生虫免疫逃避中的IFN
干扰素（IFNS）是一个在宿主对病原体和免疫调节中具有不同功能的细胞因子家族。II型IFN，即ifn-g被广泛认为是对细胞内病原体的耐药性的主要介体，包括原生动物毒素弓形虫。最近，ifn-a / b，即< / div>I型IFN和IFN-L（III型IFN）已被鉴定为在T. gondii感染过程中也起着重要作用。 该寄生虫是人类和动物的广泛病原体，它是研究细胞介导的对细胞内感染的免疫反应的模型生物。 其成功取决于其他因素，取决于在IFN介导的基因表达和IFN调节效应分子的水平上抵消IFN系统的能力。 在这里，我回顾了我们对T. gondii感染过程中IFN介导的宿主耐药性和免疫调节的分子机制的了解的最新进展。 i还讨论了T. gondii已进化为有效逃避IFN介导的免疫力的机制。 了解这些迷人的宿主 - 寄生虫相互作用及其潜在的信号机制对于更深入地了解弓形虫病的发病机理至关重要，并且它还可能还可以鉴定出寄生虫指导或指导的支持性疗法的潜在靶标，以便更有效地对抗寄生虫。I型IFN和IFN-L（III型IFN）已被鉴定为在T. gondii感染过程中也起着重要作用。该寄生虫是人类和动物的广泛病原体，它是研究细胞介导的对细胞内感染的免疫反应的模型生物。其成功取决于其他因素，取决于在IFN介导的基因表达和IFN调节效应分子的水平上抵消IFN系统的能力。在这里，我回顾了我们对T. gondii感染过程中IFN介导的宿主耐药性和免疫调节的分子机制的了解的最新进展。i还讨论了T. gondii已进化为有效逃避IFN介导的免疫力的机制。了解这些迷人的宿主 - 寄生虫相互作用及其潜在的信号机制对于更深入地了解弓形虫病的发病机理至关重要，并且它还可能还可以鉴定出寄生虫指导或指导的支持性疗法的潜在靶标，以便更有效地对抗寄生虫。
弓形虫血清阳性与精神分裂症患者精神病理学表现之间的关系：一项来自厄瓜多尔的单中心研究
精神分裂症是一种复杂的神经精神疾病，影响着世界1%的人口，是全球第九大致残原因[1-4]。其病因尚不清楚，但与神经化学物质、遗传和环境因素（如接触病原体、身体压力以及妊娠期胎儿饥饿）有关，这些因素会导致多巴胺能神经传递发生改变，并引发一系列症状，如妄想、言语混乱、幻视或幻听、阴性症状以及认知缺陷[5]。弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫，影响着世界超过三分之一的人口，由于其巨大的社会经济影响，已成为一个重大的公共卫生问题[6]。弓形虫病的传播途径包括：摄入被孢子化卵囊污染的水或蔬菜、摄入生的或未煮熟的含有囊肿的肉、接触受污染的猫粪、由受感染的母亲垂直传播给孩子、输血和器官移植 [7]。该病能产生一种与精神分裂症病因有关的神经递质的前体——左旋多巴 (L-DOPA)，一种多巴胺的前体 [8]。五十多年来，人们一直在研究精神分裂症与弓形虫之间的可能关系 [9-16]。当弓形虫潜伏在脑组织囊肿中时，它会压迫神经组织，降低灰质密度，并通过改变神经递质的活性来改变脑生理，从而导致情绪和行为异常以及认知障碍 [7,17,18]。人们认为，弓形虫的 TgAaaH2 基因是由缓殖子诱导的，而缓殖子又会诱导脑内多巴胺水平升高，导致一些精神分裂症症状和更严重的临床病程 [8,17]。弓形虫血清阳性与精神分裂症患者精神病理学表现之间的关联仍然是一个值得关注的领域 [7,19-21]。虽然弓形虫影响精神分裂症严重程度的具体机制尚未完全阐明，但了解这些关联可以提供有价值的见解[3,22-27]。对114名精神分裂症患者的回顾显示，其中24名患者经常出现精神障碍。一些病例报告显示，患者有幻觉、妄想、言语混乱和思维障碍等精神分裂症表现，最初被诊断为精神分裂症，但后来由于神经系统症状的发展，他们接受了弓形虫病检测，并被诊断为弓形虫脑炎[2]。一项针对2015年至2020年中国精神科住院患者的前瞻性研究表明，精神分裂症、抑郁症和其他精神疾病与抗弓形虫抗体阳性率相关[6]。 Esshili 等人发现，在感染 T 的患者中。感染弓形虫病的患者，其精神分裂症的发病时间比未感染者晚约2年，这表明感染弓形虫病可能通过诱发免疫反应发挥保护作用[28]。在厄瓜多尔[29-31]，尚无关于弓形虫病的公开信息，并且