摘要我们评估了一种无二甲基磺代(ME2SO) - 无冷冻保存解决方案,以冻结人脂肪衍生的间充质基质细胞(HADSC)。在第一个实验中,我们将乳酸林格溶液(LR)中3%海藻糖(3 t)和5%葡萄糖(5D)的综合作用作为冷冻保存碱溶液,其中包含10%pro-Pylene甘油(PG)。在融化后立即将HADSC的细胞活力显着高(P <0.05),其中补充了3 t(LR-3 T)和3 t和5d(LR-3 T-5D)高于LR。在SEC-OND实验中,我们比较了含有10%ME2SO或10%Pg的LR-3 T-5D中HADSC冻融的细胞特性。细胞活力,膜联蛋白V型比,成菌构形成能力,细胞增殖,细胞表面抗原阳性,拟源分化,成骨分化以及对含有LR-3 T-5D后含有LR-3 T-5D后立即对HADSC的细胞因子刺激的遗传反应,含有LR-3 T-5D在10%ME2和10%之间。在第三个实验中,我们检查了各种
人类诱导的多能干细胞衍生的心肌细胞(HIPSC-CM)已被广泛用于治疗缺血性心脏病。但是,仍然存在限制治疗功效的剩余问题,例如免疫排斥和HIPSC-CMS的保留率低。人类脂肪间充质基质细胞(HADSC)据报道能够调节免疫反应,促进血管生成并促进HIPSC-CMS的成熟。在这项研究中,我们在由可生物降解的聚(D,l-乳酸 - 乙醇酸)(PLGA)聚合物制成的纤维支架上共培养了几天,以开发合成的3D心脏组织板。正如预期的那样,与仅在PLGA纤维上培养的HIPSC-CMS相比,细胞形成231.00±15.14μm厚的组织,具有改善的组织,比对,ECM条件,收缩能力和旁分泌功能。此外,复合的3D心脏组织片显着促进了移植后的植入和存活。组合的3D心脏组织表也提高了心脏功能,减弱心室重塑,纤维化减少以及大鼠心肌梗死模型的血管生成增强,这表明该策略受伤是临床情况下的一种有希望的治疗选择。
简介:本研究调查了发生细胞聚集的储存条件,以及当人脂肪组织衍生的间充质干细胞(HADSC)抑制细胞聚集的条件中,将乳酸林格溶液(LR)储存在3%的心形和5%Dextran 40(LR-3T-3T-3T-5D)中。方法:我们首先研究了存储温度和时间对存储在LR和LR-3T-5D中的HADSC的汇总和生存能力的影响。将细胞在5 C或25 C下储存,持续24小时。然后,我们评估了储存量(250-2,000 m L),细胞密度(2.5-20 10 5细胞/ml)和氮气替代对聚集的影响,在LR-3T-5D中,在25 c时储存24 h的HADSC的HADSCS的可行性以及HADSC的生存能力。结果:当存储在LR-3T-5D中时,与预存储相比,在任何情况下的生存能力都不会变化,但是细胞聚集速率在25 C时在25 C时持续24小时显着增加(P <0.001)。在LR中,在两种情况下的聚集率均未变化,但是在5 C和25 C下24小时后,细胞活力显着降低(P <0.05)。细胞聚集速率和PO 2随着溶液的体积和细胞密度的增加而降低。氮气替代显着降低了细胞聚集率和PO 2(p <0.05)。但是,在不同的储存量,密度和氮气替代的条件下,存储的细胞之间的生存力没有差异。©2023,日本再生医学学会。Elsevier B.V.结论:在LR-3T-5D中25 C存储后的细胞聚集可以通过增加存储量和细胞密度以及通过掺入氮的替代来抑制,从而降低了溶液中的PO 2。这是CC下的开放访问文章(http://creativecommons.org/licenses/4.0/)。
细胞外囊泡(EV)被人体的不同细胞分泌,并被认为是细胞间通信中的重要参与者。它们的生物学功能源于转移货物分子的能力,包括膜和胞质蛋白,脂质,核酸和代谢产物。evs,例如外泌体,更具体地说是干细胞衍生的外泌体,因为它们在各种疾病模型中作为无细胞诊断和治疗剂的潜在作用,包括皮肤,神经系统,心脏,肝脏和肾脏。搅拌坦克生物反应器是确保可靠,可再现和可扩展的细胞培养过程的强大工具,以满足干细胞对细胞和基因治疗应用的不断增长的需求。在这里,我们通过将生物反应器的参数控制与高速和超速离心的性能相结合,描述了从人脂肪衍生的干细胞(HADSC)的快速隔离工作流程。首先将细胞在DASBOX®迷你生物反应器系统中培养,然后通过高速离心机CR22N和Ultratifuge CP100NX的组合将分泌的电动汽车分离。使用这种方法,我们能够实现大量的纯净,完整的细胞外囊泡。