结果与讨论:通过野生型(WT)和TGP PSLOX2突变型线的DNA测序确定了稳定转基因PEA系(TGP)的成功CRISPR/CAS9介导的LOX基因编辑(TGP)。还评估了这些线路的LOX活性,PUFA水平和VOC。Compared to WT peas, the TGP lines showed a signi fi cant reduction (p < 0.05) in LOX activity and in the concentration of key VOCs, including hexanal, 2-hexenal, heptanal, (E)-2-heptenal, (E,E)-2,4- heptadienal, 1-octen-3-ol, octanal, (E)-2-octenal (E,E)-2,4-非二烯和Furan-2-苯基。在TGP浮动中,两个必需的PUFAS,亚油酸和二酚酸的含量是LOX的已知底物,表明CRISPRPR介导的基因编辑的效率在最小化其氧化和PUFAS及其产品的进一步调节方面具有效率。vocs的集合
呼吸组学是研究呼出气体的一种方法。它有助于发现生物标志物,并可作为评估身体疾病状态和预后的工具。5 呼吸组学正在发展成为一种快速、灵敏、特异且微创的方法,用于研究与身体功能相关的代谢途径释放的内源性挥发性有机化合物和无机气体。6 多位研究人员报告了呼吸中生物标志物水平与肺癌之间的关系。7 – 9 由于肺癌的死亡率非常高,因此开发可在早期检测疾病的工具迫在眉睫。如今,呼吸挥发性有机化合物 (VOC) 分析在该领域前景光明。在呼吸中发现的一些与肺癌相关的生物标志物包括丙醇、异戊二烯、丙酮、异戊烷、己醛、甲苯和苯。呼吸组学领域的先驱研究人员之一 Michael Philips
抽象的挥发性有机化合物(VOC)触发呼吸刺激性与三甲基尿症(TMAU)等疾病有关,“人们对我过敏”(PATM)(PATM),这些(PATM)发生在没有明确综合综合性关联的健康个体中。尽管没有建立的非靶向非挑战性诊断程序,但最近的研究还是使用了使用气相色谱 - 质谱法鉴定了与PATM相关的歧视性VOC。源于血液的呼吸VOC,对非侵入性诊断有望。我们对23个表现出TMAU样症状的人进行了呼气分析,并确定了各种挥发性有机化合物(VOC),这些化合物(VOC)区分了不同的亚组。使用逻辑回归,我们的准确性为88%,精确度和回忆为88-89%,将TMAU阴性个体与人生某个时候测试阳性的人区分开,仅基于氧化丙烷的存在(((2R)-2-甲氧烷-2s-甲氧烷和(2SS)-2-甲氧烷-2-甲氟烷)。但是,由于子集有限和缺少数据,它不能充当独立的生物标志物。将其他VOC包含在分析中,将模型的精度提高到85-95%,精确度和召回率在85%至100%之间,具体取决于使用的VOC组合。无监督的学习算法通常基于内源性VOC进行了积极测试的个体,而经过负测试的个体被聚集为两个不同的组。相反,TMAU阴性组表现出与空气样品中二级氧化应激相关的生物标志物的可能性更高。甲苯以前发现在PATM个体中升高,被确定为先前被诊断为TMAU的人的歧视性标记,但此后曾在仍经历症状的同时测试阴性。其他PATM生物标志物(例如P-二甲苯和六基因)在TMAU阳性个体中通常更高,并且与其他VOC相结合时是TMAU史的良好预测指标。我们的分析表明,TMAU阳性基团表现出更大的生物标志物,表明其呼吸样品中的晚期氧化应激和空气样品中的原发性氧化应激可能来自其皮肤。我们的发现突出了呼吸分析的潜力,作为用于特发性疾病的非侵入性诊断工具。他们强调了分析外源化学物质以洞悉代谢,解毒和消除毒素的重要性。这种方法可以帮助消除不必要的挑战测试,并强调代谢组学在理解这些条件下的机制中的作用。