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最初发表于：Heeb，Laura V；塔斯科帕兰，贝图尔；卡特苏拉斯（Katsoulas），安东尼奥斯（Antonios）；贝芬格，米哈尔；克拉维恩，皮埃尔-阿兰；狗头人，塞巴斯蒂安；古普塔，
免疫抑制分子程序性细胞死亡配体 1 (PD-L1) 已被证明在自身免疫、感染和癌症等病理中发挥作用。PD-L1 不仅在癌细胞上表达，而且在未转化宿主细胞上的表达也与癌症进展有关。小鼠系统中 PD-L1 缺陷的产生使我们能够专门研究 PD-L1 在生理过程和疾病中的作用。最通用且最易于使用的位点特异性基因编辑工具之一是 CRISPR/Cas9 系统，它基于 RNA 引导的核酸酶系统。与其前身锌指核酸酶或转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN) 类似，CRISPR/Cas9 催化双链 DNA 断裂，这可能导致由于非同源末端连接 (NHEJ) 的随机核苷酸插入或缺失而导致的移码突变。此外，尽管不太常见，但 CRISPR/Cas9 可以在存在合适模板的情况下通过同源定向修复 (HDR) 导致插入确定的序列。在这里，我们描述了使用 CRISPR/Cas9 在小鼠 C57BL/6 背景下敲除 PD-L1 的方案。外显子 3 的靶向结合 HindIII 限制位点的插入会导致过早终止密码子和功能丧失表型。我们描述了靶向策略以及创始者筛选、基因分型和表型。与基于 NHEJ 的策略相比，所提出的方法可产生具有与 NHEJ 相当的效率和时间线的确定终止密码子，生成方便的创始者筛选和基因分型选项，并且可以快速适应其他目标。
碳偏移市场的现场证据
11还应强调，实验设计特定于碳抵消，作为公司提供的附加服务。尽管这种做法在现实世界中的消费市场中广泛存在，但体验设计和发现可能无法直接适用于将碳排放直接嵌入产品或金融资产中的设置，例如Heeb等人。（2023）。12相对于先前的文献，本文中采用的方法在识别WTP的方式上有所不同。Heeb等。 （2023）和Pace等。 （2023）使用Becker – Degroot – Marschak机制，其中受试者在具有不同程度的碳排放的选项之间做出多种选择，最后一个选择在最后随机实现。 此方法虽然被广泛接受，但并不适用于自然现场实验或观察数据。 为了克服这一挑战，我将价格和碳排放量随机化，然后使用这种变化来估计McFadden等人精神的随机效用模型。 （1973）和Hanemann（1984）。 了解跨研究的不同启发方法如何影响WTP将是未来研究的重要途径。Heeb等。（2023）和Pace等。（2023）使用Becker – Degroot – Marschak机制，其中受试者在具有不同程度的碳排放的选项之间做出多种选择，最后一个选择在最后随机实现。此方法虽然被广泛接受，但并不适用于自然现场实验或观察数据。为了克服这一挑战，我将价格和碳排放量随机化，然后使用这种变化来估计McFadden等人精神的随机效用模型。（1973）和Hanemann（1984）。 了解跨研究的不同启发方法如何影响WTP将是未来研究的重要途径。（1973）和Hanemann（1984）。了解跨研究的不同启发方法如何影响WTP将是未来研究的重要途径。