产品名称:NheI-HF® 产品编号:R3131S 浓度:20,000 U/ml 单位定义:一个单位定义为在 37ºC 下 1 小时内消化 rCutSmart 缓冲液中的 1 µg Lambda DNA(HindIII 消化物)所需的酶量,总反应体积为 50 µl。 包装批号:10275520 有效期:01/2027 储存温度:-20°C 储存条件:250 mM NaCl、10 mM Tris-HCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、50% 甘油、0.15% Triton X-100、200 µg/ml rAlbumin(pH 7.4 @ 25ºC) 规格版本:PS-R3131S/L v2.0
There are no restriction sites for the following enzymes: AarI(x), Acc65I, AcuI, AfeI, AgeI, AlwI, AlwNI, ApaI, AscI, AsiSI, AvrII, BamHI, BanII, BclI, BglI, BglII, BlpI, BmgBI, BmrI, BmtI, BsaI, BsaXI, BsgI, BsmBI, BspDI, BspEI, BsrFI, BsrGI, BstBI, BstEII, BstYI, BstZ17I, Bsu36I, ClaI, DpnI, DpnI, EagI, EcoN, EcoO1 FseI, FspAI(x), HindIII, I-CeeI, I-SceI, CPNI,MBOI,MSCI,NEI,NCOI,NDEI,NGOMIV,NHEI,NENI,NSSII,NSSII,NSPI,PFLI,PFLI,PMMI,PMLI,PMLI,P; PMLI,P; PMLI,P; PMLI,PPUTMI,PPHMI,PPHMI,PPHMI,PPHMI,PPHMI,P; PSPOME,PSPXI,PVI,PVII,RSRII,SACI,SALI,SALI,SANDI(X),SAU3AI,SBFI,SFII,SFII,SFII,SGRI,SGRI,SGRI,SMAI,SMAI,SMAI,SNABI,SPEI,SPEI,SPEI,SPHI,SPHI,SPHI,SRFMI(SRFMI(X)
There are no restriction sites for the following enzymes: AarI(x), Acc65I, AcuI, AfeI, AgeI, AlwI, AlwNI, ApaI, AscI, AsiSI, AvrII, BamHI, BanII, BclI, BglI, BglII, BlpI, BmgBI, BmrI, BmtI, BsaI, BsaXI, BsgI, BsmBI, BspDI, BspEI, BsrFI, BsrGI, BstBI, BstEII, BstYI, BstZ17I, Bsu36I, ClaI, DpnI, DpnI, EagI, EcoN, EcoO1 FseI, FspAI(x), HindIII, I-CeeI, I-SceI, CPNI,MBOI,MSCI,NEI,NCOI,NDEI,NGOMIV,NHEI,NENI,NSSII,NSSII,NSPI,PFLI,PFLI,PMMI,PMLI,PMLI,P; PMLI,P; PMLI,P; PMLI,PPUTMI,PPHMI,PPHMI,PPHMI,PPHMI,PPHMI,P; PSPOME,PSPXI,PVI,PVII,RSRII,SACI,SALI,SALI,SANDI(X),SAU3AI,SBFI,SFII,SFII,SFII,SGRI,SGRI,SGRI,SMAI,SMAI,SMAI,SNABI,SPEI,SPEI,SPEI,SPHI,SPHI,SPHI,SRFMI(SRFMI(X)
甲基化不敏感的ISSCHIZOMER(市售)Aflii Cttaag 1 5 Asei Attaat 2 4 Avrii CCTAGG 1 5 BAMI GTATCC 1 5是的是-Bcli GCCNC TGTACA 1 5 BCLI GCCNC TGTACA 1 5 BSTEIIIIC 5 econnnagg ii aagctt 1 5是kpni ggtac 5 1是是msci tggcca 3 3 muni/mfei caattg 1 5是Ncoi Cctggg 1 5是Ndei catatg catatg catatg ctgcag 5 1 ctgcag 5 1 yes pvuii is是的Sphi xbai stuit stuig 5是xmni gaannttc 5 5是是
免疫抑制分子程序性细胞死亡配体 1 (PD-L1) 已被证明在自身免疫、感染和癌症等病理中发挥作用。PD-L1 不仅在癌细胞上表达,而且在未转化宿主细胞上的表达也与癌症进展有关。小鼠系统中 PD-L1 缺陷的产生使我们能够专门研究 PD-L1 在生理过程和疾病中的作用。最通用且最易于使用的位点特异性基因编辑工具之一是 CRISPR/Cas9 系统,它基于 RNA 引导的核酸酶系统。与其前身锌指核酸酶或转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN) 类似,CRISPR/Cas9 催化双链 DNA 断裂,这可能导致由于非同源末端连接 (NHEJ) 的随机核苷酸插入或缺失而导致的移码突变。此外,尽管不太常见,但 CRISPR/Cas9 可以在存在合适模板的情况下通过同源定向修复 (HDR) 导致插入确定的序列。在这里,我们描述了使用 CRISPR/Cas9 在小鼠 C57BL/6 背景下敲除 PD-L1 的方案。外显子 3 的靶向结合 HindIII 限制位点的插入会导致过早终止密码子和功能丧失表型。我们描述了靶向策略以及创始者筛选、基因分型和表型。与基于 NHEJ 的策略相比,所提出的方法可产生具有与 NHEJ 相当的效率和时间线的确定终止密码子,生成方便的创始者筛选和基因分型选项,并且可以快速适应其他目标。
摘要。在澳大利亚昆士兰州北部爆发的中期死亡综合症期间,对 24 只濒死对虾进行了调查,首次从中培养出 14 株支原体分离株。从对虾的鳃附属物、大脑和眼睛中分离出支原体。支原体在含有 0.5 至 3.0% 氯化钠和 20% 胎牛血清的改良 Frey 培养基中,在有或没有 CO2 的情况下在 20 至 37°C 之间生长。在 37°C 和 5% CO2 下观察到最佳生长。所有菌株都经过大小过滤和克隆,并将它们的形态、生化和生物分子特征与以前描述的支原体种的特征进行了比较。结果表明,这些菌株属于 2 个新种,为其指定了临时名称支原体 P1 (MPI) 和支原体 P2 (MP2)。两种支原体都能发酵大多数测试的碳水化合物,但不能水解精氨酸和尿素。MP1 产生薄膜和斑点,具有高磷酸酶活性,但 MP2 不会产生薄膜或斑点,也没有磷酸酶活性。两种物种都能裂解绵羊红细胞。从 MP1 DNA 中制备基因组文库(Mbol 消化)并克隆到 pUC19 中。使用从纯化的 MPI 制备的探针进行菌落杂交,以识别感兴趣的菌落。通过用 EcoRI 和 HindIII 消化从重组质粒中回收 MP1 DNA 片段。该 DNA 用于制备随机引物探针,用于与来自 MP1、MP2、M. bovis、M. dispar、M. agalactiae、M. bovjyenitalium、M. ovipneumonjae、支原体组 7、M. aryinini 和属于不同属的细菌的固定 DNA 进行点印迹杂交分析。该探针仅与来自 MP1 的基因组 DNA 发生反应。为了进一步提高灵敏度,设计了一种 MP1 特异性聚合酶链反应 (PCR) 检测方法,并产生了 254 bp 扩增子,可将 MP1 与所有其他测试的支原体 DNA 区分开来。使用 DNA 探针和 PCR 检测方法,从患病虾中分离出的大多数支原体可指定为菌株 MP1 (11/14,-80%)。