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ORS 2025年会第334号会议论文
nesa.milan@ucsf.edu简介：肩袖撕裂会导致肩部疼痛和功能障碍，从而显着影响受影响患者的生活质量。肌肉萎缩和脂肪变性对肩袖（RC）修复后的临床结果产生负面影响。血流限制（BFR）是一种治疗方法，涉及血液流动的暂时限制，用于刺激下肢创伤和ACL重建后刺激肌肉再生和疼痛缓解[1]。但是，BFR的基本机制仍然未知，并且尚未应用于RC损伤。纤维生成祖细胞（FAP）是常驻的骨骼肌干细胞，已证明具有向肌原细胞捐赠线粒体的能力，以减少肌肉退化和RC泪液后的肩部功能改善[2]。这项研究的目的是研究BFR促进肌肉再生，改善肩部功能并缓解RC撕裂后的疼痛的能力和机制。我们假设BFR诱导了从FAP到肌细胞的水平线粒体转移，从而增强了肌肉再生，改善运动学功能并减轻RC损伤后的疼痛。方法：由于其解剖位置，直接将BFR应用于RC肌肉在技术上具有挑战性。取而代之的是，我们将BFR应用于肩膀附近的同侧臂，提出了一种更可行和转化的方法。这是通过将正畸橡皮筋涂在RC损伤的臂上，持续10分钟，然后切除10分钟，进行3个周期。小鼠。进行了功率分析，以确定所需的最小样本量。我们首先对健康的男性Prrx1-Cre/mitotag Fap-Monochondria Reporter小鼠（n = 4/组）测试了BFR。supraspinatus（SS）肌肉在手臂的同侧带有BFR，以进行组织学分析。在PRRX1-CRE/MITOTAG小鼠（n = 8/组）上，对BFR对受伤的RC肌肉的影响，单侧SS和肌腱横向和神经（TT+DN）进行了诱导RC撕裂。小鼠随机分配每三天或无作为对照治疗接受同侧ARM BFR。记录了手术前后小鼠的步态，并使用基于AI的步态分析系统（称为BlackBoxò）进行分析。疼痛。小鼠，并分析了SS肌肉的Mitotag信号传导和肌纤维大小。使用ImageJ分析所有图像。在基线时使用Blackbox和DeepLabcut评估运动学功能，并在OP后6周评估了前步长的长度和体重比率。 所有程序均由我们的IACUC批准。 结果：同侧ARM BFR在诱导SS肌肉中从FAP到肌细胞的线粒体转移具有显着影响（图1A-G）。 这种效果持续了BFR后长达3天，大约10.7％的肌纤维仍含有FAP转移的线粒体（图1E，G）。 与非BFR对照相比，在TT+DN损伤后2和6周，BFR在SS中的FAP线粒体转移显着增加（图2A-E，G）。运动学功能，并在OP后6周评估了前步长的长度和体重比率。所有程序均由我们的IACUC批准。结果：同侧ARM BFR在诱导SS肌肉中从FAP到肌细胞的线粒体转移具有显着影响（图1A-G）。这种效果持续了BFR后长达3天，大约10.7％的肌纤维仍含有FAP转移的线粒体（图1E，G）。与非BFR对照相比，在TT+DN损伤后2和6周，BFR在SS中的FAP线粒体转移显着增加（图2A-E，G）。此外，BFR处理后的平均肌纤维大小显着增加（横截面肌纤维面积，1d：2250±909.3μm2vs基线：1250±635μm2；图1A-F，H），在3天返回到基线。与对照相比，在TT+DN后2周，BFR治疗的肌肉的肌纤维大小明显更大（2315±442.5μm2vs 897.7±308.2μm2，图2A-D，F），表明其抗嗜性作用。在TT+DN损伤后6周，BFR和对照之间的肌纤维大小没有差异（图2A-D，H）。在运动参数方面，与非BFR对照组（p <0.05）相比，BFR显着改善了小鼠（平均= 2.16厘米）的小鼠（平均= 2.16厘米）的右手前步长（平均= 2.16厘米）（P <0.05）（图3A）。与非BFR对照组相比，BFR治疗组（平均值= 0.99）（平均= 0.55）（p <.01），BFR治疗组的前爪体重比（同侧/对侧）显着提高（平均值= 0.99）。该数据表明，TT+DN后，BFR显着缓解了小鼠的肩部疼痛（图3B）。
生物安全官员 - UConn健康工作机会
•确保符合生物安全在微生物和生物医学实验室的要求以及涉及重组或合成核酸分子的NA研究指南（NIH指南）。•符合影响工作场所生物安全的各种已发表的法律，监管机构和标准，促进生物安全计划。•根据康涅狄格州公共卫生部（DPH）规定，确定，检查和坐标对UConn Health Laboratories进行注册。•是机构生物安全委员会（IBC）和生物危害委员会 - DURC机构审查实体的常任成员；领导IBC的协调和管理，确保对注册的审查完成，建议研究人员，员工和其他人就NIH指南的要求和应用。•检查实验室以确保监管合规性，并为适当的生物危害和其他危害提供有关风险评估和遏制的指南。•审查涉及生物危害的IACUC方案，并批准了生物危害和合并的生物危害/化学危害安全协议，该协议专门针对实验计划，以控制有害材料或技术。•协助研究人员和研究人员制定开发和编写危害安全协议，并建立和实施与他们的工作和使用危险材料或技术相关的研究计划的特定过程和控制。•开发并为研究人员，CCM员工，研究生和精选代理商的用户等小组提供培训。•就危险实验涉及的设施的设计和管理建议研究人员，以及涉及运输和接收危险生物材料等的联邦许可证问题。•对设施/实验室进行健康和安全检查/审核，以评估合规性状态，准备有关发现的书面报告，并进行后续活动，以确保纠正缺陷。•调查实验室记录保存和允许数量的精选剂（SA）毒素的清单；批准，订单和接收SA毒素订单。•回应研究人员的要求，要求涉及室内空气质量，危险材料，溢出物和其他问题•作为内部部门，教职员工，学生，员工和外部监管机构有关生物安全和安全计划的主要联系点；识别，评估和建议与生物安全和安全有关的职业健康和研究合规性问题。•支持并参与环境健康和安全部门的工作和活动。•支持赞助计划办公室，以审查涉及生物安全和保障的赠款和合同；在必要时与赞助商在问题上进行沟通。•及时了解适用的法规和生物安全方面的新发展； •根据需要执行其他相关职责。
汉密尔顿机构生物安全委员会 (HIBC) 协议...
首席研究员：_______________________________ 部门：__________________________________ 电话： 电子邮件：__________________________________ 办公室地点：__________________________________ 实验室地点：__________________________________ 项目名称：__________________________________ 提交日期：_________________________________ 请将填妥的表格寄回给 HIBC 官员兼汉密尔顿机构生物安全委员会主席 Siobhan Robinson，地址：3065 Science Center，或发送电子邮件至 sxrobins@hamilton.edu 一般说明：此表格旨在确保遵守 NIH/CDC 关于研究实验室生物安全的指南和 ASM 关于教学实验室生物安全的指南。此表格确保您； 了解研究中涉及的潜在危害，设计实验以尽量减少此类危害，并已将这些潜在危害和保护措施传达给参与研究或实验室维护的任何人。在某些情况下，将多个生物/实验合并到一份表格中可能是合适的。如果表格清晰易懂，那么 PI 可以随意将多个实验/生物添加到此表格中。请标记您将要完成的部分 A 部分：重组 DNA 实验。指出 DNA 的任何不良影响、所用培养物的数量以及实验描述。还请提供有关 rDNA 系统中使用的 DNA 插入物、载体和宿主细胞的详细信息。有关更多信息，请访问 NIH 网站：https://osp.od.nih.gov/wp-content/uploads/NIH_Guidelines.pdf B 部分：致病微生物。能够在免疫正常的健康成人中引起疾病的病原体必须在 B 部分中注册。这些病原体包括 CDC《微生物和生物医学实验室生物安全》最新版出版物中归类为 RG-2 或更高级别的生物。 https://www.cdc.gov/labs/BMBL.html?CDC_AA_refVal=https%3A%2F%2Fwww.cdc.gov%2Fbiosafety%2 Fpublications%2Fbmbl5%2Findex.htm RG-2 或更高级别需要注册。C 部分：人类血液、细胞系、组织或其他潜在传染性材料 (OPIM)。这些物品，包括从商业来源获得的已建立的人类/灵长类动物细胞系，也包括在此要求中。OPIM 是可能传播 HIV、HBV、HCV 和其他血液传播疾病的材料，包括已知感染任何这些病原体的动物组织、微生物储库和培养物、某些体液、未固定的人体组织、原代组织/细胞培养物，必须在 C 部分注册。这些必须在 RG-2 条件下处理，就像它们是原代细胞或组织一样。欲了解更多信息，请访问 CDC 网站：http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/index.htm D 部分：对上述任何选择的动物进行管理。向动物施用上述任何药剂均需获得 IACUC 的批准，并且可能还要求将动物饲养在专用笼子中并在 RG-2 条件下处理。第 E 部分：安全措施。所有注册都必须填写此部分。第 F 部分：确认。所有注册都必须填写此部分。
ORS 2025年会议论文编号190
凯利·奥特（Kelly Ott）1，迈克尔·弗里德曼（Michael Friedman）1，杰西卡·威廉姆森（Jessica Williamson）1，亨利·多纳休（Henry Donahue）1，詹妮弗·普策（Jennifer Puetzer）1,2个生物医学工程和2个骨科外科，弗吉尼亚州英联邦，弗吉尼亚州里士满大学，弗吉尼亚州里士满大学，美国弗吉尼亚州，电子邮件：ottkr@vcu.edu.eedu nifors the Donahue（N），Jennifer Puetzer（N）简介：等级胶原蛋白纤维是肌腱和韧带中强度和功能的主要来源。机械提示对于这些纤维和组织的健康和维持至关重要。1,2进一步的机械负载的废除或减少会显着减少肌腱力学； 2-4然而，确切的机制在很大程度上未知。对肌腱中卸载的细胞反应的更好理解是必要的，以防止诸如卧床等不活动的有害影响，减少长期太空旅行期间的肌腱变性，并在受伤后制定更好的康复方案。2,3,5此外，有必要调查肌腱对废药的反应是否有所不同。虽然在肌肉和骨骼中对废物的影响进行了充分的研究，但肌腱中卸载的作用的研究较少。5大多数关于肌腱反应的研究对缺乏人类遗传变异性的男性近交小鼠或大鼠进行的大多数研究，限制了这些研究的潜力探索对人类的影响或阐明肌腱卸载中的性别差异。方法：34岁的男性和女性16周大的小鼠将其右后杆固定在铸件中3周，这是一项较大的研究的一部分，该研究评估了废物对骨骼和肌肉的影响。5 Diversity outbred (DO) mice are developed by crossbreeding eight genetically diverse inbred founder strains —C57Bl/6J, A/J, 129S1/SvImJ, NOD/ShiLtJ, NZO/HlLtJ, CAST/EiJ, PWK/PhJ and WSB/EiJ—resulting in a population of genetically variable mice that more closely match human responses.4这项研究的目的是通过遗传可变的单肢固定对阿喀琉斯肌腱的影响进行研究，以更好地理解替纳西特对卸载的反应，并评估替纳科斯对废药的抗性反应中的性别差异。左后篮子均无腐蚀，以用作对侧对照。所有程序均由VCU IACUC批准。3周后，处死小鼠，并去除两个后杆中的跟腱。肌腱被随机分配以进行分析：对于每种性别，n = 11固定进行组织分析，n = 10被冷冻进行机械分析，并分析了n = 13的基因表达和组成。铸造和未散布肌腱。6张拉伸性能。7由于难以固定肌腱，拉伸特性仅限于脚趾区域的性质，并具有降低的N。机械师被报道为男性或女性铸造腱的力学之比与相同性别的未固定肌腱的平均值。用于组成分析的肌腱被称重，冻干并称重干燥以确定水百分比。通过RT -PCR分析了基因表达，用于COL1A1，COL3A1，LYSYL氧化酶（LOX），Aggrecan（ACAN），硬化性（SCX），MMP3和MMP13，归一化为GAPDH，并报告为GAPDH，并报告为2 -∆ΔCT，可比较每只鼠标中的未腐蚀型胎盘中的表达。肌腱DNA，成熟的LOX交叉链接，糖胺聚糖（GAG）和胶原蛋白含量分别通过Picogreen，pyridinium elisa，dmmb和羟基丙烯测定法确定。数据被标准化为湿重，并报告为每只小鼠的铸造与未受肌腱的比率。用配对的2路ANOVAS确定力学和组成的显着性，以比较铸件与脱节和1路ANOVAS与男性和女性比率进行比较，以及Tukey在两者的事后。单样本t检验用于确定比率平均值和1之间的显着性，代表铸造/未分离比没有变化。基因表达显着性通过邓恩（Dunn）事后的Kruskal-Wallis检验分析，并对单样本进行排名1。全部，p <0.05被认为是显着的。结果：共聚焦分析显示胶原蛋白组织没有明显的差异，而不论失去或性别如何（图1A）。此外，尽管与负载/未加载肌腱保持相似的压力松弛特性，但与负载肌腱相比，男性和女性卸载肌腱都显着降低了脚趾模量和过渡应力（图1B），反映了先前的报道。2有趣的是，尽管未载肌腱的拉伸特性相似，但雄性和雌性小鼠的细胞反应明显不同。女性卸载/铸造腱显着上调COL1A1，COL3A1，LOX，ACAN，SCX，MMP3和MMP13的表达，与已加载/未加载/无肌腱相比，男性仅上调MMP13，而MMP3和MMP13仅与女性表达相似。水平的水在任何小鼠的铸造和未肌腱之间都没有变化（图2B），但是与未固定肌腱和雄性小鼠相比，女性卸载/铸造肌腱显着增加了DNA，与雄性相比，成熟的LOX交叉链接（吡啶醇）显着增加了成熟的LOX交叉链接（吡啶醇），并且与Gags和collagen contents contect and Collagen contents contects cons conse。相反，与载荷肌腱相比，雄性的LOX交叉链接显着降低，胶原蛋白的一般，胶原蛋白的不显着降低（图2C）。讨论：虽然男性和雌性DO小鼠的致命肌腱似乎在胶原蛋白组织中没有发生变化，但它们确实有3周的废弃时间，但它们确实减少了拉伸力学（图1）。这些结果在很大程度上与先前对近孕雄性小鼠进行的研究相关，2但是，对于为什么力学降低时，胶原蛋白组织保持不变。有人建议这是由于LOX交联降低，但2-4，但是我们在这里没有发现。有趣的是，雄性和女性的细胞反应明显不同。雄性小鼠表现出更为分解代谢的反应，MMP表达显着增加，交联和胶原蛋白减少，但是将PYD归一化为胶原蛋白没有变化（未显示），表明LOX交联的降低主要是由于胶原蛋白的下降是由于胶原蛋白的下降。相反，雌性小鼠似乎具有病理和合成代谢的反应，可将Col3a1，Lox，Acan和MMP的表达显着增加。尽管成分的性别特定变化，但两个性别的肌腱力学与废物的肌腱力学显着降低，这表明在废弃以再生和修复肌腱后，可能需要针对性特定的靶向治疗。正在进行的工作正在进一步量化原纤维和纤维水平的胶原蛋白组织。的意义：在这里，我们评估了残疾人对遗传变化小鼠的致命肌腱的影响，我们发现男性和女性之间的性别差异显着，响应于卸载。更好地理解男性和女性的肌腱如何应对废药，可以帮助保护肌腱免受长期不活动的有害作用，防止长期太空旅行的变性，并有助于改善受伤后的康复方案。2,3,5 RESENCES：1.Galloway+ JBSA 2013; 2.Magnusson+ J Physio 2018; 3. Roffino+ Life Sci Space Res 2021; 4.Almeida-Silveira+ Eur J Appl Physio 2000; 5.Liphart+ NPJ微重力2023; 6.Puetzer+ Biomat 2021; 7.Ansorge+ Ann BME 20112,3,5 RESENCES：1.Galloway+ JBSA 2013; 2.Magnusson+ J Physio 2018; 3. Roffino+ Life Sci Space Res 2021; 4.Almeida-Silveira+ Eur J Appl Physio 2000; 5.Liphart+ NPJ微重力2023; 6.Puetzer+ Biomat 2021; 7.Ansorge+ Ann BME 2011