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Immunocult™小鼠T细胞激活剂试剂盒
Immunocult™小鼠T细胞活化器试剂盒设计用于在没有磁珠，进料器细胞或抗原的情况下激活和扩展小鼠T细胞。Immunocult™小鼠T细胞活化剂试剂盒由结合CD3和CD28细胞表面配体的可溶性抗体复合物组成，并可以选择结合CD2。抗体复合物的结合导致CD3和CD28细胞表面配体的交联，从而提供了所需的初级和共刺激信号，以进行T细胞激活。通过CD2的交联，也可以通过可溶性抗体复合物增强T细胞激活。活化的小鼠T细胞可以在不同的培养基中扩展（请参见A节），并补充了细胞因子。
Immunocult™人CD3/CD28/CD2 T细胞活化剂
图3。通过免疫™人类CD3/CD28/CD28/CD2 T细胞激活剂EasySep™分散的人T细胞的强大人体T细胞扩展在12天内通过Immunocult™人类CD3/CD28/CD28/CD2 T细胞活化剂在Immunocult™-XF T细胞扩张培养基中补充了人类重新组合IL-2。 在第0天，1 x 10^6 easep™分散的人T细胞用Immunocult™-XF T细胞膨胀培养基中的25 µL免疫™人CD3/CD3/CD3/CD3/CD28/CD2T细胞活化剂，并补充了10 ng/ml的人类重组IL-2。 在第3、5、7和10天，对可存活的细胞进行计数，并加入补充IL-2的新鲜培养基。 在12天的培养期间，未添加其他免疫™人CD3/CD28/CD2 T细胞活化剂（在6个供体的6个实验中，平均值±SD）。通过免疫™人类CD3/CD28/CD28/CD2 T细胞激活剂EasySep™分散的人T细胞的强大人体T细胞扩展在12天内通过Immunocult™人类CD3/CD28/CD28/CD2 T细胞活化剂在Immunocult™-XF T细胞扩张培养基中补充了人类重新组合IL-2。在第0天，1 x 10^6 easep™分散的人T细胞用Immunocult™-XF T细胞膨胀培养基中的25 µL免疫™人CD3/CD3/CD3/CD3/CD28/CD2T细胞活化剂，并补充了10 ng/ml的人类重组IL-2。在第3、5、7和10天，对可存活的细胞进行计数，并加入补充IL-2的新鲜培养基。在12天的培养期间，未添加其他免疫™人CD3/CD28/CD2 T细胞活化剂（在6个供体的6个实验中，平均值±SD）。
人原代T细胞基因组编辑
（ A ）使用ImmunoCult™ 人 CD3 / CD28 或 CD3 / CD28 / CD2 T 细胞激活活化剂人 T 2 - 3 天后，通过将 TCR αβ 和 CD3 受体与抗体结合，进行流式分析，来测定 TRAC 的敲除效率。每个条件的每个数据点代表一个单独的供体；n = 4 - 8 个供体。每一列线路表示干±标准差。（ B ） ）首先人T细胞被ImmunoCult™人CD3 / CD28 T细胞剂激活活化剂3天，然后进行电转。在电转48小时后，通过ArciTect™ T7循环内切酶I试剂盒测定基因组编辑（切割）的效率。 RNP 电转：+ RNP 。（ C - D ）被ImmunoCult™ 人 CD3 / CD28 T 细细胞激活剂活化 3 天的人 T 细胞经（ C ）模拟电转（无 RNP ）和（ D ） RNP 电转后 TCR αβ 和 CD3 的流式分析点图。（ E ）被ImmunoCult™ 人 CD3 / CD28 T 细胞激活剂活化 3 天的人 T细胞的CD4和CD8流式分析点图。
SP00235-优化人类T细胞活化和扩增方案可提高基因改造效率和总细胞产量
使用嵌合抗原受体 (CAR) T 细胞进行癌症免疫治疗是一个快速发展的领域，制造这些细胞是一个复杂的过程，需要多个优化步骤。我们已经开发出用于分离、激活和扩增人类 T 细胞的试剂，可用于临床细胞疗法制造。可溶性 ImmunoCult™ 人类 T 细胞激活剂通过交联细胞表面的 CD3 和共刺激分子来诱导 T 细胞活化。然后可以对活化的 T 细胞进行基因改造，随后在无血清和无异种的 ImmunoCult™-XF T 细胞扩增培养基中扩增。在这里，我们介绍了几种使用 ImmunoCult™ 产品的优化策略，以获得高转染效率和最大细胞产量。通过评估 T 细胞的活化动力学并确定最佳转染时间点，可以显著提高 CRISPR/Cas9 和慢病毒介导的基因修饰方法中的转染效率。我们的研究还表明，在激活后第三天将 T 细胞稀释至较低的细胞密度可大大提高细胞活力和累积细胞生长，从而使培养 10 - 12 天后的总人类 T 细胞扩增超过 1000 倍，活力 > 85%。扩增的 T 细胞共表达 CD45RO + CD62L + 。例如，我们应用此处描述的工作流程从健康供体中生成 T 细胞受体 α β (TCR αβ ) 敲除 (KO) T 细胞，敲除效率高达 90%。使用 EasySep™ 人 TCR αβ 耗竭试剂盒可以进一步提高 TCR αβ KO 细胞的纯度。总之，本研究中概述的流程可以轻松快速地实施，以提高 T 细胞制造效率。
人类T细胞研究
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