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氮原子插入麦诺尔以访问苯并e的
致力于开发用于制备苯唑骨骨骼的效果方法。单原子插入代表了杂环合成的最有趣的方法之一，并为获取有价值的苯并牙素建立了新的机会。在此，我们报告了一种反应，其中氮原子直接插入麦诺尔，以通过叠氮化物中间体产生相应的苯唑环环（图1d）。为了将氮原子插入舞台，我们建议利用艾尔诺尔作为底物，这可以破坏芳族环的稳定性。noLs可以用作位置选择性氮插入中的指导组。与苯环添加到32 - 35中不同，该策略有助于C - C键裂解，更重要的是，实现了现场选择性的氮原子插入。
多点：用于测试多...
多传感器融合是一种关键技术，可以解决众多安全至关重要的任务和应用，例如自动驾驶汽车和自动化的机器人臂。随着数据驱动的人工智能（AI）的持续进步，MSF的感测和理解错综复杂的外部环境的潜力得到了进一步扩大，从而对智能系统，特别是其感知系统产生了深远的影响。类似于传统软件，启用AI的MSF系统也需要足够的测试。然而，现有的测试方法主要集中于单传感器感知系统（例如，基于图像和基于点云的对象检测系统）。仍然缺乏对MSF系统生成多模式测试案例的重视。为了解决这些局限性，我们设计和实施了多测试，这是一种适用于复杂MSF感知系统的健身指导的变质测试方法。Mutitest采用物理感知方法来综合现实的多模式对象实例，并将它们插入背景图像和点云的关键位置。健身指标旨在指导和增强测试过程。我们使用五个SOTA感知系统进行了广泛的实验，以从以下角度评估多性：（1）生成的测试用例现实主义，（2）故障检测能力，以及（3）绩效改善。结果表明，多点可以生成现实且模态的测试数据，并有效地检测到正在测试的MSF系统的数百个不同故障。此外，在由Muttitest生成的测试用例上重新验证MSF系统可以改善系统的鲁棒性。我们的复制软件包和合成的测试数据集可在https://sites.google.com/view/msftest上公开获得。
非洲的发展战略与国际融入
摘要：本文探讨了自 20 世纪中叶非洲大陆开始正式独立以来，非洲各国所采用的发展和国际融入战略的演变。在此背景下，本文在文献综述和非洲国际组织发布的官方文件的支持下，旨在了解《2063 年议程》对这一问题的意义和重要性。基于此分析，本文旨在证明这一议程代表着非洲大陆新发展和国际融入战略的开启，这是一种混合战略，它调和了先前采用的两种方法的元素：竞争战略和共同责任战略。
使用CRISPR
从前发表的那些（Lin等人）修改了所使用的原生质体再生方案（图1）（图1），2018年； Hsu等。，2019年）。我们方法的关键是一个事实，即细胞周期的阶段在很大程度上控制了途径的选择。nhej是G1，S和G2阶段中的主要DNA修复途径，而HDR仅在晚期和G2阶段发生（Hiom，2010； Puchta和Fauser，2014）。细胞周期同步已有效提高人类胚胎肾脏293T细胞的Ti效率（Li等，2014）。为了增加晚期和G2相细胞，将烟叶孵育在含有½的强度MS，0.4 M甘露醇，1 mg/L脑苯甲甲基乙酸（NAA）和0.3 mg/l动力蛋白（1N0.3K）之前的固体培养基（1N0.3K），请在原生物分离之前三天（图S1）。在N. Benthamiana中，为了简化过程，我们添加1 mg/l naa和
水稻中靶向、高效的序列插入和替换
CRISPR–Cas9 方法已被用于在植物中产生随机插入和缺失、大量缺失、短序列的靶向插入或替换以及精确的碱基变化 1 – 7 。然而，用于功能基因组学研究和作物性状改良所需的长序列和基因的靶向插入或替换的通用方法很少，并且很大程度上取决于选择标记的使用 8 – 11 。基于在哺乳动物细胞中开发的方法 12 ，我们利用化学修饰的供体 DNA 和 CRISPR–Cas9 将长达 2,049 个碱基对 (bp) 的序列（包括增强子和启动子）插入水稻基因组，效率为 25%。我们还报道了一种依赖于同源性定向修复、化学修饰的供体 DNA 和目标位点串联重复序列的基因替换方法，以 6.1% 的效率实现了长达 130 bp 的序列的替换。在哺乳动物细胞中，使用平端的、5'-磷酸化的双链寡脱氧核苷酸 (dsODN)，在两条 DNA 链的 5' 和 3' 端带有两个硫代磷酸酯键，可导致寡脱氧核苷酸 12 的强有力靶向整合。硫代磷酸酯键修饰旨在稳定细胞中的寡核苷酸，而 5'-磷酸化可促进非同源末端连接 (NHEJ)，这是修复双链断裂 (DSB) 的主要途径，尤其是在培养细胞中。在用于再生小植株的培养植物细胞中，例如水稻愈伤组织细胞，NHEJ 也是主要的 DSB 修复途径 10,13。因此，这种类型的修饰 dsODN 可能会提高植物细胞中靶向插入的效率。为了验证这一假设，从水稻ADH1（酒精脱氢酶1）14 的5′非翻译区（UTR）中取出一个60bp的翻译增强子（ADHE）作为供体DNA，插入水稻的主要耐盐基因座SKC1（补充表1）15。如图1a所示，体外合成的ADHE供体DNA两侧有两个带有硫代磷酸酯键和5′-磷酸化修饰的核苷酸（ADHE；见补充图1b）。为了与传统供体DNA进行比较，还合成了未修饰的单链和双链寡脱氧核苷酸（ssADHE和dsADHE），带有三核苷酸多态性以供检测（图1b和补充图1b）。设计了一个针对 5 ʹ UTR 的单向导 RNA (sgRNA) (sgRNA-1)，并将其构建到 CRISPR–Cas9 载体 pCBSG032 中（图 1c 和补充图 1a）。将三个供体 DNA 寡核苷酸按等摩尔比例混合，然后通过粒子轰击法将其与 CRISPR–Cas9 质粒 DNA (sgRNA-1) 一起引入中花 11 (ZH11) 水稻愈伤组织中。
扩展跳跃基因：使用Alu插入...
本实验室检查了16染色体的DNA区域，该区域可以在染色体的非编码区域内包含称为ALU的短核苷酸序列。学生将从盐水漱口水获得的细胞中制备自己的DNA样品，使用PCR扩增靶向基因座，然后使用琼脂糖凝胶电泳来确定该ALU的存在或不存在，该ALU跳入了数万年前的染色体。类数据被用作探索等位基因频率和Hardy-Weinberg平衡的一部分，并使用模拟服务器来建模人口遗传学原理。实验室长度：6小时建议的前LAB教学
希克曼线插入和关怀您的线
辐射风险•为了安全地执行，您的程序需要在X射线指导下插入该行。X射线是一种电离辐射。研究表明，暴露于高剂量的电离辐射的人在暴露几年或几十年后会增加患癌症的机会。但是，尽管更复杂或更困难的病例可能需要更高的辐射剂量，但与此过程相关的辐射暴露量很小。•是对您的医生和放射医生的评估，将执行该程序的好处大于暴露于辐射的风险。专业的放射科医生和放射线照相师将确保在手术过程中保持辐射暴露尽可能低。•我对在此过程中接触辐射的风险有任何疑问，您可以在同意过程中与将执行您的程序执行的放射科医生进行进一步讨论。•如果您认为自己可能怀孕，请通知临床团队。
pangenomes有助于准确检测大插入和...
1。意大利布雷西亚布雷西亚大学分子与转化医学系2。 国家心脏和肺研究所，伦敦帝国学院，英国伦敦3. Velsera Inc，美国马萨诸塞州查尔斯敦4。 皇家布隆普顿和哈雷菲尔德医院，盖伊和圣托马斯的NHS基金会信托基金会，英国5。 MRC医学科学实验室，伦敦帝国学院，伦敦，英国6。 阿斯万心脏中心，阿斯万，埃及7。 Meyer儿童医院，意大利佛罗伦萨8。 生物学和医学遗传学系，捷克共和国布拉格的查尔斯大学和摩托大学医院第二夫人士。 捷克共和国布拉格查尔斯大学和摩托大学医院第二学院心脏病学系10. 意大利佛罗伦萨大学实验与临床医学系11. 遗传学单位，IRCCS ISTITUTO CENTRO SAN GIOVANNI DI DIO DIO FATEBENEFRATELLI，意大利布雷西亚12. SOD Diagnostica Genetica，Azienda Ospedaliero Universitaria Careggi，佛罗伦萨，意大利佛罗伦萨13。 七桥基因组学公司，美国马萨诸塞州查尔斯敦，美国14。 Bristol Myers Squibb，美国马萨诸塞州剑桥市15。 心血管和基因组学研究所，伦敦伦敦市圣乔治大学，英国16。 阿姆斯特丹大学阿姆斯特丹UMC临床和实验心脏病学系，意大利布雷西亚布雷西亚大学分子与转化医学系2。国家心脏和肺研究所，伦敦帝国学院，英国伦敦3. Velsera Inc，美国马萨诸塞州查尔斯敦4。 皇家布隆普顿和哈雷菲尔德医院，盖伊和圣托马斯的NHS基金会信托基金会，英国5。 MRC医学科学实验室，伦敦帝国学院，伦敦，英国6。 阿斯万心脏中心，阿斯万，埃及7。 Meyer儿童医院，意大利佛罗伦萨8。 生物学和医学遗传学系，捷克共和国布拉格的查尔斯大学和摩托大学医院第二夫人士。 捷克共和国布拉格查尔斯大学和摩托大学医院第二学院心脏病学系10. 意大利佛罗伦萨大学实验与临床医学系11. 遗传学单位，IRCCS ISTITUTO CENTRO SAN GIOVANNI DI DIO DIO FATEBENEFRATELLI，意大利布雷西亚12. SOD Diagnostica Genetica，Azienda Ospedaliero Universitaria Careggi，佛罗伦萨，意大利佛罗伦萨13。 七桥基因组学公司，美国马萨诸塞州查尔斯敦，美国14。 Bristol Myers Squibb，美国马萨诸塞州剑桥市15。 心血管和基因组学研究所，伦敦伦敦市圣乔治大学，英国16。 阿姆斯特丹大学阿姆斯特丹UMC临床和实验心脏病学系，国家心脏和肺研究所，伦敦帝国学院，英国伦敦3.Velsera Inc，美国马萨诸塞州查尔斯敦4。 皇家布隆普顿和哈雷菲尔德医院，盖伊和圣托马斯的NHS基金会信托基金会，英国5。 MRC医学科学实验室，伦敦帝国学院，伦敦，英国6。 阿斯万心脏中心，阿斯万，埃及7。 Meyer儿童医院，意大利佛罗伦萨8。 生物学和医学遗传学系，捷克共和国布拉格的查尔斯大学和摩托大学医院第二夫人士。 捷克共和国布拉格查尔斯大学和摩托大学医院第二学院心脏病学系10. 意大利佛罗伦萨大学实验与临床医学系11. 遗传学单位，IRCCS ISTITUTO CENTRO SAN GIOVANNI DI DIO DIO FATEBENEFRATELLI，意大利布雷西亚12. SOD Diagnostica Genetica，Azienda Ospedaliero Universitaria Careggi，佛罗伦萨，意大利佛罗伦萨13。 七桥基因组学公司，美国马萨诸塞州查尔斯敦，美国14。 Bristol Myers Squibb，美国马萨诸塞州剑桥市15。 心血管和基因组学研究所，伦敦伦敦市圣乔治大学，英国16。 阿姆斯特丹大学阿姆斯特丹UMC临床和实验心脏病学系，Velsera Inc，美国马萨诸塞州查尔斯敦4。皇家布隆普顿和哈雷菲尔德医院，盖伊和圣托马斯的NHS基金会信托基金会，英国5。MRC医学科学实验室，伦敦帝国学院，伦敦，英国6。阿斯万心脏中心，阿斯万，埃及7。Meyer儿童医院，意大利佛罗伦萨8。生物学和医学遗传学系，捷克共和国布拉格的查尔斯大学和摩托大学医院第二夫人士。捷克共和国布拉格查尔斯大学和摩托大学医院第二学院心脏病学系10.意大利佛罗伦萨大学实验与临床医学系11.遗传学单位，IRCCS ISTITUTO CENTRO SAN GIOVANNI DI DIO DIO FATEBENEFRATELLI，意大利布雷西亚12.SOD Diagnostica Genetica，Azienda Ospedaliero Universitaria Careggi，佛罗伦萨，意大利佛罗伦萨13。七桥基因组学公司，美国马萨诸塞州查尔斯敦，美国14。Bristol Myers Squibb，美国马萨诸塞州剑桥市15。心血管和基因组学研究所，伦敦伦敦市圣乔治大学，英国16。阿姆斯特丹大学阿姆斯特丹UMC临床和实验心脏病学系，
使用深度探测器减少土星轨道插入脉冲……
∗ 通讯作者 † 航空航天工程系助理教授，elena.fantino@ku.ac.ae。‡ 副研究教授，UPC 北校区，Gran Capitán s/n，rflores@cimne.upc.edu。§ 正教授，空间动力学组，ETSIAE，Pza. Cardenal Cisneros 3，j.pelaez@upm.es。¶ 博士，空间动力学组，ETSIAE，Pza. Cardenal Cisneros 3，v.raposo.pulido@upm.es。