成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 及其伴随蛋白 (Cas9) 是目前最有效、最高效和最精确的基因组编辑技术。CRISPR/Cas9 系统的两个基本组成部分是向导 RNA (gRNA) 和 CRISPR 相关 (Cas9) 蛋白。在 CRISPR/Cas9 的治疗应用中,选择和实施安全有效的递送系统已被证明是一个重大问题。对于体内 CRISPR/Cas9 递送,病毒载体是天然专家。由于其递送效率高于其他递送方法,因此腺病毒载体 (AdV)、腺相关病毒 (AAV) 和慢病毒载体 (LV) 等载体现在被广泛用作递送方法。本综述彻底研究了使用各种病毒载体作为 CRISPR/Cas9 递送手段的最新成果,以及每种病毒载体的优点和局限性。我们还讨论了克服当前限制和适应技术的未来想法。
注释:1 仅适用于 ED 驱动器 2 标称流明。有关确切值和适用于灯具尺寸的可用流明输出,请参阅性能表 3 RLW4' 和 RLW8' 流明封装 XW - ML 可耐受高达 40°C 的温度 4 RLW4' 和 RLW8' 流明封装 HL 和 VL 可耐受高达 35°C 的温度 5 DALIP 仅在选择 LVS、LVR 或 ODPG 控制选项时可用 6 有关与 Dual-Lite LiteGear® 逆变器兼容代替安装的电池组,请联系代表。不适用于 2' 7 仅适用于通用电压和固定输出驱动器选项 8 用于紧急电路控制负载,包括传感器和无线系统 CSA 认证符合 UL 924。仅适用于 0-10V 驱动器。仅限通用电压。有关接线图,请参阅规格表 9 每个灯具耦合器都需要悬挂支撑;参见安装配件指南 10 不适用于 DTS、GTD、ATSD。 11 同一排的所有灯具必须具有相同的驱动器类型和电压。
所有学生都有机会通过Lee Virtual School在线参加课程。希望参加Lee Virtual School课程的学生将在白天安排在实验室环境中进行课程。有资格参加Lee Virtual课程,学生必须在FSA阅读中获得4或5级,并且可以在家中访问Internet。父母的支持和参与也是学生在Lee Virtual School课程中取得成功的关键。如果您对Lee Virtual School课程感兴趣,请通过jenniffermpi@leeschools.net数字信息技术(LVS)给Jenniffer Pierson发送电子邮件:此创新课程为您提供各种技术领域的未来职业所需的基础技能。您将探索新兴技术,数字设计,Microsoft Office在线应用程序等等!您将评估自己的优势,并了解它们与潜在职业机会的关系。本课程提供了选修学分,满足了高中毕业的角色教育和实践艺术要求,并是许多激动人心的职业和技术教育课程的先决条件。
c alendar d escription本课程对数字集成电路的设计方法和电子设计自动化(EDA)技术进行了全面探索。Key subjects encompass synthesizable Hardware Description Language (HDL), basics of cell-based design, design for testability, functional simulation, gate-level synthesis and optimization, technology mapping, static timing analysis, basics of physical design, standard cells and Intellectual Property (IP) core placement, power grid planning, clock network synthesis, placement and routing of IO pads, global and detail routing, parasitic extraction,反向通道和栅极级别的模拟,金属和多填充剂,密封环,设计规则检查(DRC),布局与示意图(LVS)。将使用行业标准的CAD工具来证明完整的设计过程。s Chedule和Mode of Delivery本课程的材料将通过讲座,阅读和实际作业的混合物传递。请与教师和/或大道联系以学习时间表和交付方式。讲座:星期二,上午11:30 - 下午2:30 @ PC 335 I NSTRUCTOR AMEER ABDELHADI博士电子邮件:ameer@mcmaster.ca办公室:ITB-A322电话:905-525-9140。26008办公时间:通过预约cours w ebsite / s < / div>
结果:在心室编程刺激期间,DB/DB和HFHS喂养的小鼠显示出VT和T-WAVE替代品的增加。这些小鼠的心肌细胞表现出早期造影后的表现。 这两种模型均表明对副交感神经抑制的心率反应降低,表明自主神经功能障碍。 CGMP介导心脏副交感神经刺激,在DB/DB和HFHS喂养的小鼠的LV中降低。 相反,用可溶性鸟苷酸环化酶刺激(Riociguat)或磷酸二酯酶5抑制(sildenafil)降低VT诱导性的CGMP增强。 PKG1 lzm小鼠具有正常的自主响应性,但VT诱导性过高。 dB/db,HFHS和LZM小鼠分别表现出多活化的心肌糖原合酶三酶3βGSK3)。 此外,用TWS119抑制GSK3废除了这些小鼠的诱导VT。 舒张性胞质Ca 2+的重新摄取坡度在所有模型的心肌细胞中降低,而TWS119的GSK3抑制作用却反转了这种效果。 在HFHS-FED和LZM小鼠中抑制肌胞浆/内质网ca 2+ ATPase 2A-介导的Ca 2+再摄取的磷酸/磷酸磷脂(PLB)。心肌细胞表现出早期造影后的表现。这两种模型均表明对副交感神经抑制的心率反应降低,表明自主神经功能障碍。CGMP介导心脏副交感神经刺激,在DB/DB和HFHS喂养的小鼠的LV中降低。 相反,用可溶性鸟苷酸环化酶刺激(Riociguat)或磷酸二酯酶5抑制(sildenafil)降低VT诱导性的CGMP增强。 PKG1 lzm小鼠具有正常的自主响应性,但VT诱导性过高。 dB/db,HFHS和LZM小鼠分别表现出多活化的心肌糖原合酶三酶3βGSK3)。 此外,用TWS119抑制GSK3废除了这些小鼠的诱导VT。 舒张性胞质Ca 2+的重新摄取坡度在所有模型的心肌细胞中降低,而TWS119的GSK3抑制作用却反转了这种效果。 在HFHS-FED和LZM小鼠中抑制肌胞浆/内质网ca 2+ ATPase 2A-介导的Ca 2+再摄取的磷酸/磷酸磷脂(PLB)。CGMP介导心脏副交感神经刺激,在DB/DB和HFHS喂养的小鼠的LV中降低。相反,用可溶性鸟苷酸环化酶刺激(Riociguat)或磷酸二酯酶5抑制(sildenafil)降低VT诱导性的CGMP增强。PKG1 lzm小鼠具有正常的自主响应性,但VT诱导性过高。dB/db,HFHS和LZM小鼠分别表现出多活化的心肌糖原合酶三酶3βGSK3)。此外,用TWS119抑制GSK3废除了这些小鼠的诱导VT。舒张性胞质Ca 2+的重新摄取坡度在所有模型的心肌细胞中降低,而TWS119的GSK3抑制作用却反转了这种效果。在HFHS-FED和LZM小鼠中抑制肌胞浆/内质网ca 2+ ATPase 2A-介导的Ca 2+再摄取的磷酸/磷酸磷脂(PLB)。
廉价的Covid-19(冠状病毒疾病)的摘要口服输送疫苗可以显着提高免疫率,尤其是在低收入和中等收入国家。先前,我们描述了一个潜在的通用covid-19 vacin,RLVS D CAPB /MN,包括复制细菌载体,LVS(活疫苗菌株)D CAPB,表达高度保守的SARS-COV-2(严重的急性呼吸道呼吸道呼吸道合成型甲状腺囊状2)膜的膜和核的蛋白质(n)蛋白质(n)构成蛋白质(N)构成蛋白质,构成蛋白酶素,在鼻内,在高剂量SARS-COV-2呼吸道挑战之后,可以保护仓鼠免受严重的COVID-19类样疾病。在这里,我们表明疫苗的口服管理还可以防止大剂量SARS-COV-2呼吸挑战;它的保护与皮内,鼻内或皮下施用相当。仓鼠可免受严重的体重减轻和肺部病理的保护,并减少了口咽和肺病毒滴度。在小鼠中诱导脾脏和肺细胞干扰素γ响应于N蛋白刺激的疫苗的疫苗的保护和组织疫苗的保护症在hamsters中与hamsters相关,该仓鼠具有挑战前的抗semange se- thellenge secom and th1偏置抗NTh1偏置的IgG(IgG2/3)。因此,RLVS D CAPB /MN具有口服统一COVID-19疫苗的潜力。
div> dylan Rosser www.dylanrosser.us工作经验高级模拟电路设计师NXP半导体NXP半导体•LED电力管理IP开发新产品介绍•与SOC Architect合作,与SOC Architect合作开发MCU电源架构和规格•建模,设计和模拟的电压参考,调节器和检测技能之间的交易•均衡•调查•调节•杠杆设计•均衡型号•衡量型号,并衡量型号,并在范围内进行衡量•均衡级别的行为•平衡巡回赛•专家•生产的可交付成果,例如示意图,网表,GD,LEF,模型,自由和文档•分析的老化,可靠性,SOA,SOA,DFMEA,可交付成果的质量模拟电路设计器II NXP半导体•模拟,优化和设计了各种用于数据转换器的iP和Power Machine IP的子计数,以实现多种机器学习的•用于机器学习的最佳FLED和DRC•DRC•DRC•DRC•DRC•DRC•DRC•drc•DREC•drc•drc•drc•drc•drc•drc•drc• IP•在SystemVerilog,Veriloga和Python中对SAR和管道ADC建模•脚本验证以自动化数据分析和可视化研究和助教Carnegie Mellon University•设计并布置了高速的两阶段比较器,在65nm CMOS中进行了高速两阶段的比较器•开发的Microelectronic Circen interne internect internement internect internement internect internection•构成了一项自动式的奖励•颁发的均等•验证电气工程师Cosentini Associates
* 通讯地址:Aaron N. Hata,麻省总医院癌症中心,149 13th St,查尔斯顿,马萨诸塞州 02129,美国。ahata@mgh.harvard.edu,Michael S. Lawrence,麻省总医院癌症中心,149 13th St,查尔斯顿,马萨诸塞州 02129,美国。mslawrence@mgh.harvard.edu,Hideko Isozaki,麻省总医院癌症中心,149 13 th St,查尔斯顿,马萨诸塞州 02129,美国。hisozaki@mgh.harvard.edu。‡ 同等贡献作者贡献 HI、ANH、MSL 设计了研究、分析了数据并撰写了论文。HI、NN、WS、SM、MS、HFC、FMS、DT、HA、VN 和 ANH 进行了细胞系实验,研究药物敏感性和耐药性演变、APOBEC 表达分析和细胞信号通路研究。 SO、PJ 和 RB 进行 RNA 编辑研究。HI 和 MS 进行 DNA 损伤实验。HI、NN、HFC、NP、SB、MGC 进行肿瘤异种移植研究。KD、AR 从 NSCLC 患者中生成了患者来源的细胞系。RS、AA、AL、ML、CO、CSC、JJL、YEM 和 MSL 对细胞培养实验模型和临床肿瘤样本的全基因组和全外显子组测序、RNA-seq 和 ATAC-seq 进行计算分析。LZ、NJD、CB、GG、RB、JAE 参与实验设计和数据解释。MKB、RGC、ATS、JFG、JJL、LVS 和 ZP 提供了 NSCLC 患者样本和临床数据解释。BYY 对患者样本进行统计分析。ANH 和 MSL 对研究做出了同等贡献。所有作者都讨论了结果并对手稿发表了评论。
肌动蛋白 ( MYOC ) 突变是已知的原发性开角型青光眼的主要遗传原因,约占所有病例的 4%。MYOC 突变会导致功能获得性表型,其中突变的肌动蛋白会在内质网 (ER) 中积聚,导致 ER 应激和小梁网 (TM) 细胞死亡。因此,在基因组水平上敲除肌动蛋白是永久治愈该疾病的理想策略。我们之前已成功利用 CRISPR/Cas9 基因组编辑通过腺病毒 5 (Ad5) 靶向 MYOC。但是,Ad5 不是适合临床使用的载体。在这里,我们试图确定腺相关病毒 (AAV) 和慢病毒 (LV) 靶向 TM 的功效。首先,我们通过玻璃体内 (IVT) 和前房 (IC) 注射检查了单链 (ss) 和自互补 (sc) AAV 血清型以及表达 GFP 的 LV 的 TM 趋向性。我们观察到 LV_ GFP 表达对通过 IVT 途径注射的 TM 更具特异性。色氨酸突变体 scAAV2 的 IC 注射显示 TM 中 GFP 的显著表达。然而,在睫状体和视网膜中也观察到了强劲的 GFP 表达。我们接下来构建了表达 Cas9 和靶向 MYOC (crMYOC) 的引导 RNA (gRNA) 的慢病毒颗粒,并用 LV_cr MYOC 转导稳定表达突变型肌动蛋白的 TM 细胞可显著减少肌动蛋白积累及其相关的慢性 ER 应激。在 Tg-MYOC Y437H 小鼠中单次 IVT 注射 LV_cr MYOC 可减少 TM 中的肌动蛋白积累并显著降低升高的眼压。总之,我们的数据表明,LV_cr MYOC 靶向 TM 中的 MYOC 基因编辑并挽救了肌动蛋白相关青光眼的小鼠模型。
输送液体流动的自然结构表现出流动介导力和长期适应之间的相互作用。这种现象与心血管系统有关,其中心腔的几何重塑是导致心力衰竭的病理进展的主要机制。这里分析了心脏中只有一个右心室 (SRV) 的儿童的心脏适应性。在这些患者中,左心室 (LV) 发育不良,健康的右心室 (RV) 在出生后早期通过手术重新连接,以承担系统心室的功能作用。这种情况代表了一种研究心脏适应性的特殊模型,本研究利用了不常见的数据集(64 个正常 RV、64 个正常 LV、64 个具有临床正常功能的 SRV)。从流体动力学和组织变形的角度分析心室功能性能,目的是验证 SRV 配置从原始 RV 适应到向 LV 功能发展的程度。结果表明,由于工作压力较高,SRV 的体积立即增大,几何形状也更宽。然而,流体动力学湍流较弱,推进力减小。周围组织出现肌肉增厚,肌纤维多向取向,模仿 LV。然而,流动性能降低和结构一致性较低使 SRV 面临更高的进行性功能障碍适应风险。这项研究表明了心脏流量和组织反应之间的相互作用如何代表导致心力衰竭发展的宏观驱动因素。更一般地说,联合评估流体动力学和结构功能特性可能是探索不同时间尺度上的适应过程的必要条件。