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儿童软组织肉瘤的 CRISP(Y) 未来
从 Jinek 等人（2012、2013）和 Qi 等人（2013）的工作开始，原核生物用于防御外源病毒的自适应系统——成簇的规律间隔回文重复序列 (CRISPR) 与 CRISPR 相关核酸内切酶 9 (Cas9) 配对，越来越多地被认可为一种强大而有效的基因组编辑工具。RNA 引导的 CRISPR/Cas9 由一条小的引导 RNA (sgRNA) 与 Cas9 复合而成，它与目标 DNA 配对会诱导单个 Cas9 依赖的双链断裂 (DSB)（由 Lino 等人，2018 年综述）。由此产生的编辑包括在活细胞基因组的特定目标区域删除或插入特定序列，或改变预先存在的 DNA 序列（图 1）。近期，该技术已得到丰富，可用于标记 DNA 区域（Banito 等人，2018 年）、调节内源基因表达（La Russa 和 Qi，2015 年）或改变表观遗传状态（Vojta 等人，2016 年）。与转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN) 和锌指核酸酶 (ZFN) 技术相比，CRISPR/Cas9 允许进行多重分析，构建速度快且更易于递送，编辑效率更高，即使脱靶切割更频繁（Gupta 和 Musunuru，2014 年）。在过去十年中，这种方法已经进入了癌细胞存活、转移和耐药性的基础和临床前肿瘤学研究领域。在这篇小型评论中，我们将概述 CRISPR/Cas9 技术，特别关注其在揭示致瘤机制和确定一组易位阳性儿童软组织肉瘤 (STS) 中可能针对的途径中的应用。
基于 CRISPR-Cas9 的基因组工程...
（Doudna 和 Charpentier，2014 年）并在图 1a 中以示意图形式显示。许多细菌物种都有 CRISPR 和 Cas 基因座的变体，其中作为基因组编辑工具研究最广泛的变体是 CRISPR-Cas9 系统（Makarova 等人，2011 年）。CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑需要一个 Cas9 引导 RNA（gRNA）复合物，其中包含 Cas9、CRISPR RNA（crRNA）和反式激活 CRISPR RNA（tracrRNA）（见框 1：CRISPR 术语）。如前所述，可以通过多种方法将该复合物引入靶细胞（Lino 等人，2018 年；Shi 等人，2021 年）。在 crRNA 的引导下，该复合物与补体 DNA 结合，并伴有侧翼的原始间隔区相邻基序 5 0 -NGG-3 0（对于化脓性链球菌 Cas9）（ Chylinski 等人，2013）。Cas9-gRNA 复合物在靶位点诱导双链断裂（ Deltcheva 等人，2011；Shah 等人，2013），靶细胞可以通过非同源末端连接 (NHEJ)（ Hefferin 和 Tomkinson，2005）或同源定向修复 (HDR)（ Liang 等人，1998）进行修复。在 NHEJ 中，断裂的 DNA 链被重新连接，可以直接重新连接，也可以在随机核苷酸插入或缺失后重新连接（ Takata 等人，1998）。这通常会导致移码突变和过早的终止密码子，因此，这种机制很容易用于敲除目的蛋白的表达。在 HDR 中，双链断裂是使用姐妹染色单体作为同源模板链来修复的。通过多次交换、DNA 合成和连接，受损链可以得到精确修复（Takata 等，1998）。不用姐妹染色单体作为模板链，而是将含有所需突变或基因盒的外源 DNA 模板以单链或双链 DNA 的形式引入，同源臂在外侧（Chen 等，2011；Radecke 等，2010；Rouet 等，1994）。多年来，越来越多的实验皮肤病学领域的研究利用了 CRISPR-Cas9 工具箱，尽管目前的数量有限，但在过去 5 年中有所增加（图 1 b 和 c 以及表 1）。本综述旨在认识到在人类表皮角质形成细胞 (KC) 中进行的所有 CRISPR-Cas9 工作，以确定在不同人类 KC 细胞来源中可用的最佳实践和成功策略的关键决定因素，同时为未来使用 CRISPR-Cas9 进行研究提供关键考虑，无论是基础应用还是临床应用。
开发2 in -1传感器进行安全评估...
摘要：电池在实现零排放目标以及向更循环经济的过渡方面起着关键作用。确保电池安全是制造商和消费者的重中之重，因此是一个积极的研究主题。金属氧化物纳米结构具有独特的特性，使它们在电池安全性应用中具有很高的希望。在这项研究中，我们研究了半导体金属氧化物的气体感应能力，用于检测由常见电池组件（例如溶剂，盐或其脱气产物）产生的蒸气。我们的主要目标是开发能够早日检测到通过电池故障产生的常见蒸气以防止爆炸和进一步的安全危害的传感器。Typical electrolyte components and degassing products for the Li-ion, Li − S, or solid-state batteries that were investigated in this study include 1,3-dioxololane (C 3 H 6 O 2 DOL), 1,2-dimethoxyethane (C 4 H 10 O 2 DME), ethylene carbonate (C 3 H 4 O 3 EC), dimethyl carbonate (C 4 H 10 O 2 DMC),锂双锂（三氟甲磺酰基）（litfsi），硝酸锂（lino 3）盐中的DME和DME混合物中的盐，六氟磷酸锂（LIPF 6），氮基因二氧化物（No 2）和磷酸磷酸磷酸盐（No 2），氮（NO 2）。我们的传感平台基于由TIO 2（111）/CUO（1̅11）/CU 2 O（111）和CuO（1̅11）/Cu 2 O（111）组成的三元和二进制异质结构，分别具有各种CUO层（10、30和50 nm）。我们已经使用扫描电子显微镜（SEM），能量分散性X射线光谱（EDX），微拉曼光谱和紫外线 - 可见（UV- VIS）光谱分析了这些结构。我们发现，传感器可靠地检测到DME C 4 H 10 O 2蒸气，浓度为1000 ppm，气体响应为136％，浓度低至1、5和10 ppm，响应值分别为7、23和30％。我们的设备可以用作2英寸1传感器，在低工作温度下充当温度传感器，在高于200°C的温度下充当气体传感器。密度功能理论计算还被用来研究由电池溶剂或其脱气产品以及水的蒸汽产生的蒸气的吸附，以调查湿度的影响。PF 5和C 4 H 10 O 2显示出最放热的分子相互作用，这与我们的气体反应研究一致。我们的结果表明，湿度不会影响传感器的性能，这对于在锂离子电池恶劣条件下早期发现热失控至关重要。我们表明，我们的半导体金属氧化物传感器可以检测到具有高精度的电池溶剂和脱气产品产生的蒸气，并且可以用作高性能电池安全传感器，以防止在电池故障中爆炸。尽管传感器独立于电池类型而工作，但此处提供的工作特别值得监视固态电池，因为DOL是通常用于此类电池中的溶剂。关键字：CUO，TIO 2，异质结构，气体传感器，电池安全性，2合1传感器
利用基因组编辑技术生产转基因小鼠的简便方法
细菌免疫。Science。337 : 816-821, 2012。6）Gaj T, Gersbach CA, Barbas CF.: 基于ZFN、TALEN 和CRISPR/Cas 的基因组工程方法。Trends. Biotechnol. 31 : 397-405, 2013。7）Doudna JA, Charpentier E.: 基因组编辑。利用CRISPR-Cas9 进行基因组工程的新前沿。Science。346 : 1258096, 2014。8）Strecker J, Ladha A, Gardner Z 等：利用CRISPR 相关转座酶进行RNA 引导的DNA 插入。Science。 365 ：48-53，2019。9）Klompe SE，Vo PLH，Halpin-Healy TS 等：转座子编码的 CRISPR-Cas 系统直接介导 RNA 引导的 DNA 整合。Nature。571 ：219-225，2019。10）Jacobi AM，Rettig GR，Turk R 等：用于高效基因组编辑的简化 CRISPR 工具及其向哺乳动物细胞和小鼠受精卵中的精简协议。方法。121-122 ：16-28，2017。11）Lino CA，Harper JC，Carney JP 等：CRISPR 的递送：挑战和方法综述。药物递送。 12）Kaneko T.：用于产生和维持有价值动物品系的生殖技术。J. Reprod. Dev. 64：209-215，2018。 13）Mizuno N，Mizutani E，Sato H等：通过腺相关病毒载体通过CRISPR/Cas9介导的基因组编辑实现胚胎内基因盒敲入。iScience。9：286-297，2018。 14）Yoon Y，Wang D，Tai PWL等：利用重组腺相关病毒在小鼠胚胎中精简体外和体内基因组编辑。Nat. Commun. 9 : 412, 2018。15）Takahashi G, Gurumurthy CB, Wada K, 等：GONAD：通过输卵管核酸递送系统进行基因组编辑：一种新型的小鼠微注射独立基因组工程方法。Sci. Rep. 5 : 11406, 2015。16）Sato M, Ohtsuka M, Nakamura S.：输卵管内滴注溶液作为在体内操纵植入前哺乳动物胚胎的有效途径。New Insights into Theriogenology, InTechOpen, London, 2018, pp 135-150。 17）Sato M，Takabayashi S，Akasaka E 等：基因组编辑试剂在小鼠生殖细胞、胚胎和胎儿体内靶向递送的最新进展和未来展望。Cells。9：799，2020。18）Alapati D，Zacharias WJ，Hartman HA 等：宫内基因编辑治疗单基因肺疾病。Sci. Transl. Med。11：eaav8375，2019。19）Nakamura S，Ishihara M，Ando N 等：基因组编辑成分经胎盘递送导致中期妊娠小鼠胎儿胚胎心肌细胞突变。IUBMB life。 20）Sato T, Sakuma T, Yokonishi T 等：利用 TALEN 和双切口 CRISPR/Cas9 在小鼠精原干细胞系中进行基因组编辑。Stem Cell Reports。5：75-82，2015。21）Wu Y, Zhou H, Fan X 等：通过 CRISPR-Cas9 介导的基因编辑纠正小鼠精原干细胞中的一种遗传疾病
阿贾耶·德乌干 Ka Gana 平台
使用上述协议。瑞典印度尼西亚村庄的肖像小企业和企业家，也称为晶体管 mos。随着用户输入的字符逐个字符地出现在所有用户屏幕上，brown 和 woolley 消息发布了基于网络的 talkomatic 版本，通过超链接和 URL 链接。最后，他们确定的所有标准成为了新协议开发的先驱，该协议现在被称为 tcpip 传输控制协议互联网协议，通过超链接和 url 连接。Knnen sich auch die gebhren ndern，dass 文章 vor ort abgeholt werden knnen。