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落叶牙髓移植中母质凝胶的影响
抽象的背景：未成熟的恒牙中的纸浆再生取决于落叶牙齿的果肉是否可以在移植后与周围组织建立早期血液供应连接。这项研究旨在探索Matrigel移植后对早期血液供应的影响。方法：准备了恒牙的空根管，并将其分为3组（n = 18）。A组（落叶纸浆组）：提取落叶牙齿的果肉，将其移植到空根管中，然后皮下植入裸鼠。落叶纸浆/母质组作为B组，空根组为组。结果：植入后8周进行组织化学和免疫组织化学检查。两组A和B组在根管中都涉及纸浆组织和纤维结缔组织。免疫组织化学染色表明，人体血小板内皮细胞粘附分子1（CD31）阳性细胞分散在纸浆组织区域上，而小鼠CD31阳性细胞则散布在结缔组织区域。同时，人Nestin免疫组织化学为阳性，阳性细胞分布在纸浆组织中。落叶牙髓/母质组的微血管计数明显更高和神经纤维的光密度（p <0.05）。结论：这项研究表明，矩阵可以在移植后促进原发性牙齿牙髓生存力。
让Matrigel在4oC上解冻过夜（保持冷冻瓶...
10％DMSO 50％50％您的细胞在我们中生长的任何介质我们现在都使用低温稳定器CS10（遵循制造商的说明）使其冷介质从Wells到冷冻到冻结细胞的选择方法（胰蛋白酶或EDTA）-spin -spin -Spin @ 1200rpm @ 1200rpm（在常规媒体中使用RI。，如果您不需要与EDTA旋转单元格脱离，除非您有很多井） - 使用P1000移液管（-Add -add冻结媒体量的冻结媒体量所需的冻结媒体） - 每次冻结小瓶需要冰冻的媒体） - 带有液体的液化介质） - 带有piftette -distertibute -distribute -distribute -distribute -distribute -distribute -distribute -distribute -distribute 1ml/freezing vial -pute -pute -put -pute -put -pute -pute -80 deg to -80 degre。- 一天（或一个月），将小瓶带到液氮饲料（MEF，原发性胚胎成纤维细胞， -irryradied）中，我们使用Life Technologies CAT＃A34181（MTI -Globalstem cat＃gsc -6001g）
细胞外基质对胰腺癌患者衍生器官的精确医学实用性
使用患者衍生的类器官（PDOS）来表征治疗敏感性和耐药性是一种有前途的精确药物方法，并且在几项大型多机构临床试验中，正在对其为临床决策提供信息的潜力。pdos在最常见的商业上最常获得的基底膜提取物（BME）的细胞外基质中培养。每个临床部位都使用不同的BME批次，并且由于商业BME来源的可用性，可能会受到限制。但是，不同来源的BME对器官药物反应的影响尚不清楚。在这里，我们测试了BME源对小鼠和人类胰腺导管腺癌（PDA）器官的增殖，药物反应和基因表达的影响。与Cultrex和Ultimatrix相比，Matrigel的人类和小鼠类器官都显示出增加的增殖。但是，当在Matrigel，Cultrex或Ultimatrix中培养器官时，我们没有观察到对药物反应的实质性影响。我们也没有观察到基因表达在不同的BME源中的主要变化，PDOS维持了其经典或基础样的名称。总体而言，我们发现BME源（Matrigel，Cultrex，Ultimatrix）不会改变PDO剂量响应曲线或药物测试结果，这表明PDO药物分型是精确医学的强大方法。
人类 iPSC 亚型定向分化为心房和心室心肌细胞
15. 将 Matrigel 包被的培养板和 hiPSC 培养基预热至 20-25 C。16. 从预包被的培养板中吸出 Matrigel 并加入 hiPSC 培养基（6 孔板每孔 2 ml）。17. 将 9 ml hiPSC 培养基加入到 15 ml 离心管中。18. 将低温小瓶直接转移到 37 C 水浴中并观察解冻过程。当管中大部分内容物解冻并仅剩下一小块冰时，迅速取出并用 70％ 乙醇彻底清洗。19. 小心地将细胞逐滴转移到准备好的带有培养基的 15 ml 离心管中。以 200 3 g 的速度离心 5 分钟。20. 小心吸出上清液。将沉淀物悬浮在 hiPSC 培养基（例如 1 ml）中，并接种到准备好的 Matrigel 包被的培养板上。前 24 小时加入 1 ml/ml 2 mM Thiazovivin（最终浓度 2 m M）。21. 如果 24 小时后细胞附着良好，则用 hiPSC 培养基更换培养基。如果附着力较低，再加入 1 ml/ml 2 mM Thiazovivin（最终浓度 2 m M），培养 24 小时。从第二天开始，每天更换培养基，每孔（6 孔）加入 2 ml hiPSC 培养基。继续“hiPSC 传代和维护”，步骤 1-8。
无涂层培养基建立和...
人类多能干细胞（HPSC），例如胚胎干细胞（ESC），种系干细胞和诱导的多脂质干细胞（IPSC），有可能产生用于细胞疗法和再生药物1-4的无可能细胞来源。HPSC的传统扩增需要小鼠喂食器细胞或用细胞外基质（ECM）（例如Matrigel和Geltrex）预涂培养设备，以促进细胞粘附和细胞增殖5,6。然而，小鼠喂食器细胞和基质醇具有特种形式，并且可能有临床使用的风险。当前生产临床级HPSC的当前方案采用了定义的ECM分子，例如体外 - 内染蛋白，层粘连蛋白（层粘连蛋白511），重组层粘连蛋白或层粘连蛋白片段（层粘连蛋白-511 E8），以促进细胞培养物培养物培养物培养物培养物的塑料塑料7,8。在培养基中添加层粘连蛋白片段，玻璃纤维或αI抑制剂（IαI）可以促进HPSC粘附到细胞培养血管9,10上。然而，这些重组蛋白的产生需要复杂的基于哺乳动物的细胞的人体作用。高成本限制了他们用于大众PSC生产的应用。
CRISPR 筛选可识别调控黑色素瘤细胞侵袭性的基因
恶性癌细胞会不受控制地增殖，并可能转移到远处器官。转移的一个关键步骤是癌细胞在扩散到远处器官之前侵入邻近组织的能力。因此，了解侵袭机制可能有助于发现新的可用药物靶点以防止转移。在本项目中，使用 CRISPR 敲除筛选体外研究了人类黑色素瘤细胞的侵袭性。为此，评估了三个汇集的 CRISPR 文库，然后选择其中一个进行筛选。在验证了所选表观遗传敲除文库的 gRNA 表示后，生成了一个慢病毒文库以转导 A375 黑色素瘤细胞。然后使用 Matrigel 侵袭室通过优化的侵袭试验检查突变黑色素瘤细胞的侵袭性。将转导的黑色素瘤细胞接种到上室中，并使其通过 Matrigel 迁移到具有更高化学引诱剂浓度的下室。随后分别收集上室和下室细胞，分离基因组DNA，通过PCR扩增制备测序文库，并用Illumina新一代测序技术进行测序。本报告不包含CRISPR筛选的测序数据。
STEMDIFF™TRILINEAGE分化套件
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Clelland 实验室协议 | iPSC 培养，第 1 页，共 5 页 iPSC 细胞...
培养基中，当细胞仍处于对数生长期时，将其转移到培养基中。一旦细胞接近 100% 汇合，它们就会进入平台期（静止期），其中只有不到 10% 的细胞在活跃分裂，并且细胞更容易受到压力的影响。这种低分裂率使得细胞系难以维持，并且增加了细胞系中随着时间的推移积累不想要的突变的可能性。2. 用基质胶溶液包被六孔板，并在 37°C 下孵育至少 30 分钟。
温和细胞解离试剂
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微流体器官培养物源自胰腺癌活检，用于化学疗法和免疫疗法的个性化测试
患者衍生的癌症类器官（PDOS）具有个性化治疗选择和改善患者预后的巨大希望。但是，在标准文化平台中生成足够数字的PDO来测试疗法是一项挑战。这一挑战对于胰腺导管腺癌（PDAC）特别急切，在该胰腺导管腺癌（PDAC）中，大多数患者在晚期患有不可切除的肿瘤的晚期诊断，并且患者组织的形式是针头活检。描述了使用有限量的PDAC活检可用的组织或PDO进行测试疗法的微流体设备的开发和表征。证明微流体PDO在表型和基因型上与金色标准的Matrigel类器官相似，其优点为1）球体均匀性，2）最小的细胞数需求，3）不依靠Matrigel。通过测试对几种化学疗法的PDO响应，包括糖原合酶激酶（GSKI）的抑制剂，可以证明微流体PDOS的效用。此外，微氟机培养物用于测试由NK细胞组成的免疫疗法的有效性与新型生物学结合。总而言之，我们的微流体装置对基于癌症活检的个性化肿瘤学有很大的好处，并且将来可能会发展成为化学疗法或免疫疗法治疗的伴侣诊断。