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肿瘤免疫微环境的表征（...
•样本收集：根据赫尔辛基宣布和机构审查委员会（IRB）批准，收集新鲜的组织样本。•器官推导条件：基于器官的血清培养培养基，低O 2孵育，超低附着板（ULA）和Matrigel底物，具体取决于肿瘤类型。•功能性药物筛查：在384个井板中播种器官，在37 o C下孵育6天•6天•读数：通过ATP（细胞滴度发光）的生存能力•分析（Sengine App）：使用15至1的新颖分数（SPM）对响应的内部分析进行了分析，并在响应中进行了分析，并分析了绝对分析和分析的响应和分析。pDTO被归类为敏感与抗性，对响应进行了排名：异常/良好/中等/低。
从人多能干细胞中产生3D富集腺体器官
眼表面（眼表面）由角膜和结膜组成，泪液层的存在对于眼表面的体内平衡性是造成的。泪液层主要通过泪腺的泪液和粘蛋白分泌来维持，但是当泪腺受到自身免疫性疾病（例如Sjögren's综合征）的损伤时，Ocular表面会变干，导致严重干眼。我们的研究小组以前已经成功地从人IPS细胞中产生了角膜和结膜，但是尚未报道lim腺的产生。指出角膜，结苏和泪腺具有相同的发育起源，因此我们应用了先前用于诱导角膜和结膜的二维眼器官（命名为Seam），并新试图诱使富集心腺。首先，我们发现泪腺样细胞簇出现在IPS细胞衍生的接缝中，并通过在Matrigel中进行3D培养物，成功地产生了3D泪腺类器官。
针对特异性STAT2抑制的黄病毒NS5的构象选择机制
实验在验尸后24小时内完成，这些健康细胞在单细胞转录组学实验中产生高质量的数据。这些血管细胞可以进行培养，转移和扩展，以进行许多体外测定，包括矩阵血管管形成，微流体腔室和代谢测量。在这些培养条件下，初级血管细胞至少三周保持细胞类型标记的表达。最后，我们描述了如何使用原代血管细胞将其移植到皮质器官中，该细胞捕获了产前人脑发育中神经血管相互作用的关键特征。就时间，组织加工和染色而言，大约需要3个小时，然后再花费3个小时的FACS。原发性FACS纯化的血管细胞中的移植程序需要额外2小时。不同的转录组和表观基因组协议所需的时间可能会根据特定应用而有所不同，我们提供了减轻批处理效果和优化数据质量的策略。总的来说，这种以Vasculo为中心的方法提供了一个综合平台来询问神经血管相互作用和人脑血管发育。
来自多能干细胞的人类Ra-gastruloid诱导
胃底子是早期人类发育的强大体外模型。然而，尽管由所有三个细菌层伸长并组成，但人类胃突不像形态学后的植入后人类胚胎。在这里，我们显示了视黄酸（RA）的早期脉冲，以及Matrigel，可牢固地诱导人类胃类型，具有后胚胎样形态结构，包括侧翼的神经管，分段的细胞体和各种细胞类型，包括神经crest，神经祖细胞，神经祖细胞，肾脏，肾脏，肌肉和肌肉和肌肉和肌肉和肌肉。通过基于单细胞RNA-seq（SCRNA-Seq）的计算机分期进行，我们发现人Ra-gastruloids比其他胚胎模型更先进，并且与E9.5小鼠和CS11 Cynomolgus Monkey Embryos相当。我们利用RA-GASTRULOIDS的化学和遗传扰动来确认Wnt和BMP信号传导在人类环境中调节了体积的形成和神经管长度，而转录因子TBX6和PAX3分别基于前甲基前中性胚乳和神经Crest。展望未来，ra-gastruloids是解码早期人类胚胎发生的强大，可扩展的模型。
使用人AML细胞研究
同种异体造血细胞移植（Allo-HCT）是高危急性急性髓样白血病（AML）患者的主要治疗方法，但复发率仍然很高，并且与较差的结果相关。因此，应采用新方法来最大程度地提高移植物 - 白血病（GVL）的作用，同时应采用缓解移植物抗宿主病（GVHD）的作用。由于在小鼠中对AML进行建模困难，因此优先研究免疫缺陷NSG小鼠中的患者异种移植（PDX）来研究GVL效应。在PDX中，AML通常是通过静脉注射细胞系或从患者获得的白血病爆炸来诱导的。GVHD和GVL效应由（CO）注射人T细胞或外周血单核细胞（PBMC）诱导。这种方法使全身性白血病诱导，尤其是在动物的脾脏和骨髓中发育，但它也可能与监测疾病的困难有关，尤其是通过流式细胞仪。这可以通过使用表达荧光素酶的AML细胞或将白血病细胞移植在Matrigel中以产生易于监测的实体瘤来规避。在这里，我们提供了有关如何制备人PBMC和白血病细胞，移植它们并监测NSG小鼠疾病的详细说明。
具有高质量的人IPSC控制线
来自SCTI003-A细胞系的代表性图像。（a）Stemcell的HIPSC可以与肠球形区分开，并使用STEMDIFF™肠类动物试剂盒（目录＃05140）嵌入Matrigel®Domes中，以使其成熟到人肠癌中。可以使用STEMDIFF™肠杆菌生长培养基（目录＃05145）来传递和扩展成熟的类器官（在第13天显示）。（b）使用STEMDIFF™背前桥式分化试剂盒（Catalog＃08620）（CatalDiff＃08620），可以与SCTI003-A区分开染色的DAPI（蓝色），MAP2（MAP2（MAGENTA），NEUN（黄色）和GFAP（CYAN）的神经器官，并与SCTI003-A区分开，并维持STEMDIFF™Neural Organid Organid Organid Organid Orancecodeandenceant（Catean）。（c）hipsc衍生的小胶质细胞具有可见过程和较小的细胞质与核比率，可以通过造血祖细胞中间人使用STEMDIFF™造血量™造血™造血™造血基因（使用Catalog＃05310），从而从Stemcell的HIPSC通过造血祖细胞中间产生（catalog＃05310），并使用Stemdiff™microgiriation（Catalog＃05310），并使用Stemdiff™MicrogliAD（catalog＃05310）（Catalog＃05310）。 ＃100-0019/100-0020）。（d）使用STEMDIFF™心室心肌细胞分化试剂盒（目录＃05010），可以从SCTI003-A产生心室心肌细胞的单层培养。
经济性politica 01 V01 N1-1981.indd
肾上腺素/阿哌丁素核酸内切酶1/氧化还原因子-1（APE1/REF-1）是作用于细胞信号通路的多功能蛋白，包括DNA修复和氧化还原活性。APE1/REF-1已成为癌症治疗的靶标，其在乳腺癌模型中的作用将揭示癌症治疗的新策略。APX2009是一种特定的APE1/REF-1氧化还原抑制剂，其抗癌特性尚未在乳腺癌细胞中描述。在这里，我们研究了APX2009治疗在乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中的影响。乳腺癌细胞系，并进行WST1和菌落形成测定以评估细胞增殖。进行膜联蛋白V-FITC/7-AAD和LDH-GLO T测定法以评估细胞死亡。APX2009治疗后，进行了伤口愈合测定法和Matrigel Transwell分析，分别评估了细胞迁移和侵袭过程。我们的发现表明APX2009治疗降低了乳腺癌细胞增殖，迁移和侵入性特性。此外，它诱导了两种细胞系的凋亡。我们的研究是第一个显示APX2009治疗对乳腺癌细胞凋亡的影响。因此，这项研究表明APX2009治疗是乳腺癌的有希望的抗癌分子。
从脑室内出血的早产儿的脑脊液中检索生发区域神经干细胞
图2从IVH患者的CSF中分离NSC样细胞。A分离后不同日期（DIV）的CSF衍生的NSC培养物的相位对比度显微照片。比例尺：100μm。 B，在Matrigel上生长的3种代表性NSC线的指数生长动力学。c，早期（0）和晚期（10）段的细胞的相对对比显微照片，在基质中生长。d，通过对早期（3）和晚期（7）通道的KI-67表达进行定量评估增殖。显示了代表性共焦部分。比例尺25μm。 E，早期（3）和晚（7）通道的CD133，CD24，CD34和CD45的流式细胞仪分析。条件之间没有显着差异。数据显示为5-7个独立生物样品的平均值±SEM。42周大的病例（粉红色符号）被排除在进一步分析之外。f，在早期和晚期与CD133共表达与CD24和CD34的共表达。g，从CSF获得的NSC样细胞和分离后13天后从CSF获得的代表性显微照片。比例尺：100μm。 H，通过从CSF获得的NSC样细胞流式细胞术和通过CSF和通道3的灌洗液进行的CD133分析。* p <.05
亲本和子代获得 1q 染色体重复
图 1 hiPSC-NSC 的生成和核型分析。A、在 Matrigel 上生长的 R-iPSC4-hiPSC 菌落。B、用胶原酶 IV 消化 hiPSC 后形成的胚状体 (EB)。C、用 TGF β 抑制剂 SB421543 和 BMP 抑制剂 dorsomorphin 处理的 EB 接种到聚-l-鸟氨酸和层粘连蛋白包被的板上后 7-10 天出现玫瑰花结状结构。D、通过解离玫瑰花结状结构并接种到聚-l-鸟氨酸和层粘连蛋白包被的板上获得神经外胚层细胞。E、F、这些细胞表达 NSC 标记物 Nestin (E) 并在分化第 30 天分化为表达微管相关蛋白 2 (MAP2) 的神经元 (F)。细胞核用 Hoechst 33342 (蓝色) 染色。比例尺：100 µ m。G、H、基于全基因组 SNP 阵列的 hiPSC-NSC 核型分析。针对位于该区域的阵列上所有 SNP，绘制了每条染色体的 B 等位基因频率（上图）和 log 2 R 比率（下图）。每个点都是一个 SNP。虽然第 10 代（p10）的细胞没有显示任何主要核型异常（G），但 p16 的 hiPSC-NSC 表现出 1 号染色体整个长臂的重复，dup(1)q（H）