液相色谱 - 冰冻/融化,涡流和离心(10 000 g,5分钟,4°C)之前,然后使用Zeba Spin Desalting柱,7K MWCO,7K MWCO,0.5 mL(Thermo Fisher Scientific,Waltham,Ma)将上清液中的任何残留缓冲液与水交换。样品在分析之前将样品转移到新容器中,并在2 80°C下存储。完整的环球蛋白块通过使用水的生育BEH300 C4反相柱(2.1 3 100 mm,300°孔,1.7 m m;零件号;零件号186004496)在Agilent 1290 Infinity II超高性液相色谱仪上,与Agilent 6530精确的质量电喷雾电离四极杆飞行时间质量表格仪耦合。光谱被解卷积以计算球蛋白的修饰百分比。
我们已经为包括MetaP2在内的几个肿瘤蛋白靶标生成了广泛的概念数据证明。现在,我们正在计算鉴定和优化涉及癌症疾病状态的其他重要蛋白质的破坏性肽。肽制剂被外包,随后的体外功效研究既有内部和外包。临床前研究确定动物模型中的疗效和毒理学,将在铅破坏性肽上进行,并认为为随后的首次试验生成全面的数据包。
#相等的贡献 *相应的作者跑步:抽象的清晰细胞肾细胞癌(CCRCC)是一种侵略性的肾癌亚型,通常与预后不良有关。大多数CCRCC病例在早期阶段是无症状的,并且主要是在晚期阶段。此外,CCRCC的异质性提出了设计新疗法的挑战。在这项研究中,使用接近性扩展测定法(PEA),我们分析了来自134例CCRCC患者以及111岁和性别匹配的健康捐助者的血液样本。我们确定了与临床病理学参数和患者生存有关的七个蛋白质(Anxa1,ESM1,FGFBP1,MDK,METAP2,SDC1和TFPI2)。这些生物标志物可以将CCRCC患者与具有高诊断敏感性和特异性的对照组区分开。此外,通过研究来自同一CCRCC患者的实体瘤的蛋白质表达,我们揭示了TGF-β和VHL-HIF信号通路中面板生物标志物与蛋白质之间的关联。我们发现,大多数促进生物标志物的肿瘤与TGF-β信号传导和HIF-2α呈正相关,并且与PVHL和HIF-1α负相关。我们还发现,大多数抑制生物标志物与PVHL和HIF-1α呈正相关,并且与TGF-β信号传导和HIF-2α呈负相关。对于CCRCC患者,与预后不良相关的血液蛋白生物标志物和TGF-β /HIF-2α信号传导(如本研究中所确定)是个性化医学中潜在的重要资产。
