,然后在1:2串行稀释。•按照制造商的说明,用O-苯基二胺二氯化物底物(Thermo Fisher Scientific)检测到抗体结合。•在Spectramax微板读取器上以490 nm读取板。免疫组织化学•在新鲜冻干AD AD脑组织(Banner Sun Health Research Institute)的低温恒温器切片中评估了免疫小鼠与Aβ和TAU病理学的结合,并用1:300稀释的免疫血清染色。•根据制造商的指示,用生物素化的物种特异性二抗(DAKO)和ABC检测试剂盒(载体实验室)检测到免疫血清的结合。•在免疫的APP/PS1小鼠的脑组织中检测到Aβ皮质斑块密度,并使用Halo Image Analysis软件(Indica Labs)进行定量。
Agilent Novocyte Quanteon 4025 流式细胞仪 Azure biosystems c600 凝胶成像仪 ThermoFisher QuantStudio3 qPCR 系统 2x ThermoFisher SimpliAmp PCR 系统 Molecular Devices Spectramax Plus 384 UV-Vis 微孔板读数仪 多台离心机 Denovix Nanodrop 和细胞计数器 哺乳动物细胞培养室,配备 3 个 Heracell 160i CO 2 培养箱和 1 个三气 CO 2 /N 2 Tuttnauer 3870 ELV 高压灭菌器 4x -80c 超低温冰柜,配备 24 x 7 监控和发电机备用 各种冰箱、-20 冰柜和 4c 熟食箱 借出的个人实验室设备(天平、加热板、玻璃器皿、pH 计、电泳设备、涡旋器、移液器等) 配备蔡司 Axiocam 202 单色相机的 Olympus IX70 荧光显微镜
该研究于 2022-2023 年在肯尼亚西部的基苏木县开展。从大片城乡连续区采集的田间冈比亚按蚊 (sl) 幼虫使用世界卫生组织 (WHO) 敏感性测试进行表型分析,分为对六种不同杀虫剂具有抗性或敏感。使用聚合酶链式反应 (PCR) 技术鉴定冈比亚按蚊复合体的种类,并筛选电压门控钠通道 (Vgsc-1014F、Vgsc-1014S、Vgsc-1575Y) 突变和乙酰胆碱酯酶 (Ace1) 靶位突变 119S。使用微孔板测定法评估了未接触杀虫剂的蚊子的代谢酶活性(非特异性 β 酯酶和单加氧酶)。此外,在幼虫采样期间,还进行了回顾性问卷调查,以确定当地居民的杀虫剂使用情况。
项目 位置 Olympus 荧光显微镜 201B Biorad Biologic 紫外可见光检测器/馏分收集器 301D Biotek elx 800 微孔板读数仪 301D Thermo Sorvall legend X1R 冷冻离心机 301E Perkin elmer microbeta 2450 微孔板计数器 301D Thermos evolution 220 紫外可见光分光光度计 301D Sonics vibracell 301E 精密微处理器控制 280 水浴 (2) 301 & 301E ThermoSci Max Q6000 培养箱/振荡器 (2) 301 Isotemp 228 水浴 301 ThermoSci Heratherm 烤箱 301 Zeiss invertoskop 40c 显微镜 301 Beckman coulter optima L80k 超速离心机 301 Panasonic 高压灭菌器201、217、301、317 Eppendorf 5417R 离心机 301 Beckman 库尔特 Avanti J25 高速离心机(2) 301 & 217 Barnstead 实验室系列 MaxQ7000 水浴(2) 201 & 301 Beckman OptimaMax 台式超速离心机 301 组织培养生物安全柜 201C&D、301& 301H、317G Heracell 150 培养箱 201C&D、301& 301H、317G 缺氧室 CoyLab(Prentice 博士负责) 201D GE Nanovue 分光光度计 201G 3D 打印机 201H Eppendorf 真空泵 & Heto 冷阱 201 Beckman 库尔特 allegra离心机 317 Inotech 细胞采集器 301D New brunswick C76 水浴振荡器 217 New Brunswick Series 25 落地式振荡器(陆博士负责) 317 Thermo Stericycle 培养箱(2 台) 317G Beckman coulter optima L90k 超速离心机 217 Olympus BX41 显微镜 217F Eppendorf Centra CL5 离心机 217 Eppendorf mastercycler 热循环仪 217 Ultrospec 500 pro 分光光度计 217E BMG Labtech Polarstar omega 217D BioRad gene pulser x cell 317E Spectramax m5 217F Thermo Legend 21R Microfuge 301E Sorvall ST16 离心机 301H
摘要:在这项研究中,针对AydınProvince在露天市场摊位上出售的各种食品形成生物膜的细菌的隔离和鉴定是针对的。细菌,并在37°C的胰蛋白酶大豆琼脂培养基中孵育24-48小时。进行了分离的细菌的DNA分离,并将获得的PCR产物用于测序。刚果红琼脂方法用于定性分析生物膜形成。根据这种方法,将形成黑色菌落的细菌评估为生物膜阳性,并使用微板法进行定量分析。从采样食品中分离出67种细菌,其中7种是强的,其中2种是中等生物膜生产者,表明应更重要的是食物卫生。
在微孔板方案中,每孔添加 10µL 样品(测试或标准)和 300µL 检测试剂。由于每孔添加 10µL 标准样品,因此孔中有 0.010mL × 1000µg/mL = 10µg 蛋白质。如果检测结果显示测试样品的最终吸光度与标准样品相同,则结论是测试样品含有与标准样品相同量的蛋白质。由于每孔有 10µg 标准,因此可以将测定的测试样品浓度报告为“10µg/孔”。但是,每孔的蛋白质量几乎肯定不是感兴趣的值;相反,人们通常想知道原始测试样品的蛋白质浓度。因为原始标准是 1000µg/mL,所以在测定中产生相同吸光度的测试样品也必须是 1000µg/mL。
具有从荧光到发光的宽灵敏度范围的高灵敏度/高速相机。作为荧光/发光板成像仪,可高通量地执行各种测定。由于微孔板的所有孔都是同时读取的,因此在添加底物后,荧光指示剂或孔间测量没有时间滞后。要测量快速荧光动力学,可以使用高速数据捕获功能(可选)以最多 5 毫秒的间隔捕获数据。当需要在短时间内采样时,例如使用高速电压敏感荧光染料和评估 iPS 细胞衍生的心肌细胞时,它是有效的。对于荧光和发光的测量,通过 FRET 和 BRET 等能量转移进行双波长测量是离子通道和蛋白质动力学分析的有效方法。通过安装在传感器前面的荧光滤光片转换器,可以高通量地进行双波长测量。
• 8 联管(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0264)或其他无核酸酶、PCR 级联管(固定在 PCR 架中)或 96 孔板(已验证可与您的 FACS 仪器配合使用) • 微孔板膜(USA Scientific,目录号 2920-0010),用于在分选前密封管/板 • 铝制单片箔密封(USA Scientific,目录号 2938-4100)或盖条(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0784/AB0850),用于在分选后密封管/板 • 用于 96 孔板或联管的低速台式离心机 • 适合容器中的干冰,用于快速冷冻细胞 • (可选)BD FACS 预分选缓冲液(BD Biosciences,目录号 563503) • (可选)SMART-Seq HT Kit 裂解组分(Takara Bio,目录号 634439)或 10X 裂解缓冲液(Takara Bio,目录号 635013)用于对额外的板进行分类
• 8 联管(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0264)或其他无核酸酶、PCR 级联管(固定在 PCR 架中)或 96 孔板(已验证可与您的 FACS 仪器配合使用) • 微孔板膜(USA Scientific,目录号 2920-0010),用于在分选前密封管/板 • 铝制单片箔密封(USA Scientific,目录号 2938-4100)或盖条(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0784/AB0850),用于在分选后密封管/板 • 用于 96 孔板或联管的低速台式离心机 • 适合容器中的干冰,用于快速冷冻细胞 • (可选)BD FACS 预分选缓冲液(BD Biosciences,目录号 563503) • (可选)SMART-Seq HT Kit 裂解组分(货号 634439)或 10X 裂解缓冲液(Takara Bio,货号 635013)用于对额外的板进行分类
Ellman的偶联酶测定法用于确定微藻粗提取物的抗缓病活性(15)。磷酸盐缓冲液(50 mM,pH 7.4)用于制备Ellman试剂5,5'-二硫代抗体(2-硝基苯甲酸)(DTNB; Sigma),乙酰硫代氨基胆碱碘化物溶液。在96孔微晶板中添加孔中添加65 µL磷酸盐缓冲液,然后再添加5 µL ACHE。制备样品的重复;然后添加5 µL和10 µL不同的藻类原油提取物,导致反应发作。将混合物在37°C孵育10分钟。孵化后,加入20 µL DTNB(0.38 mm)和5 µL乙酰硫胆碱碘化物(0.50 mm)的混合物,并保留在37°C下孵育10分钟。在所有井中,加入100 µL髓线(0.1 mm)。Bio-Rad®680微板读取器以412 nm波长监测反应。对每个样品的抑制作用如下:抑制(%)= 100 - (t/c)×100