用途:EpiQuik™ 8-OHdG DNA 损伤定量直接试剂盒(比色法)适用于直接使用从任何物种(例如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒)中分离的 DNA 检测氧化 DNA 损伤(8-OHdG)状态,这些 DNA 以多种形式存在,包括但不限于培养细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织和体液样本。输入 DNA:每次检测的 DNA 量可以为 100 ng 至 300 ng。为了获得最佳定量,输入 DNA 量应为 300 ng,因为基础 8-OHdG 通常少于总 DNA 的 0.01%。起始材料:起始材料可以包括各种组织或细胞样本,例如来自烧瓶或微孔板培养细胞的细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织、血液、体液样本等。内部控制:该试剂盒提供阴性和阳性 DNA 对照。可以绘制标准曲线(范围:5 至 200 pg 的 8-OHdG)或使用单一数量的 8-OHdG 作为阳性对照。因为 8-OHdG 含量在不同组织、正常和患病状态以及治疗和未治疗条件下会有所不同,所以建议运行重复样本以确保产生的信号得到验证。该试剂盒将允许用户量化 8-OHdG 的绝对量并确定两个不同 DNA 样本的相对 8-OHdG 状态。注意事项:为避免交叉污染,请小心地将样品或溶液移液到试纸条孔中。使用防气溶胶移液器吸头,并在每次液体转移之间更换吸头。在整个过程中都要戴手套。如果手套和样品接触,请立即更换手套。
图 1:PDE4C1 检测试剂盒原理图解。该检测使用荧光素标记的环状鸟苷酸(PDE4C1 为 cAMP-FAM),其中磷酸基团与环状核苷酸结合。这是一种旋转速度快(低 FP)的非常小的分子。PDE4C1 催化环状核苷酸中磷酸二酯键的水解并释放磷酸基团。在第二步中,游离磷酸基团被特定的磷酸结合纳米珠(结合剂)识别,从而形成大型复合物,运动受限(高 FP)。FP 与 PDE4C1 活性成正比。该检测需要荧光微孔板读数仪,该读数仪能够测量荧光偏振 (FP),并配备读取 FP 信号所需的部件。有关 FP 技术的更多信息,请访问我们的技术说明:FP、检测原理和应用。注意:截至 2025 年 1 月,此协议已重新优化性能。可根据要求提供此试剂盒的早期版本。背景磷酸二酯酶 (PDE) 通过水解第二信使 cAMP (环磷酸腺苷) 和 cGMP (环磷酸鸟苷) 信号,在动态调节这些信号传导中起重要作用。PDE 超家族由 11 个家族组成,其中 PDE4、7 和 8 是 cAMP 特异性水解酶,因此可调节对其的正向和负向反应。PDE4 是心血管组织中第二丰富的 PDE。PDE4 是一种 cAMP 特异性 PDE,也是最大的 PDE 亚家族,具有超过 35 种不同的同工型,因此也是特征最广泛的 PDE 同工酶。它是大多数炎症细胞和气道平滑肌中的主要同工酶,与炎症性气道疾病有关。PDE4 抑制剂罗氟司特已被批准用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD)。
Martin Helbo Behrens,首席执行官:增长在2024/25的第二季度持续,今年上半年的收入为2.515亿dkk,同比增长26%。增长。同时,我们在上半场保持了商业重点,以期为现有客户产生更高的附加销售。在发展阶段的晚期阶段,相对于2023/24财政年度后期,在开发后期的项目的资本通常保持不变,而初创企业却难以筹集资金。根据计划进行了新的Xcytomatic产品的逐步推出,对该平台的兴趣正在增加。Chemometec目前与客户参与项目,以开发细胞和基因疗法中未来的自动化产品解决方案。在2024/25上半年的Xcytomatic Instruments销量增加之后,预计下半年增长会放缓。这是由于一般延长的验证流程所致,因为客户购买Xcytomatic工具的决定通常是自动化解决方案的主要投资的一部分。我们希望在下半年在更广泛的客户中启动更多验证。在上半年启动了Xcytomation 50的开发,该50可以处理所谓的微板格式。与我们的连续产品开发有关,Chemometec已确定了一个市场机会,可以进一步开发Xcytomation产品平台,从而为客户提供了一种名为Xcytomation 50的新仪器,该工具允许改进流程的集成和自动化。该项目与Chemometec的目标完全一致,即在细胞和基因疗法和生物处理中开发自动化溶液。
目标:我们假设为这项研究选择的一个或多个非抗生素候选者将证明针对金黄色葡萄球菌的抗生素活性。方法:我们确定了非抗生素药物(氨氯地平,硫酸,硫酸胺,ebselen和sertraline)针对甲级素链球菌的最低抑制浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)(MBC)(MBCS),用于使用微纯蓝酸盐蓝蓝色蓝色测量(MABA)(MABA)。我们的研究小组选择了从鼻和软组织感染患者的鼻和伤口拭子培养物中获得的临床分离株,这些植物在南德克萨斯州外科医学研究网络(STARNET)的初级保健诊所看到。结果:三种非抗生素药物的所有分离株均具有相同的麦氯地平:64μg/ml; Azelastine,200μg/ml;和舍曲林,20μg/ml。EBSELEN的MIC为0.25μg/mL(SA-29213,A1019和J1019),0.5μg/ml(A32和B60)和1μg/mL(B72)。氨氯地平,硫二胺和舍曲林的MBC在其麦克风稀释范围内,表明所有测试分离株的杀菌活性。ebselen MBC是高度高的稀释液,也表明所有测试分离株的杀菌活性。结论:总之,所有四种非抗生素均在体外活性在不同程度上针对金黄色葡萄球菌临床分离株。ebselen是所测试的四种非抗生素中最有效的。©2021作者。由Elsevier Ltd代表国际抗菌化疗学会出版。这是CC BY-NC-ND许可(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)下的开放访问文章
抽象的酪氨酸酶酶是一种酶,负责在皮肤色素颜色的形成中发生黑色素生物合成和色素沉着的原因。玫瑰花(Rosa damascena磨坊)和山药块茎(Pachyrhizus orosus)含有具有酪氨酸酶抑制剂活性的化合物。这项研究的目的是找出玫瑰提取物,山药块茎的酪氨酸酶抑制剂活性的程度,以及比率为1:1、1:1:1:1:1:2:2:2:2:2:2:2:1、1:3和3:3和3:1。该方法是通过用乙醇和用石油乙醇和甲醇的sokletation方法提取玫瑰浸渍的玫瑰浸渍,然后用乙酸乙酯液液体衍射的。从提取结果中获得的玫瑰提取物和12.5%的山药块茎获得了15.17%。植物化学筛选的结果表明,玫瑰乙醇提取物中含有生物碱,类黄酮,奎因和苯酚,而山药块茎的含量含有生物碱,类黄酮,皂苷,苯酚和类固醇。使用L-二元蛋白底物和Kojak酸的阳性对照对酪氨酸酶抑制剂进行测试活性,并使用盐酸测量使用微孔板读取器,其波长为492 nm。在酪氨酸酶抑制剂活性的研究结果表明,玫瑰提取物的IC50值为262.882 ppm,而IC50值为43.148 ppm的IC50值为262.882 ppm。关键字:抑制剂,酪氨酸酶酶,玫瑰提取物,山药分数研究结果导致酪氨酸酶酶的组合玫瑰花提取物与班孔灯泡派系的组合抑制剂,比为1:1; 1:2; 2:1; 1:3和3:1的IC50值的顺序为26.598 ppm; 23,348 ppm; 29,880 ppm; 20,305 ppm和34,742 ppm。
基因治疗是一种治疗技术,可修饰一个人的基因治疗或治愈疾病。这种修饰可以通过用健康的基因副本代替引起疾病的基因,使疾病的基因失活或将新基因引入体内以帮助治疗疾病。有多种基因疗法治疗,但是一种常见的技术是使用病毒载体,例如腺相关病毒(AAV),将治疗基因传递到人类细胞中进行复制。[2] AAV具有许多有利的特征,包括缺乏致病性,复制无能力,感染非分散细胞的能力以及在特定部位中整合到宿主细胞基因组中的能力。[3]这些有前途的特征导致了它们的进步,早期研究重点是单个AAV变体(血清型)AAV2。从那时起,与AAV2相比,已经发现了新的AAV血清型在某些细胞或组织中提供较高的转导效率。这些独特的细胞偏向主义已导致大量AAV血清型的发展来包装不同的治疗基因来治疗特定疾病。[4]不同的AAV血清型不仅具有不同的细胞向量,而且由于其不同的氨基酸序列和衣壳结构,它们的结构特性和稳定性也有所不同。这些差异使每种AAV血清型都具有独特的熔化温度。[4,5]为了开发有效的AAV疗法,在开发过程中表征AAV的关键属性至关重要。SUPR-DSF在热坡道期间测量了每种血清型的固有荧光,以产生熔体曲线。一个关键属性是AAV CAPSID的热稳定性,可用于血清型识别,优化衣壳配方以及在任何过程更改中进行比较。[6]可以通过在热坡道期间从AAV中的色氨酸残基中监测固有荧光的变化,可以通过差异扫描荧光法(DSF)测量衣壳稳定性。在此应用程序注释中,我们使用SUPR-DSF来测量三种AAV血清型的热稳定性:AAV2,AAV5和AAV6。此外,我们在AAV2和AAV6上进行了浓度稀释系列,以确定最小样品要求。所有样品均以10µl的井体积为10µl,在单个384孔微孔板上一式三份,强调该仪器的高通量可能性。
描述:重组A.酸性AAPCAS12B(V型CRISPR相关蛋白CAS12B),无标签。AAPCAS12B属于V型CRISPR效应器CRISPR-CAS12B/C2C1,对于广泛的应用,高温。物种:酸性酸性酸性构建体:CAS12B(全长)(酸性)浓度:0.20 mg/ml表达系统:大肠杆菌纯度:80%格式:水缓冲液溶液。以:50 mm磷酸钠,pH 7.5、300 mm NaCl,1 mM DTT和10%甘油MW:128 kDa GenBank登录:WP_067623834稳定性:至少在-80°C时至少6个月。存储:-80°C使用的说明:在冰上解冻,并在使用前轻轻混合。不要涡旋。在打开前进行快速旋转。等分的小容量,然后闪烁冻结以进行长期存储。避免多个冻结/解冻周期。测定条件:使用基于CRISPR的荧光记者测定法测量了不同量的AAPCAS12B活性,以获得最佳结果。使用RNA引导的DNA与CAS12结合,将靶DNA切割和不加选择的单链DNA侧支裂解激活。荧光信号的发射是由于裂解后ssDNA记者的降解所致。Active Cas12 was thawed on ice while 1X Endonuclease Buffer containing 10 mM Tris- HCl, pH 8.0, 50 mM NaCl, 10 mM MgCl 2 , and 0.1 mg/ml BSA, guide RNA (custom designed crRNA), ds DNA activator (complementary sequence to crRNA and a PAM sequence specific for Cas enzyme) and FQ-ssDNA substrate (用荧光团和淬火器标记)平衡为室温。然后将板密封并在37°C下孵育10-30分钟。使用1X内核酸酶缓冲液制备了活性CAS12(4倍最终浓度)指南RNA(4倍最终浓度)和含有DS DNA激活剂和SSDNA报告基因(2倍最终浓度)的激活器/报告剂混合物(2倍最终浓度)。10 µL的4倍活性CAS12和10 µL的4倍引导RNA在室温下在固体黑色96井板的一半面积中预孵育10分钟。预孵育后,将20 µL的2倍激活剂/报告基因混合物添加到板上,并将其放置在振动孵化器上1分钟。然后将板平衡至室温,去除板密封剂,并在毫用读取器上读取荧光。阴性对照是通过用相等量的测定缓冲液代替酶工作溶液来测量的。应用程序: