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World File Search SystemNADH
通过DNA条形码Beivy J. Kolondam
摘要。DNA条形码已用于识别鱼类，尤其是用于认证渔业产品。在加工金枪鱼产品的身份验证过程中，DNA条形码的准确性和该过程所需的少量组织样品需要进行DNA条形码。作为标准基因标记，COI基因在区分几种鱼类中存在缺点。这项研究旨在检查DNA条形码测定金枪鱼物种的线粒体NADH脱氢酶2（ND2）基因标记物的能力。在13种金枪鱼组（蓝鳍金枪鱼，黄鳍金枪鱼和其他金枪鱼组）中，ND2基因的1,042 bp基因内的变异表现出比标记基因更好的性能（COI基因，CyB基因和16S rRNA基因），用于DNA条形码。有296个观察到的种间变异点，其中49点能够区分Thunnus属的成员和其他金枪鱼属。没有所有比较物种的相同序列。最终结果提供了通过DNA条形码和实际方法发展ND2基因物种鉴定金枪鱼的前景（例如pcr-rflp）用于金枪鱼产品的身份验证。关键词：蓝鳍金枪鱼，DNA条形码，ND2基因，金枪鱼，黄鳍金枪鱼。简介。DNA条形码的使用在鱼类和渔业的身份验证中表现出重要作用（Rasmussen＆Morrissey 2008）。许多加工的鱼类产品都标有与所使用的鱼成分不匹配的标签（Xiong et al 2019）。通常，形态学特征用于识别多种金枪鱼，但这需要高技能的人力资源。如今，这种方法很难用于识别已经以菲力和鱼类罐头鱼类形式的产品（Bottero等，2007）。另一方面，消费者有权被告知购买的原始和加工金枪鱼所购买的商品的身份，因此继续进行适当的识别方法很重要（Aranishi等人，2005年）。使用DNA条形码技术的前景为精确物种识别打开了机会，即使仅来自少数组织标本（Dudu等，2016年）。专门针对金枪鱼，仍然使用了来自线粒体DNA的几个基因的测序，因为它可以可靠地区分这些鱼类（Wulansari et al，2015）。
在 CLOSTRIDIUM .4.CETOBUTYLICUM - eScholarship@McGill
2.1 微生物................................... 17 2.2 培养基组成和实验程序. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19 2.3.4 气体分析. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 2.3.7 NADH 和 NADPH 的测定 . . . . 27
线粒体呼吸复合物I具有脱钩特性的新型抑制剂具有有效的抗肿瘤活性
癌细胞高度依赖生物能过程，以支持其生长和生存。代谢途径的破坏，特别是通过靶向线粒体电子传输链复合物（ETC-I至V）已成为一种有吸引力的治疗策略。因此，寻找具有最小不良反应的临床有效新呼吸链抑制剂是一个主要目标。在这里，我们表征了一种称为MS-L6的新型OXPHOS抑制剂化合物，该化合物的表现为ETC-I的抑制剂，结合了NADH氧化和解偶联效果的抑制作用。MS-L6在完整和亚整位颗粒上都是有效的，表明其效率不取决于其在线粒体内的积累。MS-L6降低了ATP的合成，并诱导代谢转移，随着葡萄糖消耗量增加和癌细胞系中的乳酸产生。MS-L6剂量依赖性地抑制细胞增殖或诱导各种癌细胞系中的细胞死亡，包括B细胞和T细胞淋巴瘤以及小儿肉瘤。酿酒酵母NADH脱氢酶（NDI-1）的异位表达部分恢复了用MS-L6处理的B淋巴瘤细胞的生存能力，表明NADH氧化的抑制在功能上与其细胞毒性效应有关。此外，MS-L6给药可诱导两个没有毒性的鼠内异种移植模型中淋巴瘤肿瘤生长的良好抑制作用。因此，我们的数据将MS-L6作为OXPHOS的抑制剂，具有双重作用机理，在呼吸链上具有双重作用机理，并且在临床前模型中具有有效的抗肿瘤特性，将其定位为可评估癌症治疗的有前途药物类的开创性成员。
在 CLOSTRIDIUM .4.CETOBUTYLICUM - eScholarship@McGill
2.1 微生物.................................... 17 2.2 培养基组成和实验程序。 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... 22 2.3.5.1 RN A 测定.................................................................................................................................................. 25 2.3.5.2 DN A 测定.................................................................................................................................. .. • ................................................................................................................. 25 2.3.6 蛋白质估算....................................................................................................................................... .................................................................................. 26 2.3.7 NADH 和 NADPH 测定 ...................................... 27
合同编号MRG5580048完整的研究报告 div>
电子邮件地址：thunyarat.pon@mahidol.ac.th项目期间：目前使用酶来生产化学品和活性成分。医学吸引了该行业的很多关注。但是，一些有用的酶（例如氧化剂组中的酶），必须使用NADPH，这是非常昂贵的NADPH，这是葡萄糖的化妆品，来自循环系统的Bacille中的细菌的氢氢化物。很高兴因为该物质便宜酶是稳定的。有反应。效率可以与NADH和NADPH和NADPH一起使用。从大罗的感染中氢根研究了Ami Lolic Wichian SB5（GDH-BA）。与Basilus枯草菌168（GDH-BS）的葡萄糖氢酶相比，即使两种类型的酶都非常接近GDH-BA搪瓷它对冥想更为重要（97 U/mg蛋白）。即使GDH-BA在50摄氏度下的冥想率最高，但GDH-BA的冥想率最高，但GDH-BA的冥想率最高，但GDH-BA比GDH-BA高于GDH-BS（26 U/mg蛋白），酸高比GDH-BB高6个。据说这项研究中报告的生产率（1,292 U/g孔细胞）与大肠杆菌的葡萄糖氢的产生相比非常高，而大肠杆菌已被切割为遗传。具有葡萄糖的表达用作大肠杆菌M20的牛的循环，其表达为P450 BM3 F87V。 coconutrition the Basilus ami lolic Vivatian div>
核苷酸和核酸
Important roles of other nucleotides: • Energy rich (high energies of hydrolysis, but kinetically stable) besides ATP, includes: GTP, CTP, UTP • Carrier molecule (key intermediates in metabolism) UDP-sugars, CDP-lipids, NADH, FAD • Secondary messengers (cAMP, cGMP) • Other cofactors for enzymes
使用细胞FAD自动荧光作为无标记的细胞属性，用于产生嵌合抗原受体-T细胞
嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞疗法已成为治疗血液恶性肿瘤的一种有吸引力的方法。但是，这种疗法的可访问性受到复杂制造工艺，有限的制造设施能力以及高技能劳动力的要求，以进行CAR-T细胞生产的手动步骤。为了最大程度地减少手动过程，CAR-T细胞制造场正在向封闭和自动化系统转移，包括分析工具，可提供对生产中细胞的间歇性监测的分析工具。因此，需要在封闭系统中密切监测CAR-T细胞的无标签技术。在这里，我们评估了配备了405nm紫罗兰色激光器的流式细胞仪的使用，用于研究T细胞中NADH和FAD自动荧光。我们的结果表明，NADH和FAD自动荧光的增加与T细胞激活标记，CD25的上调显着相关，并且在T细胞激活后的头三天，在消费培养基中的细胞外乳酸的增加。我们通过建立CAR-T细胞中FAD的平均荧光强度（MFI）的变化速率与使用G-Rex Biorx Biorextor的T细胞增殖速率之间的变化速率之间的关系来确定CAR-T细胞生产的终点的潜在用途。共同表明，自动荧光，尤其是FAD自动荧光，可以用作无标记的生物标志物（细胞属性），用于监测CAR-T细胞生产过程中T细胞激活和扩张。使用405nm可见光代替了遗传毒性紫外线波长来评估NADH和FAD自动荧光，为将自动荧光测量结果铺平了一种方式，以将自动荧光测量纳入封闭和自动化的系统中，以用于对CAR-T细胞制造的过程中的监测。
天然膜的冷冻EM揭示了分枝杆菌中克雷布斯周期与呼吸之间的紧密联系
其天然膜中内源性蛋白质复合物的抽象成像可以揭示在洗涤剂溶解后损失的蛋白质 - 蛋白质相互作用。为了研究分枝杆菌氧化磷酸化机制中的相互作用，我们准备了来自smegmatis分枝杆菌的倒膜囊泡，并富含通过亲和力色谱含有兴趣复合物的囊泡。电子冷冻显微镜（冷冻-EM）表明，来自克雷布斯循环的酶（MQO）（MQO）与电子传输链复合物III 2 IV 2 IV 2（CIII 2 CIX 2）superComplex物理相关。对MQO：CIII 2 CIV 2相互作用的分析表明，CIII 2 CIV 2对于苹果酸驱动的，但不是NADH驱动的电子传输链活动和氧气消耗所必需的。此外，MQO与CIII 2 CIV 2的关联使电子从苹果酸到CIII 2 CIV 2与毫秒动力学转移。一起，这些发现表明了Krebs循环与呼吸之间的联系，该呼吸将电子沿着分枝杆菌电子传输链的单个分支引导。引言生物能是通过包括糖酵解，三羧酸或克雷布斯循环以及脂肪酸氧化的代谢途径从营养物质中提取的。在大多数生物体中，克雷布斯循环提供减少的烟酰胺腺苷二核苷酸（NADH），并琥珀酸酯添加到膜结合的电子传输链（ETC）配合物，以驱动跨膜质子质子运动力（PMF）的产生。PMF反过来为二磷酸腺苷（ADP）和无机磷酸盐（P I）合成三磷酸腺苷（ATP）提供了能量。nadh被ETC的复合物I氧化，将泛氨基酮降低为泛醇。在克雷布斯循环中，琥珀酸酯氧化为富马酸盐是必不可少的反应，但通过ETC的复合物II发生，这也将泛氨基酮降低到泛醇。然后将来自泛醇的电子依次转移至复合物III，细胞色素C（Cyt。c），复合物IV，然后氧气将其减少到水中。复合物I，III和IV对夫妇电子在整个膜上转移至质子易位，维持了为ATP合成的PMF。分枝杆菌等与典型的哺乳动物线粒体等不同的方式（在（Liang and Rubinstein，2023）中进行了多种方式）。首先，分枝杆菌等依赖于甲酸苯丙胺（MQ），而不是泛氨基酮。此外，与规范的etc，分枝杆菌等不同。在大多数分枝杆菌中，例如病原体分枝杆菌结核病和快速生长的腐生肉芽菌分枝杆菌Smegmatis，NADH：MQ氧化还原酶活性均由复合物I和一种或多种非腐蚀性泵送II型NADH脱氢酶（NDH-2S）催化。两种不同的酶SDH1和SDH2催化琥珀酸酯：MQ氧化还原酶活性。此外，结核分枝杆菌和Smegmatis均具有苹果酸：奎因酮氧化还原酶（MQO），将氧化剂氧化为Oxalo乙酸盐，这是KREBS循环的关键步骤，而将MQ降低到MQH 2（Harold等，202222）。在结核分枝杆菌中，除了苹果酸脱氢酶（MDH）之外，还发现了该MQO，它将电子从苹果酸转移到NAD +，而在Smegmatis M. smegmatis MQO中是唯一的苹果酸氧化酶（Harold等，2022）。c。也许最引人注目的是，分枝杆菌中MQH 2的氧化是由复合物III和IV（CIII 2 CIV 2）的超复合物催化的，并具有结合的细胞色素CC亚基，代替了可溶性细胞。MQH 2的氧化和将氧气还原为水还可以通过细胞色素BD复合物（在规范等中未发现）来实现，每种电子转移的质子比CIII 2 Civ 2易解的质子较少（Safiarian等，2021年）。