图 1. CTS HiFi Cas9 蛋白 (CTS HF Cas9) 显著降低了原代 T 细胞中脱靶效应的发生率。将三种 Cas9 蛋白与三种 Invitrogen ™ TrueGuide ™ 合成 sgRNA 混合,形成九种复合物(RNP:50 pmol sgRNA、38 pmol Cas9、50 pmol dsTag,用于 Invitrogen ™ Neon ™ 转染系统中的 1.5 x 10⁶ T 细胞(100 µL)*)。使用 Neon 转染系统将每个 RNP 复合物递送到原代 T 细胞中。从 NGS TEG-seq 检测(点图)中获得每个 gRNA 的在靶和脱靶效应读数。每个脱靶/在靶比(蓝点)是根据单个脱靶的每百万读数 (RPM) 除以相应在靶的 RPM 计算得出的。红点代表相应的在靶,并标准化为 100%。 x 轴是任意的。CTS WT Cas9 是 CTS TrueCut Cas9 蛋白。
在各种生命科学应用中,通过转染细胞来改变其基因型或表型至关重要。有多种转染方法可供选择,而选择最佳方法通常取决于与特定应用的兼容性。电穿孔是一种物理转染策略,它使用电脉冲在细胞膜上创建临时孔,核酸或蛋白质可以通过这些孔进入细胞。它是一种高效而强大的工具,已被证明在基于基因编辑的有效载荷(如 CRISPR-Cas9 系统和 TALEN)方面具有出色的性能。赛默飞世尔提供研究级 Invitrogen™ Neon™ NxT 电穿孔系统(配备 10uL 或 100uL 试剂盒)和符合 GMP 标准的 CTS™ Xenon™ 电穿孔系统(配备 1mL SingleShot 或封闭式一次性 5-25 mL MultiShot 耗材)。这两种仪器都采用相同的核心技术。在这项研究中,我们已经证明这些平台具有高度灵活性,并且与具有不同有效载荷的多种哺乳动物细胞类型兼容。此外,我们还展示了两台仪器之间电穿孔条件的可扩展性。Neon NxT 系统上的基因编辑条件可以扩展到 Xenon 系统,后者是专为符合 GMP 的细胞疗法生产而设计的平台。
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cityofdenton.com › 查看 › Sign-R... PDF 1997 年 11 月 5 日 — 1997 年 11 月 5 日 丹顿发展准则,删除冲突的参考文献并...改变图像呈现的物理方法(例如数字或霓虹灯) ).
您属于这里的项目(2017-2018)4ft x 4ft Neon标志是艺术家Asten Holmes-Elliott与突破性青年的合作参与艺术努力的结果:Hampshire LGBTQI+ Support Charity,由John Hansard Gallery和Tate Artist Rooms支持。ASTEN与突破青年的参与者合作,探索身份,社区和归属的主题,特别着眼于年轻的LGBTQI+人的未来,鼓励参与者创建一个物理对象来代表他们的发现。第一阶段导致了“您属于这里”的徽章,该徽章鼓励人们向LGBTQI+社区保证盟友。继续开发导致“您属于这里”的霓虹灯标志,该标志现在位于约翰·汉萨德(John Hansard)画廊的门厅中。该标志是一个信标,提醒我们,那些发现自己处于边缘的人也属于这里,我们所有人有责任腾出空间并确保我们所有人都受到欢迎。
使您能够编辑基因组中的任何位置图 1. 使用 TALXcell 平台敲除 T 细胞受体 (TCR)。使用 Invitrogen ™ Neon ™ 转染系统通过电穿孔将 TALXcell mRNA 递送至原代人类 T 细胞。使用藻红蛋白 (PE) 偶联的 TCR 抗体通过流式细胞术测量 TCR 敲除效率。TALXcell 平台实现了 94.9% 的 TCR 敲除效率,这与在类似实验中使用 CRISPR-Cas9 观察到的效率相似。