商业液体LB培养基被用作培养基。7培养溶液是通过在37°C摇动并孵育4、8、16、24、32、52和56小时的培养溶液。将培养物以3200 g离心5分钟,然后将上清液倒入并用蒸馏水重悬于。将悬浮液以3200 g离心5分钟,然后将上清液倒入并用蒸馏水重悬于。用分光光度计测量悬浮液的OD600值,以计算细菌的数量。(OD600 = 1的1×108 CFU/ml计算。)然后将悬浮液用α-Cyano-4羟基苯甲酸(CHCA)溶液稀释,以便将生物的数量应用于MALDI-8030的样品板(图1)是10 5。1μl每种稀释的溶液在样品板上发现,干燥并通过MALDI -8030进行分析。分析条件如表1所示。细菌计算计算后的预处理和分析时间约为1小时。
方法:在拉合尔旁遮普大学的道德批准(ERC144/23)之后,从垃圾填埋场和水生环境中分离出塑料降解的微生物菌株。这些分离株是在受控实验室中培养的,使用补充PE和PET作为唯一碳源的最小盐培养基。在四个星期内进行了实验,塑料样品在25°C,35°C和45°C下在5、7和9。氧气可用性受到控制,以产生有氧和厌氧条件。通过减肥测量,通过扫描电子显微镜进行表面形态分析以及通过光密度(OD600)测量来评估塑性降解效率。使用单向方差分析和t检验进行统计分析,p值<0.05被认为是显着的。
系统和JAVA Codon Adaptation Tool 进行密码子适配。优化后的序列由上海生工生物工程有限公司通过 BamH1 和 XhoI 酶切位点合成并克隆到来自 pGEX-6p-1 质粒(美国 Novagen)的表达载体中。将重组质粒 pGEX-6p-1-Mpro 转化的 E. coli BL21(DE3)细胞(美国 Invitrogen)在 2 L Luria-Bertani 培养基中于 37 ℃ 下生长至 OD600 达到 0.6 后,加入 0.2 mM IPTG,16 ℃ 诱导重组蛋白表达过夜。将菌体悬浮在 PBS 中,超声波破碎。离心收集上清液并与谷胱甘肽 Sepharose 4B 琼脂糖(美国 GE Healthcare)混合,4 ℃ 下孵育 3 h。然后用 PBS 清洗珠子,并加入 preScission 蛋白酶 (GE) 以切割 GST 标签。含有
与感染相关的疾病每年导致超过1000万人死亡,其中很大一部分与细菌病原体有关。细菌病原体中的抗菌抗性(AMR)限制了当前治疗的有效性。AMR的主要贡献者是过度使用抗菌消毒剂,该抗菌消毒剂在COVID-19大流行期间得到了增强。当过度使用或处置不当时,这些代理可以进入环境,特别是供水系统。在这项研究中,我们进行了每月的水监测,以确定史长河中存在的细菌水平和物种,以及使用氯,过氧化物,Quaternary铵化合物(QAC)和peracetic酸试验条的抗菌剂水平。此后,我们在这些抗菌剂存在下以OD600分光光度计为以各种浓度的情况下测试了河流中选定的革兰氏阴性细菌的生长动力学。已经对2023年9月从史典河分离的鲍曼尼杆菌进行了初步测试。baumannii以151.52 mg/l漂白剂(氯),39.59 mg/l过氧化氢,2.20 mg/l氯化三甲基铵(QAC)(QAC)(QAC)和32.91 mg/l乙酸在任何测试的Alkylym inkyllyment(QAC)中生长(QAC),。浓度。 基于这些结果,我们计划使用从河流中分离出来的河流,期间,期间和之后的河流进行进一步测试。。浓度。基于这些结果,我们计划使用从河流中分离出来的河流,期间,期间和之后的河流进行进一步测试。如果在化学消毒剂的有效性和相对于Covid-19大流行中收集的化学消毒剂的有效性之间存在相关性,这将证明对AMR的持续研究以及重新评估使用常见化学消毒剂的使用是合理的。
