使用QIIME2进行16S菌群分析(Qiime 2 Development Team(2017))处理从测序得出的数据。使用Qiime 2版本2020.8.0分析了已经具有条形码和衔接器的反复列出的配对端序列。用于质量过滤和特征(OTU)预测,我们使用了DADA2(Callahan等人(2016))。回顾了序列质量数据后,我们从正向的5'末端和反向读取的0 nts缩小了0个核苷酸(NTS)。正向读数被截断为270 NT,并反向读取为200 nts。使用MAFFT对齐代表序列(Katoh和Standley(2013))。使用FastTree 2(Price,Dehal和Arkin(2010))制成对齐序列的系统发育树。otus/特征是使用预先训练的幼稚贝叶斯分类学分类器分类分类的。使用SILVA 128 97%OTU对分类器进行了训练(Quast等(2013))。产生了分类计数和百分比(相对频率)的表。多样性分析是在由此产生的OTU/特征表上进行的。BIOM表,以提供α和β多样性的系统发育和非细胞发育指标(Lozupone等人。(2011))。使用R进行其他数据分析(PLS-DA)和统计。可视化文件(.QZV)可以通过http://view.qiime2.org查看。以这种方式浏览的最相关文件是特征表(Table.QZV(分类单元的SEQ计数数据)和相对_FREQ_TABLE.QZV(分类单元的%丰度))和Taxa bar Prot(tublea bar-bar-plots.qzv)。
肠道微生物群的组成是各种疾病中的已知因素,事实证明是疾病状态自动分类的强大基础。需要在功能规模上更好地理解这个社区,因为这将增强这些APARACHES的生物解释性。在本文中,我们开发了一种计算管道,用于将肠道菌群的功能注释与自动分类过程相结合,并促进对其结果的下流解释。该过程作为输入分类组成数据(例如操作分类单元表(OTU)或Amplicon序列变体(ASV)丰度),并通过询问Uniprot数据库来将每个组合链接到其功能注释。肠道微生物群的功能性是由此基础构建的。二个pro纤维,微生物和功能性,用于训练随机的森林分类器,以辨别不健康的控制样品。然后根据可变的重要性进行自动选择,并且可以迭代该方法,直到分类性能降低为止。此过程表明,与微生物pro纤维相比,微生物群体转化为功能性纤维可比性,尽管表现略有下相比。通过重复,它还输出了一个强大的判别变量子集。这些选择比通过最先进的方法获得的选择更可靠,并且通过手动书目研究验证了其内容。还分析了选定的OTU和功能注释之间的互连,并揭示了重要的注释来自非选择OTU的累积影响。
*信件:A。C. Mitchell,nem@aber.ac.uk; A. Edwards,aye@aber.ac.uk关键字:深度subsurface; 16S rRNA基因;荟萃分析;细菌。缩写:方差分析,方差分析;生物膜,生物观察矩阵; CR,闭引引用; CTAB,六烷基三甲基铵溴化物; EPS,细胞外聚合物物质;它的内部转录垫片; MPA,Megapascal; OTU,运营分类单元; OTU,运营分类单元; Permanova,方差差异分析; PGC,碳的Petagram; QPCR,定量聚合酶链反应; rRNA,核糖体RNA; SRA-NCBI,序列阅读国家生物技术中心的档案数据库。†目前的地址:水生微生物生态学小组(游戏),杜伊斯堡大学,校园Essen-环境微生物学和生物技术,Universitätsstr。5,45141德国埃森。本文的在线版本可以使用五个补充图和四个补充表。001172©2023作者
采样和表征生物多样性的新方法在评估整个地球的生活模式方面具有巨大的希望。用旋风采样器对机载孢子进行采样,以及其DNA的测序,被认为是一种有效且良好的校准工具,用于调查各种环境中的真菌多样性。在这里,我们介绍了来自全球孢子采样项目的数据,其中包括在全球47个室外地点两年内收集的2,768个样本。每个样品代表从24 m 3的空气中提取的真菌DNA。我们应用了保守的生物信息学管道,该管道过滤了序列,该序列没有显示出代表真菌物种的强烈证据。管道产生了27,954个物种级的操作分类单元(OTU)。每个OTU都伴随着概率的分类学分类,并通过与专家评估进行比较来验证。要检查数据的潜力进行生态分析,我们将物种分布的变化分为空间和季节性成分,显示了年平均温度对社区组成的强烈影响。
bafes-有氧细菌内孢子形成c-碳cbafes-有氧细菌收集CSD内孢子训练-DPA冷休克域 - eps二倍酸 - 外多糖物质GFP-绿色荧光蛋白 - 绿色荧光蛋白Maldi -tof - Matrix Assisted Leisure Disruption Ionization - Time of Flight (MCF - Met phase contrast microscopy - ML Transmission Electronic Microscopy - Maximum Ladies MP - Maximum PARCIMONIA NA - NJ Sodium - Nucleotide Otu Nucleotide - Taxonomic Unit Operational PB - Basis PC - PG Cell Wall - Peptideoglycan SASP - Small Proteins Soluble Acid SL - Sensu Lato SS- sensu stricto otu-分类单元TGH-水平基因转移 - 紫外线分类单元 - 紫外线
图4。MENASIS报告武汉东湖的环境样本。 (a)D3-D8是武汉东湖中的6个不同的采样地点,每个地点的采样重复3次。 (b)排名前18种的物种分布的堆叠图。 (c)D3的Krona图表。 圈子代表不同分类水平(门,阶层,秩序,家庭,属和物种)的物种相对比例。 (d)香农 - 维也纳曲线。 水平坐标代表不同的测序数据大小,垂直坐标代表生物多样性指数。 当30,000个读取被拦截以进行分析时,所有样品的曲线变得平坦。 (e)所有样品的排名曲线。 水平坐标表示排名后的OTU数,而垂直坐标表示每个OTU的相对丰度。 x轴上的较宽范围表明物种丰度较高。 平滑曲线表明物种的分布更加均匀。 (f)每个样品的组间距离分析。 水平坐标和垂直坐标都是样品,可以根据颜色梯度和相似程度反映多个样品的相似性和差异。 (g)主成分分析。 每个点代表一个样本,相同颜色的点来自同一子组,而两个点之间的距离较小表示差异较小。MENASIS报告武汉东湖的环境样本。(a)D3-D8是武汉东湖中的6个不同的采样地点,每个地点的采样重复3次。(b)排名前18种的物种分布的堆叠图。(c)D3的Krona图表。圈子代表不同分类水平(门,阶层,秩序,家庭,属和物种)的物种相对比例。(d)香农 - 维也纳曲线。水平坐标代表不同的测序数据大小,垂直坐标代表生物多样性指数。当30,000个读取被拦截以进行分析时,所有样品的曲线变得平坦。(e)所有样品的排名曲线。水平坐标表示排名后的OTU数,而垂直坐标表示每个OTU的相对丰度。x轴上的较宽范围表明物种丰度较高。平滑曲线表明物种的分布更加均匀。(f)每个样品的组间距离分析。水平坐标和垂直坐标都是样品,可以根据颜色梯度和相似程度反映多个样品的相似性和差异。(g)主成分分析。每个点代表一个样本,相同颜色的点来自同一子组,而两个点之间的距离较小表示差异较小。
Crimean-Congo出血性发烧病毒(CCHFV)是一种tick传播的奈罗内病毒,具有广泛的地理扩展,可引起严重和致命的疾病。没有批准具体的医学对策来对抗这种疾病。CCHFV L蛋白包含一个具有半胱氨酸蛋白酶的卵巢肿瘤(OTU)结构蛋白,该结构蛋白被认为可以通过从宿主和病毒蛋白中去除泛素和ISG15翻译后修饰来调节细胞免疫反应。病毒去泛素酶(例如CCHFV OTU)是有吸引力的药物靶标,因为阻断其活性可能会增强对感染的细胞免疫反应,并可能抑制病毒复制本身。我们先前证明了工程化的泛素变体CC4是在体外CCHFV复制的有效抑制剂。对小蛋白抑制剂(例如CC4)的治疗使用的主要挑战是它们需要细胞内递送(例如,通过病毒载体。在这项研究中,我们检查了通过致命CCHFV小鼠模型中复制不足的重组腺病毒(AD-CC4)递送体内CC4的可行性。由于肝脏是CCHFV感染的主要目标,因此我们旨在通过比较静脉内(尾静脉)和腹膜内注射AD-CC4来优化该器官。虽然尾静脉注射是腺病毒递送的传统途径,但在我们手中,腹膜内注射导致组织中腺病毒基因组的较高和更广泛的水平,包括肝脏的预期。,尽管有希望的体外结果,但体内CC4治疗的途径均未导致保护致命的CCHFV感染。
缩写:AAC:腹主动脉肿块; CVB3:Coxsackie病毒B3; CYLD:囊肿症; DCM:扩张的心肌病; DM:糖尿病; DUSP1:双重特异性磷酸酶1; EGFR:表皮生长因子受体; ER:内质网; FSTL1:卵泡样蛋白1; GPX4:谷胱甘肽过氧化物酶4; HAUSP:疱疹病毒相关的泛素特异性蛋白酶; HIF-1α:低氧诱导因子-1α; I/R:缺血再灌注; JAMMS:JAB1/MPN/MOV34金属蛋白酶; KDM3A:赖氨酸特异性脱甲基酶3a; mettl3:类似甲基转移酶的3; MI:心肌梗塞; MIDYS:MIDYS家庭主题与含有新颖的配音家庭的泛素互动; MJD:Machado Joseph病蛋白; NAD +:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸; OTU:卵巢肿瘤相关的蛋白酶;耳鼻蛋白:具有线性链接特异性的OTU去泛素酶; PAC:肺动脉连接; RHD:风湿性心脏病; RVH:右心肥大; SERCA2A:SARCO/内质网Ca2 + -ATPase; sirt:sirtuin; Slim1:骨骼肌lim蛋白1; STAT3:转录3的信号换能器和激活因子; T2DM:type2糖尿病; TAC:跨动脉缩空; TAK1:转化生长因子激活的激酶1; UCHS:泛素C末端水解酶; USP:泛素特异性蛋白酶; YB-1:Y-box结合蛋白-1。
●SIPA教师顾问,Christine Capilouto教授对Capstone项目的指导和监督。●尼日利亚的农村电气化机构(REA)在我们在尼日利亚逗留期间的热情款待 - 安排对Petti和Toto的现场访问,提供他们对迷你网格的见解,并将团队与其他利益相关者联系起来。特别感谢David Otu的勤奋努力和与REA的有效沟通,以确保富有成效的国内访问。●哥伦比亚大学的国际公共事务学院(SIPA)提供了有关旅行物流的财务支持和指导●尼日利亚政府的专家和从业人员,非营利组织,公司和多边组织以及学术界,并咨询了学术界,以分享他们的宝贵知识和专业知识。
经历了最大的变化,因为它们与38天大的苍蝇明显分离。年龄被认为是解释组之间的差异(Anosim,p <0.001,r = 0.6281)的最重要因素,而不是对观察到的差异显示影响的饲料(p = 0.429,r = 0.0013)(图2a)。年龄相关的分离似乎是在样品中的几个属的特征2b)。这两个时间点的大多数样品与大多数观察到的OTU一起吸引了Origo,这表明潜在的共享组成。3.2。微生物富集可以调节衰老蝇中的微生物组组成。