本文探讨了天然气 (NG) 作为运输燃料(特别是用于海上运输)对环境的影响。目的是系统地评估加拿大不列颠哥伦比亚省 (BC) 天然气燃料上游燃料供应链中的温室气体 (GHG) 排放。加拿大西部渡轮运营最近引入液化天然气 (LNG) 燃料,这是向大规模采用 NG 作为更清洁、更低成本燃料迈出的重要一步。这使得对 NG/LNG 燃料的温室气体排放进行准确的生命周期评估 (LCA) 的系统方法变得更加重要和紧迫。使用来自采用不同发动机技术和燃料类型的船舶的运行和燃料消耗数据进行分析表明,与低硫石油柴油发动机相比,柴油循环天然气发动机的 CO 2e 排放量将减少 2%,而其他 NG 发动机技术,如稀薄燃烧奥托循环发动机或双燃料燃气发动机,将导致 CO 2e 排放量增加 4%。这项研究消除了人们对油井到泵 (WTP) NG 排放的疑虑,支持广泛采用 NG 燃料,并促进船舶推进中泵到螺旋桨 (PTP) 排放的进一步改善。© 2020 作者。由 Elsevier Ltd. 出版。这是一篇根据 CC BY-NC-ND 许可协议开放获取的文章(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)。
第IX章放射学服务CPT代码70000-79999 A.简介第一章中讨论的正确编码原则适用于70000-79999范围内的当前程序术语(CPT)代码。在本章中重复了几个通用准则。但是,本章中未讨论的第一章中的一般准则仍然适用。医师应报告医疗保健通用程序编码系统/当前程序术语(HCPCS/CPT)代码,该代码描述了可能最大的特异性执行程序。仅在执行代码所述的所有服务时,才应报告HCPCS/CPT代码。如果存在描述服务的单个HCPC/CPT代码,则医生不得报告多个HCPC/CPT代码。这种类型的解开是不正确的编码。HCPCS/CPT代码包括通常作为该程序的一部分执行的所有服务作为医疗/外科实践的标准。医生不得因为HCPC/CPT代码存在。在本章中阐明了CPT本节所特有的特定问题。B.评估与管理(E&M)服务本节总结了全球时期报告评估与管理(E&M)服务的一些医疗保险全球外科手术规则。Medicare医师费时间表上的所有程序均分配了000、010、090,XXX,YYY,ZZZ或MMM的全球周期。全局概念不适用于XXX程序。YYY程序的全球时期由Medicare行政承包商(MAC)定义。所有具有全球ZZZ时期的过程均与另一个过程有关,并且ZZZ代码的适用全局期限由相关程序确定。具有全球MMM时期的程序是产妇程序。 由于国家正确的编码计划(NCCI)程序到处理(PTP)编辑由同一提供商/供应商适用于同一受益人的同一天服务,因此某些全球手术规则适用于NCCI。 在有限情况下的全球周期,全球周期为000、010或090天的过程中,E&M服务可单独报告。 如果程序的全球周期为090天,则将其定义为主要的手术程序。 如果在同一服务日期与主要外科手术的同期执行E&M服务,以决定是否执行此手术程序,则可以单独报告E&M服务。 与主要外科手术的同一服务日期的其他术前E&M服务具有全球MMM时期的程序是产妇程序。由于国家正确的编码计划(NCCI)程序到处理(PTP)编辑由同一提供商/供应商适用于同一受益人的同一天服务,因此某些全球手术规则适用于NCCI。在有限情况下的全球周期,全球周期为000、010或090天的过程中,E&M服务可单独报告。如果程序的全球周期为090天,则将其定义为主要的手术程序。如果在同一服务日期与主要外科手术的同期执行E&M服务,以决定是否执行此手术程序,则可以单独报告E&M服务。与主要外科手术的同一服务日期的其他术前E&M服务
癌症治疗中的靶向疗法可以通过改变特定生物分子的组织暴露来提高体内功效并降低不良反应。然而,由于以下因素,包括(1)基于蛋白质蛋白质相互作用(PPIS)的功能,((3)蛋白质家族中高度特定的活性位点,(4)蛋白质家族中的高度保守的活性位点,以及(4)蛋白质家族的可变性,(4)Tertriary Docking结构的可变性。本综述仔细引入了不良目标蛋白(例如KRAS,TP53,C-MYC,PTP)的当前状态。一些新颖的技术和药物设计策略已适用于克服这些不良蛋白质,最经典,最著名的技术是靶向嵌合体(Protacs)的蛋白水解。在这篇综述中,描述了新的药物开发策略,包括靶向蛋白质降解,靶向PPI,靶向固有无序区域以及靶向蛋白-DNA结合的靶向,我们还讨论了这些策略克服不合格目标的潜力。此外,像alpha折叠的智能辅助技术有助于我们预测蛋白质结构,这对药物开发有益。发现新靶标和针对目标的药物的开发,尤其是那些不难的目标,仍然是一个巨大的挑战。新的药物开发策略,不会破坏蛋白质 - 蛋白质相互作用的更好的提取过程以及更精确的人工智能技术可能会在克服这些不良目标的目标方面提供重大帮助。
定义:IEC [321-01-01]定义的仪器变压器。旨在将信息信号传输到测量仪器,仪表以及保护性或控制设备的变压器。lpit:IEC 61869定义的低功率仪器变压器。它旨在连接到需要低功率(模拟或数字)的仪器,仪表和保护或控制设备。LPIT的一般设计包含3个元素:传感,链接和合并单元,如第2章FD-PAC:完全数字保护和控制系统。保护和控制系统旨在从其数字信息信号中接收数字信息信号。sv:由IEC 61850定义的采样值:从LPIT传输信息到FDPAC的数字信息格式。Other symbols and abbreviated terms AC alternating current ADC analogue-to-digital converter AIS air-insulated switchgear CS control system CT current transformer CVT capacitor voltage transformer EIT electronic LPIT EMC electromagnetic compatibility GIS gas-insulated switchgear GNNS global navigation satellite system IED intelligent electronic device IT instrument transformer LPIT low-power instrument transformer LPVT低功率电压变压器MU合并单元NCIT LPIT NTP NTP网络时间协议PACS保护自动化和控制系统PMU量法测量单元PTP精度时间协议SAMU独立合并单元TSO传输系统操作员
作为交通和移动战略领域的一部分,DTPW 运营着全美第 15 大公共交通系统(基于年度车辆收入英里)和佛罗里达州最大的交通运输机构。DTPW 沿着 99 条路线提供每年约 2500 万英里的 Metrobus 营收服务,其中 24 条路线通过合同服务运营,车队由 687 辆全尺寸公交车、56 辆铰接式公交车、3 辆小型公交车、33 辆电动公交车和 76 辆承包商运营的公交车组成。DTPW 的系统还包括一条 25 英里长的双高架 Metrorail 轨道、一条 20 英里长的 South Dade TransitWay 线路(是美国最长的线路之一)和一条 4.4 英里长的双高架 Metromover 轨道。此外,DTPW 还为符合条件的参与者提供特殊交通服务 (STS);管理安全高效的道路、桥梁、排水系统、道路、交通信号灯、标志和路灯系统的规划、建设和维护;管理道路基础设施的维护、检查、合规和改进计划;实施资本改进计划和交通改进计划中包含的所有县公路、公交和社区改进项目;实施建设更好社区一般责任债券 (BBC GOB) 计划中的各种公共工程项目和人民交通计划 (PTP) 中的所有县交通资本项目;通过对这些和其他排水设施进行充分维护,确保二级排水渠系统最大限度地防洪;并许可和监管私人出租交通。
第2章。 div>计划注意事项。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>7 2.1场景描述。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>8 2.1.11在现有的IBM Z系列中升级到IBM Z16。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。。。。。8 2.1.2安装新的IBM Z16。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。8 2.1.3计划方案。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。8 2.2关键工具。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>9 2.2.1 IBM资源链接。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>10 2.2.2硬件配置信息。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>10 2.2.3 CHPID映射工具。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>11 2.2.4 HCD和CMT。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>11 2.3额外的工具。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。12 2.3.1输入/输出配置程序。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。12 2.3.2全球端口名称预测工具。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。12 2.3.3耦合设施结构sizer。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。13 2.3.4功率估计工具。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。13 2.3.5共享内存通信适用性工具。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。13 2.3.6 IBM Z批处理网络分析仪工具。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。13 2.4硬件管理控制台和支持元素任务。。。。。。。。。。。。。。。。。。。14 2.4.1激活曲线。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。14 2.4.2加密配置。。。。。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>15 2.2.3 LPAR组控制。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>16 2.4.4控制台和终端。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>16 2.4.5硬件管理应用程序。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>17 2.4.6硬件管理Conderle注意事项。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>18 2.4.7支持项目设置。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>21 2.4.8精确时间协议。 div>。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。22 2.4.9服务器时间协议。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。22 2.4.10 PTP和STP计划注意事项。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。22 2.5 IODF配置。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。23 2.5.1逻辑通道子系统。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。23 2.5.2逻辑分区。。。。。。。。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>24 2.5.3 Storrage结缔组织。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>26 2.5.4网络连接。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。。。。。。。。。。。。。28 2.5.5耦合和计时链接。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。34 2.5.6硬件数据压缩的计划注意事项。。。。。。。。。。。。。。。。。。。35
4CP 四重峰 CAISO 加利福尼亚独立系统运营商 CDR 容量、需求和储备报告 CFE 联邦电力委员会 CONE 新进入成本 CRR 拥塞收益权 DAM 日前市场 DC 联络 直流联络 EEA 能源紧急警报 ERCOT 德克萨斯州电力可靠性委员会 ERS 紧急响应服务 FIP 燃料指数价格 GTC 通用传输约束 GW 千兆瓦 HCAP 全系统高报价上限 HE 小时末 Hz 赫兹 ISO-NE 新英格兰 ISO LDF 负荷分配系数 LDL 低调度限制 LMP 位置边际价格 LOLP 负荷损失概率 LSL 低持续限制 MISO 中部大陆独立系统运营商 MMBtu 百万英热单位 MW 兆瓦 MWh 兆瓦时 NCGRD 发电资源指定变更通知 NOIE 非选择加入实体 NPRR 节点协议修订请求 NSO 暂停运营通知 NYISO 纽约独立系统运营商 OBD 其他约束性文件 ORDC 运营储备需求曲线 PCRR 预先分配的拥塞收入权 PTP 点对点 PTPLO 带有选项链接的点对点义务 PUC 公用事业委员会 PURA 公用事业监管法 QSE 合格调度实体 RDI 剩余需求指数 RENA 实时收入中性分配 RTCA 实时应急分析 RDPA 实时可靠性部署价格加法器 RUC 可靠性单元承诺 SASM 补充辅助服务市场
在医学领域,由于患者人群中肿瘤的稀有性,对图像的可靠检测和分类仍然是巨大的挑战。在异常情况下检测肿瘤病例的能力对于确保及时干预和改善患者预后至关重要。这项研究通过利用深度学习(DL)技术来检测和分类具有挑战性的情况下的脑肿瘤来解决这一挑战。本研究采用深度学习(DL)技术来应对这一挑战,利用来自国家脑图实验室(NBML)的数据集,其中包括约81例患者,其中包括30例患者,其中包括30例肿瘤病例和51例正常情况。我们的方法包括两个阶段:检测和分类。在第一阶段,广泛的数据预处理模拟现实世界的条件,调整数据集以反映每种1例肿瘤病例的9例正常情况的异常分布。接下来,对Yolov8n模型进行了微调以检测肿瘤区域。为了评估该模型在患者水平上的表现,我们引入了患者对患者(PTP)度量,该指标评估了在整个人群中识别肿瘤病例的能力,而不是测量单个切片的性能。这种方法提供了模型可靠性更临床相关的评估。该模型的F1得分为0.98,PTP-F1得分为1.0,正确分类了测试人群中的所有患者。在分类阶段,数据有效的图像变压器(DEIT)用于从RESNET152教师模型中提取视觉变压器(VIT)模型。DEIT被选为其在小数据集上有效训练的能力。蒸馏分类器在20个时期后达到0.92,而RESNET152模型达到0.97,尽管计算成本较高,但达到了0.97。这项研究表明,在具有挑战性的情况下对脑肿瘤的可靠检测和分类方面有了显着的进步,从而提供了实用应用的潜力。
2024年9月25日,美国卫生与公共服务部和美国财政部(共同统称“部门”)批准了纽约(也称为“州”)申请,以修改其国家创新放弃,根据《平价医疗法案》第1332条(ACA)(ACA)(ACA)(ACA)(ACA)(ACA)(通过第1332号第1332号豁免),1月20日everry> 1月20日,有效期为202.255, 202,有效期为eartive,<20255, 修订后的第1332条豁免将允许纽约为纽约卫生卫生州的某些参与者(国家健康保险交易所(交易所)的某些参与者实施州成本分担的补贴。 此外,修订后的第1332条豁免计划继续纽约的承保范围计划,“基本计划(EP)扩展”,通常反映了该州的基本健康计划(BHP),并为某些家庭收入的某些居民提供了扩大资格,最高可估计的联邦贫困水平的250%(FPL)。 EP扩展还包括一些收入低于250%的FPL的人,否则他们将被授予医疗补助覆盖范围或没有豁免的国家资助的健康保险计划。 代表纽约进行的精算分析,并作为其第1332条豁免修订申请项目的一部分提交,该项目将使修订后的豁免将导致更多的人承担覆盖范围,并提高了负担能力。 这些精算分析项目,某些估计家庭收入超过200%FPL的居民预计将在整个5年的豁免期内经历总计36亿美元的总溢价和成本分担的节省。 由于纽约修订的第1332条豁免,该州将继续获得联邦通过的资金。修订后的第1332条豁免将允许纽约为纽约卫生卫生州的某些参与者(国家健康保险交易所(交易所)的某些参与者实施州成本分担的补贴。此外,修订后的第1332条豁免计划继续纽约的承保范围计划,“基本计划(EP)扩展”,通常反映了该州的基本健康计划(BHP),并为某些家庭收入的某些居民提供了扩大资格,最高可估计的联邦贫困水平的250%(FPL)。EP扩展还包括一些收入低于250%的FPL的人,否则他们将被授予医疗补助覆盖范围或没有豁免的国家资助的健康保险计划。代表纽约进行的精算分析,并作为其第1332条豁免修订申请项目的一部分提交,该项目将使修订后的豁免将导致更多的人承担覆盖范围,并提高了负担能力。这些精算分析项目,某些估计家庭收入超过200%FPL的居民预计将在整个5年的豁免期内经历总计36亿美元的总溢价和成本分担的节省。由于纽约修订的第1332条豁免,该州将继续获得联邦通过的资金。,根据《豁免修正案》在2025年开始的某些交易所入学者的豁免修订中引入的州成本分担补贴预计将在2025年的2025年节省3.07亿美元,从2025 - 2028年为13亿美元,估计的年平均平均水平为117,687名。具体来说,纽约将基于与某些家庭收入估计为200至250%的FPL的某些人的PTC支出相关的溢价税收抵免(PTC)储蓄,而基于FPL的200至250%,并且是基于对BHP支出的范围,以供PTC提供的范围内的PTP额外偿还的范围,否则将对PTC提供了相关的计划。0f 1该通过资金将用于资助修订后的豁免EP扩张,该州根据该州第1332条的豁免建立的保险人补偿实施计划(IRIP),以防止个人市场招募的溢价增加,这是由于个人在估计的fpl and for Epshies for Epshive the Epshive for Ep-Shiv的估计及以下的fpl and Shar的影响的个人影响,而Shiver的一部分是1F,而Shiver的一部分则降低了1F,而Shiver的一部分则降低了1F。参与者。部门已确定纽约修订的第1332条豁免计划符合ACA ACA第1332(b)(1)(a) - (d)节中概述的要求。具体来说,修订了
焦磷酸测序:Roche模板由EMPCR 1制备,其中1-20万珠沉积在PTP井中。较小的珠,带有连接的硫酸酶和荧光素酶围绕模板珠。单个DNTP依次流过井,以预定的顺序分配。在掺入补体DNTP时,释放的PP I被转换为ATP,从荧光素蛋白到羟基二耐蛋白的氧化产生光。读取平均400个基础作为流程图。对于均聚物,重复多达六个核苷酸,添加的DNTP的数量与光信号成正比。插入是最常见的错误类型,其次是删除。通过连接测序:将约1亿个EMPCR的模板珠沉积在载玻片上。在退火时,添加了1,2个探针的库。适当的条件使选择性杂交和探针结扎到互补位置。1,2探针的第一个(y)和第二(z)位置被设计为审讯库,因此16个二核苷酸由四种染料编码。在四色成像之后,将带状的1,2探针化学裂解以产生5'-PO 4组(P)。杂交,连接,成像和裂解的循环又重复了六次。然后从模板中剥离扩展引物,并使用N – 1底漆进行第二个连接弹,该底漆将询问底座重置为左侧的一个位置。询问每个基础两倍,提高了颜色调用的准确性。随后发生了七个连接周期,然后再进行三个结扎弹。然后将35个数据位组成的字符串在色彩空间中编码,然后对准参考基因组以解码DNA序列。替换是最常见的错误类型。可逆终结器:DNA片段的Illumina Bridge放大是在载玻片的八个通道上随机分布的,高密度向前和反向引物共价附加到其上。固相扩增可从单个ssDNA模板产生约8000万个MC。将底漆退火到每个MC中模板的自由末端。聚合酶延伸,然后终止从四个RTs组中的DNA合成,每组用不同的染料标记。未合并的RT被洗净,通过四颜色成像进行基础识别,并通过化学裂解去除阻塞和染料组以允许下一个周期。给定MC的颜色图像提供了〜45个基础的读取。替换是最常见的错误类型。使用RTS进行单分子测序:Helicos数十亿个未夸大的ssDNA模板是用poly(da)尾巴制备的,这些尾巴与聚(DT)引物杂交,共同连接到载玻片上。对于一通测序,该引物 - 模板复合物就足够了。两通序测序涉及复制模板链,删除原始模板,并退火向表面(未显示)。与Illumina的RT不同,这四个Helicos RT用相同的染料标记,并以预定的顺序单独分配。融合事件导致荧光信号。使用单分子消除了Dephasing的问题,其中给定MC内的数千个复制模板不会有效地扩展其引物。删除是最常见的误差类型,可以通过提供约25个基本共识读取的两次测序可大大降低。的应用和挑战100篇论文描述了这些创新的成果。虽然改进继续,但读取长度限制,错误类型和频率显着影响组装策略。对于简短(<100个基本)读取平台,通过映射到参考基因组来指导组装。结合Sanger和Roche数据(100个基本读数)改善了从头组件2,并且随着焦磷酸测序读取长度的改进,使用混合Roche(250键读数)和Illumina数据进行了改善,已经描述了从头组装。最近使用Roche 4和Illumina平台报告了第一个个性化基因组测序项目。Roche,Illumina和AB平台在1,000个基因组项目中被用于生成人类遗传变异的详细图表以及人类微生物组项目,以将微生物组动态与人类健康相关联。应用不限于测序基因组。共识计数分析5最近出现了,从而实现了转录因子结合,mRNA剪接,DNA甲基化,小RNA,染色质结构和DNase超敏位点的全局分析。配对的测序方案。这些不仅对从头组件很重要,而且对于识别结构变化和映射mRNA剪接同工型。展望未来,太平洋生物科学,多佛系统(Polonator G.007),Visigen Biotechnologies,Lasergen,Inc。,Intelligent Bio-Symys,完整的基因组学和牛津Nanopore技术等公司的平台开发。