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鉴定人类细胞中复制应力反应的关键因素Louise M.E. Janssen 1，Empar Baltasar Perez 1，Chantal Vaartin
方法在补充了10％FCS，1％谷歌补充剂（Gibco），100 U/ml青霉素和100μg/ml链霉菌素的IMDM（Gibco）中培养了衍生成近单倍型HAP1细胞的细胞培养。siRNA转染是根据制造商的指南使用Rnaimax（Invitrogen）进行的。在这项研究中使用了以下siRNA：Sinon-targetable（Dharmacon），Sipolg2（地平线，TargetPlus，SmartPool），SIMRPL23（Horizon，Targetplus，TargetPlus，Smartpool）。将所有药物（Aphidicolin，Hu，Olaparib，Rad51i（B02），DNA-PKI（NU74441）和寡霉素A）溶解在DMSO中，并以指示浓度使用。细胞使用具有137CS源的γ提取器（最佳疗法）进行γ辐射。生长测定HAP1细胞以1500个细胞/孔的密度将HAP1细胞铺在96孔板中，并被视为5天。5天后，使用100％甲醇固定细胞，并在室温下使用Crystal Violet染色2H。随后，将晶体紫溶解在10％乙酸中，并使用Biotek Epoch Epoch分光光度计在595 nm处测量强度。使用非线性拟合，sigmoidal，4pl，x是log（浓度），将这些测量值用于棱镜中的IC50计算。在9mm玻璃盖上生长免疫荧光细胞，并在室温下以4％甲醛和0.2％Triton X-100固定10分钟。使用了以下抗体：人类抗克雷斯特（Cortex Biochem，CS1058），兔抗PH3SER10（Campro，＃07-081），小鼠抗ERCC6L（PICH）（ABNOVA，ABNOVA，000548421-B01P）。所有初级抗体在4°C的夜间孵育。使用固定缓冲液I（BD生物科学）固定细胞。细胞。二级抗体（分子探针，Invitrogen）和DAPI在室温下孵育2小时。使用延长金（Invitrogen）安装盖玻片。使用具有60倍1.40 Na油目标的Deltavision Deonvolution显微镜（Applied Precision）获取图像。SoftWorx（应用精度），ImageJ，Adobe Photoshop和Illustrator CS6用于处理获得的图像。单倍体插入诱变筛选基因对用APH或HU处理的HAP1细胞的存活至关重要，如先前所述35，使用单倍体插入诱变筛查鉴定。诱变的HAP1细胞是从Brummelkamp实验室获得的。简短地，获得HAP1细胞的诱变如下：在HEK293T细胞中产生了基因陷阱逆转录病毒。每天两次收获逆转录病毒至少三天，并通过离心（使用SW28转子进行2小时，21,000 rpm，4°C，4°C）进行沉淀。在8μg/ml硫酸素硫酸素的存在下，在T175烧瓶中至少连续两天，在8μg/ml硫酸素的存在下，将大约4000万个HAP1细胞通过浓缩基因陷阱病毒的转导而被诱变。在包含10％DMSO和10％FCS的IMDM培养基中冷冻诱变细胞。解冻后，在存在27.5 nm adphidicolin或100μmHu的情况下，将诱变的HAP1细胞转移了10天。传递后，通过胰蛋白酶-EDTA收集细胞，然后进行沉淀。为了最大程度地减少潜在地含有杂合突变的二倍体细胞的混杂，用DAPI染色固定的细胞，以允许使用Astrios Moflo对G1单倍体DNA含量进行分类。将3000万个排序的细胞在56°C下裂解过夜，以使使用DNA迷你试剂盒（QIAGEN）进行基因组DNA分离。插入位点映射基因陷阱插入位点通过LAM-PCR放大，然后进行捕获，ssDNA接头连接和指数放大，并在测序之前使用含有Illumina适配器的引物，如前所述，如前所述35。映射和插入位点的分析以前描述了78。简短地，在对HISEQ 2000或HISEQ 2500（Illumina）进行测序之后，将插入位点映射到人类基因组（H19），允许一个不匹配，并与RefSeq坐标相交，以将插入位点分配给基因。基因区域在相对链上重叠的基因区域没有考虑进行分析，而对于在相同链基因名称上重叠的基因是串联的。对于每种复制和两种药物治疗（APH或HU）基因的必要性都是通过二项式检验确定的。合成致死性。一个基因通过所有Fisher的测试，其p值截止为0.05，效应大小至少为0.12（减法比率wt sense比率 - 复制应力条件感官比率）。
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演讲口头演讲2023诺贝尔医学和生理学奖2023年。帕兹，玻利维亚。2022年，“适应内石器时代的微生物以突然在环境条件下变化”。1 ST玻利维亚分子生物学研讨会。2022“由社区结构分析确定的Uyuni Salt Flat（玻利维亚）中的微生物群分散体”。半会议。Mayagüez, Puerto Rico. 2020 “RolesoftheregulatoryRNAintheadaptationofmicrobialcommunitiesto environmental stress”. 2 ND International Congress of Biotechnology. Santa Cruz, Bolivia. 2019 “Insights into regional and global dispersion of microorganisms: biogeography of halophiles as a model”. II Scientific Journeys, La PAZ，玻利维亚，2019年，“多个工作假设，可以在微生物群落中处理复杂性”。ASM Microbe 2019, San Francisco, CA. 2018 “Detection of ubiquitous and confinedmicroorganismsataglobalscalein salineandhypersalineenvironments:meta-analysisperspectiveofhalophilic communities”.6 th Studentresearchsymposium:Passingthetorchtothenext世代。玻利维亚的苏克雷。污染物intharenthypershypersalineenenncormentintheworld”。
Marcos Perez – Losada-米尔肯学院公共卫生学院
乔治华盛顿大学教育与培训1998博士生物学。西班牙维戈大学。summa cum Laude和论文奖。1993 M.S. 生物学。 西班牙维戈大学。 summa cum Laude。 1992 B.S. 生物学。 圣地亚哥大学西班牙。 summa cum Laude。 专业就业2021-副教授。 生物统计学和生物信息学系。 米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2019 - 2021年助理教授。 生物统计学和生物信息学系。 米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2017 - 2019年助理教授。 流行病学和生物统计学系。 米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2013 - 2017年助理研究教授。 美国乔治华盛顿大学计算生物学研究所2014-2017 K12学者。 K12职业发展计划：DC中的儿科肺部疾病的OMIC。 美国国家医学中心，2008-2016 CentroDevistryaçãoemBioversidade E RocursosGenéticos，葡萄牙2006- 2008年高级研究科学家。 Genoma LLC，美国2001-2006研究助理。 Brigham Young University，美国1999-2001 Fulbright博士后研究员。 美国杨大学，美国1998年博士后研究员。 英国赫尔大学，1992 - 1998年研究助理。1993 M.S.生物学。西班牙维戈大学。summa cum Laude。1992 B.S. 生物学。 圣地亚哥大学西班牙。 summa cum Laude。 专业就业2021-副教授。 生物统计学和生物信息学系。 米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2019 - 2021年助理教授。 生物统计学和生物信息学系。 米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2017 - 2019年助理教授。 流行病学和生物统计学系。 米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2013 - 2017年助理研究教授。 美国乔治华盛顿大学计算生物学研究所2014-2017 K12学者。 K12职业发展计划：DC中的儿科肺部疾病的OMIC。 美国国家医学中心，2008-2016 CentroDevistryaçãoemBioversidade E RocursosGenéticos，葡萄牙2006- 2008年高级研究科学家。 Genoma LLC，美国2001-2006研究助理。 Brigham Young University，美国1999-2001 Fulbright博士后研究员。 美国杨大学，美国1998年博士后研究员。 英国赫尔大学，1992 - 1998年研究助理。1992 B.S.生物学。圣地亚哥大学西班牙。summa cum Laude。专业就业2021-副教授。生物统计学和生物信息学系。米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2019 - 2021年助理教授。生物统计学和生物信息学系。米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2017 - 2019年助理教授。流行病学和生物统计学系。米尔肯学院公共卫生学院，美国乔治华盛顿大学，2013 - 2017年助理研究教授。美国乔治华盛顿大学计算生物学研究所2014-2017 K12学者。K12职业发展计划：DC中的儿科肺部疾病的OMIC。 美国国家医学中心，2008-2016 CentroDevistryaçãoemBioversidade E RocursosGenéticos，葡萄牙2006- 2008年高级研究科学家。 Genoma LLC，美国2001-2006研究助理。 Brigham Young University，美国1999-2001 Fulbright博士后研究员。 美国杨大学，美国1998年博士后研究员。 英国赫尔大学，1992 - 1998年研究助理。K12职业发展计划：DC中的儿科肺部疾病的OMIC。美国国家医学中心，2008-2016 CentroDevistryaçãoemBioversidade E RocursosGenéticos，葡萄牙2006- 2008年高级研究科学家。Genoma LLC，美国2001-2006研究助理。Brigham Young University，美国1999-2001 Fulbright博士后研究员。 美国杨大学，美国1998年博士后研究员。 英国赫尔大学，1992 - 1998年研究助理。Brigham Young University，美国1999-2001 Fulbright博士后研究员。美国杨大学，美国1998年博士后研究员。 英国赫尔大学，1992 - 1998年研究助理。美国杨大学，美国1998年博士后研究员。英国赫尔大学，1992 - 1998年研究助理。英国赫尔大学，1992 - 1998年研究助理。Vigo大学，西班牙荣誉和奖项2018 GWSPH Master教学学院研究员2009 Calouste Gulbenkian Foundation，葡萄牙Vigo大学，西班牙荣誉和奖项2018 GWSPH Master教学学院研究员2009 Calouste Gulbenkian Foundation，葡萄牙
引用：Perez FP、Morisaki J、Kanakri H、Rizkalla M。电磁场刺激疗法治疗阿尔茨海默病。Neurol Curr Res. 2024;3(1):1
阿尔茨海默病 (AD) 是全球最常见的神经退行性痴呆症。AD 是一种多因素疾病，会导致记忆力和功能逐渐下降，而毒性 β-淀粉样蛋白 (Aβ) 是 AD 病理学中的关键因素。2022 年，650 万美国人患有 AD，给美国造成了 3210 亿美元的损失。AD 治疗的标准护理包括乙酰胆碱酯酶抑制剂 (AchEI)、NMDA 受体拮抗剂和单克隆抗体 (mAb)。然而，这些方法要么：1) 无法改善认知，2) 无法改变疾病进展，3) 治疗靶点数量有限，4) 容易引起严重的副作用（mAb 导致脑肿胀、微出血，AchEI 导致心动过缓和晕厥），5) 无法有效穿过血脑屏障，6) 缺乏对衰老过程对疾病影响的了解。
le trident de Poseidon，探索/监视器的太空任务概念研究（欧罗巴）。 A. Marlio-Marette 1,2，A。Perard1,2，P。Bartels1,2和E. Perez 1
任务将分为三个阶段：第一个将包括在4到5个月的时间内开采，以将地震计插入地面。第二阶段将集中于使用声波进行地质运动和探测的研究。将允许衡量冰的确切深度，并提供有关欧罗巴和一般其他冰月卫星组成的更好的知识。第三阶段与第二阶段平行进行，将与激光器无休止地进行采矿，同时使用传感器监视过程，收集尽可能多的信息，以开发向欧罗巴寻找生命迹象的未来采矿任务。应该注意的是，一旦绑架者发现激光即使仍然活跃，激光也不再开采，那么第三阶段将在着陆器的寿命耗尽时结束。
Angel Perez, Jr. 诉约翰逊堡自治市
拒绝有条件豁免的审前命令可以满足这些条件。Plumhoff v. Rickard，572 US 765，771–72（2014）。但是，当该辩护的解决方案取决于有争议的重要事实问题时，拒绝有条件豁免辩护的命令并不是附带的或“最终的”。Monteiro v. City of Elizabeth，436 F.3d 397，405（3d Cir. 2006）。这里不存在这样的争议。虽然双方对佩雷斯过马路的速度和过马路后发生的事情存在分歧，但这些分歧与我们面临的狭义的初始扣押问题无关。佩雷斯坚持认为，有条件豁免分析需要“评估 [库尼奥] 作为证人的可信度”。Perez Br. 8。并非如此。有条件豁免涉及官员的“客观法律合理性”，而不是他的可信度。 Anderson v. Creighton，483 US 635，639 (1987)（已修订）。地方法院以法律而非事实为由驳回了非法扣押索赔的有条件豁免权。
t细胞受体工程针对FOXM1的治疗肺癌伊莎贝尔·佩雷斯·桑迪（Isabel Perez-sandi），张Zhang，Hui Nie，Peixin Jiang，Cassian Yee，Gr
背景：尽管取得成功，但检查点封锁免疫疗法已被证明在选定的肺癌患者人群中具有挑战性。这部分是由于发挥作用时广泛的肿瘤内异质性以及识别非肿瘤抗原的旁观者T细胞的渗透。最近的临床试验证明了使用大量未富含肿瘤浸润的淋巴细胞的过养细胞疗法的功效，但成功仍然有限。因此，需要新型的肿瘤抗原来进一步改善肺癌中细胞免疫疗法的成功。叉子盒M1（FOXM1）是在90％的肺癌中表达的转录因子，缺乏在脑组织中的表达，使其成为T细胞受体（TCR）工程的吸引力。有趣的是，FOXM1的上调与对酪氨酸激酶抑制剂（TKIS）的耐药性有关，强调了该靶标的另一种潜在的治疗应用。在这里，我们评估了FOXM1的免疫原性及其作为非小细胞肺癌中细胞治疗靶标的潜力。方法：分离抗原特异性T细胞，然后通过HLA匹配的健康供体PBMC的肽刺激扩展。然后，通过四聚体分选并进行单细胞TCR测序，以鉴定TCR的全长α和β链，将抗原特异性T细胞分离出来。TCR逆转录病毒设计为健康的供体PBMC，并通过Chromium-51释放（细胞毒性），ELISPOT（IFN-分泌）和ELISA（MIP-1分泌）评估功能。结果：在HLA-A*02：01（占美国人口的42％）上时，FOXM1（YLVPIQFPV）的表位是免疫原性的。该表位被证实是自然处理的，并使用H1975细胞进行了呈现。对细胞毒性的评估表明，TCR工程PBMC裂解了51％的H1975细胞，而H1975的H1975父母细胞仅为10％（p <0.0001）。通过ELISPOT评估的细胞因子评估表明，ELISA的IFN-r-斑点（P <0.05）和MIP-1分泌（P <0.05）显着增加。结论：我们的发现证实了在美国最普遍的HLA等位基因上呈现FOXM1的免疫原性，并支持TCR工程靶向FOXM1治疗肺癌的可行性。
引用 Hoang-Xuan, K., Deckert, M., Ferreri, A. J. M., Furtner, J., Perez-Larraya, J. G., Henriksson, R., … Bromberg, J. E. C. (2022)。欧洲协会
APHP，萨尔佩特里埃皮蒂耶医院集团神经内科系；索邦大学；IHU；ICM。法国巴黎（KHX）；科隆大学医学院和科隆大学医院神经病理学研究所，德国科隆（MD）；意大利米兰 IRCCS 圣拉斐尔科学研究所淋巴瘤科（AJMF）；维也纳医科大学生物医学和成像图像引导治疗系，奥地利维也纳（JF）；纳瓦拉健康研究所（IdiSNA），实体肿瘤项目，应用医学研究基金会，纳瓦拉诊所神经内科，西班牙纳瓦拉潘普洛纳（JGPL）；于默奥大学放射科学系、肿瘤学系，瑞典于默奥 S-901 85（RH）；瑞士洛桑 CHUV 大学医院和洛桑大学肿瘤学和临床神经科学系 (AFH)；德国斯图加特医院斯图加特血液学/肿瘤学和姑息治疗系 (BK)；比利时布鲁塞尔自由大学埃拉斯姆医院神经外科系 (FL)；莱斯利和迈克尔加芬神经肿瘤中心主任；以色列耶路撒冷哈达萨-希伯来大学医学中心肿瘤学和神经内科系 (AL)；英国曼彻斯特克里斯蒂 NHS FT 临床肿瘤学系 (CMB)；奥地利维也纳医科大学医学第一系肿瘤学分部 (MP)；瑞士苏黎世苏黎世大学和大学医院神经内科和脑肿瘤中心 (PR、MW)；意大利卡斯泰尔弗兰科威尼托/特雷维索医院神经内科 (RR)；德国波鸿大学医院 (US)；意大利都灵大学神经科学系神经肿瘤学分部和都灵健康科学城大学医院 (RR, RS)；法国圣克卢居里研究所血液学系和法国巴黎 PSL 研究大学 INSERM U932 居里研究所 (CS)；荷兰莱顿大学医学中心神经内科和海牙 Haaglanden 医学中心神经内科 (MJBT)；法国巴黎索邦大学 Pitié-Salpêtrière 医院集团眼科系 APHP；荷兰鹿特丹伊拉斯姆斯 MC 大学医学中心癌症研究所神经肿瘤学系 (JECB)
使用模拟中心评估人工智能驱动的临床决策支持系统对抑郁症治疗的感知效用 Myriam Tanguay-Sela* a、David Benrimoh* 1a、Christina Popescu a、Tamara Perez b、Colleen Rollins c、
Aifred 是一种临床决策支持系统 (CDSS)，它使用人工智能帮助医生选择重度抑郁症 (MDD) 的治疗方法，根据患者特征提供不同治疗方案的缓解概率。我们评估了参与模拟临床互动的医生对 CDSS 的实用性的看法。20 名精神病学和家庭医学工作人员和住院医生完成了一项研究，其中每位医生与标准化患者进行了三次 10 分钟的临床互动，这些患者表现出轻度、中度和重度 MDD 发作。在这些场景中，医生可以访问 CDSS，他们可以在治疗决策中使用它们。通过自我报告问卷、场景观察和访谈评估了 CDSS 的感知效用。60% 的医生认为 CDSS 是他们治疗选择过程中的有用工具，家庭医生认为其效用最大。此外，50% 的医生会将该工具用于所有抑郁症患者，另外 35% 的医生表示他们会将该工具留给病情更严重或难以治疗的患者。此外，临床医生发现该工具在与患者讨论治疗方案时很有用。必须在临床试验中进一步评估该 CDSS 的疗效及其改善治疗结果的潜力。