噬菌体 DNA 分离试剂盒产品说明书 产品编号 46800 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒提供了一种快速方法,可从在液体培养的细菌中繁殖的噬菌体中分离和纯化总 DNA。无需使用苯酚、氯仿或氯化铯即可分离 DNA。基于旋转柱的程序速度很快,可在 45 分钟内完成。该试剂盒可高效处理少量噬菌体上清液 (1 mL)。纯化的 DNA 具有最高的完整性,可用于多种下游应用,包括南方印迹、限制性片段长度多态性 (RFLP)、测序、克隆和实时 PCR。Norgen 的纯化技术 纯化基于旋转柱层析。无需使用苯酚、氯仿或氯化铯,即可优先从其他细胞成分(如蛋白质)中纯化噬菌体 DNA。该程序的起始材料是澄清的噬菌体上清液,该上清液已从液体培养物中的细菌碎片中分离出来。首先,使用提供的裂解缓冲液 B 通过热和化学裂解过程裂解噬菌体颗粒(请参阅第 4 页的流程图)。将异丙醇添加到裂解物中,然后将溶液加载到旋转柱上。Norgen 的旋转柱以取决于离子浓度的方式结合核酸,因此只有 DNA 会与柱结合,而大多数 RNA 和蛋白质会在流过中被去除。然后用提供的洗涤溶液 A 洗涤结合的 DNA 以去除任何残留杂质,并用洗脱缓冲液 B 洗脱纯化的总 DNA。纯化的总噬菌体 DNA 具有最高的完整性,可用于许多下游应用。试剂盒组件
fi g u r e 2在高山草原中评估的全范围植物和土壤特性的季节性动态。属性按最大季节进行分组:(a)春季; (b)夏天; (c)秋天。在灌木膨胀下,某些特性明显更高( + s)或较低(-s)。AOA,氨氧化古细菌; AOB,氨氧化细菌; CBH,几核酸水解酶; GLC,β-葡萄糖酶; NAG,N-乙酰葡萄糖氨基酶; Per,过氧化物酶; Pho,磷酸酶;痘,苯酚氧化酶; URE,尿布; xyl,β-二基固醇酶。 出于可视化的目的,将所有变量缩放为平均值为0,标准偏差为1。 对未量化的数据进行统计分析n = 8。 有关更多详细信息,包括实际均值和SE,精确的P和χ2值,请参见表S1 – S3。AOA,氨氧化古细菌; AOB,氨氧化细菌; CBH,几核酸水解酶; GLC,β-葡萄糖酶; NAG,N-乙酰葡萄糖氨基酶; Per,过氧化物酶; Pho,磷酸酶;痘,苯酚氧化酶; URE,尿布; xyl,β-二基固醇酶。出于可视化的目的,将所有变量缩放为平均值为0,标准偏差为1。对未量化的数据进行统计分析n = 8。有关更多详细信息,包括实际均值和SE,精确的P和χ2值,请参见表S1 – S3。
纤维素有多种形式,其中很大一部分来自生活垃圾和工业垃圾 [28]。半纤维素可能是各种聚合单糖的混合物,如醛己糖、甘露糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、4-O-甲基葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸残基 [39]。在硬木木聚糖中,主链由通过 β -(1,4)-糖苷键偶联并通过 α -(1,2)-糖苷键与 4-O-甲基葡萄糖醛酸基团分支的木糖单元组成 [38]。木质素是由苯丙烷类前体合成的芳香族化合物。聚合物的基本化学苯丙烷单元(主要是紫丁香基、愈创木基和对羟基苯酚)通过一组键连接在一起,形成基质。该基质含有多种有用的基团,如甲氧基和羰基,它们赋予聚合物有机化合物高极性[40]。
1. 巴斯夫公司 2. 普莱克斯 3. 亨斯迈先进材料 4. ENSTOR(海湾天然气存储) 5. 奥林公司 6. 泰特莱尔 7. 普莱克斯 8. 美国胺类公司 9. 阿科玛 10. 诺力昂 11. 兰精纤维公司 12. FMC 公司 13. AMVAC 化学公司 14. 壳牌化学公司 15. Matheson Tri-gas 16. Southern Ionics 17. Mobile Rosin Oil Co. 18. Occidental 19. 霍尼韦尔 UOP 20. 凯米拉 21. 三菱多晶硅 22. 普莱克斯 23. 赢创 24. INEOS 苯酚 25. 巴斯夫 26. 巴斯夫农业解决方案 27. W&T Offshore 28. Harcros Chemical 29. Millard Maritime 30. Core Industries 31. APM 终端
HYPOX ® RF928 加合物是一种用 CTBN(羧基封端丁二烯-丙烯腈)共聚物增韧的环氧酚醛树脂。HYPOX ® RF928 加合物具有相对较低的粘度,官能度为 2.3,弹性体含量为 20%。CTBN 通过在固化过程中形成两个阶段来提高固化环氧配方的韧性。韧性的提高是以 Tg 的最小牺牲为代价的。与非增韧环氧树脂相比,加入 HYPOX ® RF928 加合物的配方在抗冲击和抗热循环性、剥离和拉伸剪切强度以及低温机械性能方面均有所改善。HYPOX ® RF928 加合物由于其更高的官能度,与以相同橡胶水平增韧的 DGEBA 相比,应具有更好的耐化学性和耐热性。
1. 将 5 ml 血液收集到含有 EDTA 的真空采血管 (Becton Dickinson) 中并混合。2. 用溶液 1 (10 mM Tris pH 7.6;10 mM KCl;10 mM MgCl2) 定容至 10 ml。3. 加入 120 μl Nonidet P40 (BDH) 以裂解细胞。颠倒几次以充分混合。4. 以 2000 rpm 的速度旋转核沉淀 10 分钟。5. 倒出上清液,不要移出沉淀。沉淀可以冷冻保存。6. 将沉淀轻轻地重新悬浮在 800 μl 溶液 2 (10 mM Tris pH 7.6;10 mM KCl;10 mM MgCl2;0.5 M NaCl;0.5% SDS;2 mM EDTA) 中。溶液 2 会裂解细胞核,所以要小心不要剪切 DNA。转移到 1.5 ml 的微量离心管中。7. 加入 400 μl 蒸馏苯酚(饱和于 1 M Tris pH 8.0)并混匀。8. 以 12000 rpm 的速度离心 1 分钟。将上层相转移到干净的微量离心管中。不要担心转移少量界面。9. 加入 200 μl 苯酚和 200 μl 氯仿:异戊醇(24:1)。颠倒混匀。10. 以 12000 rpm 的速度旋转 1 分钟。将上层相转移到干净的微量离心管中。11. 加入 700 μl 氯仿:异戊醇并按上述方法提取。12. 将上层水相转移到一个小的干净容器中。避免去除界面。加入 2 倍体积的冰冷乙醇并混合以沉淀 DNA*。 13. 使用密封的吸液管尖端将 DNA 纤维转移到含有 1 ml 70% 乙醇的微量离心管中。充分混合以清洗 DNA。14. 全速旋转 5 分钟。倒掉乙醇并在真空吸尘器中干燥沉淀物。在 65°C 的无菌水中重新悬浮 DNA。不要过度干燥基因组 DNA,否则将很难重新悬浮。
糖尿病是一种代谢性疾病,其特征是高血糖,可以通过α-葡萄糖苷酶(α -GLU)(α -GLU)和α-淀粉酶(α -AMY)的含量来抵消,负责碳水化合物水解的酶。近几十年来,许多天然化合物及其生物启发的类似物已被研究为α -GLU和α -amy抑制剂。然而,没有研究用于评估Neolignan obovatol(1)对α -Glu和α -amy抑制作用。在这项工作中,我们报告了1和新类似物库的合成。这些化合物的合成是通过基于以下方法实施方法来实现的:苯酚烯丙基化,claisen/cope重排,甲基化,Ullmann偶联,脱甲基化,苯酚氧化和迈克尔型添加。obovatol(1)和十个类似物的体外抑制活性对α -glu和α -amy。我们的研究强调,天然发生的1和4个Neolignan类似物(11、22、26和27)比低糖症药物acarbose(α -amy:34.6 µm;α -Glu:α-Glu:248.3 µm)更有效抑制剂,其IC 5O值为6.2-23.6 µM -MAN -MY -MAN -MAN -MY tody -thy39。 -glu。对接进行了验证验证了抑制结果,突出了合成的新尼亚尼亚人和两种酶之间的最佳兼容性。同时循环二分色谱法检测到与研究的新木剂相互作用引起的α -GLU的构象变化。最后,在人类结肠癌细胞系(HCT-116)测试了研究化合物的体外细胞毒性。通过荧光测量和α -Glu和α -amy抑制作用的动力学的详细研究也表明,1、11、22、26和27对α -GLU具有最大的亲和力,对α -amy具有1、11和27。表面等离子体共振成像(SPRI)测量结果证实,在所研究的化合物中,Neolignan 27对这两种酶具有更大的亲和力,从而证实了动力学和荧光猝灭所获得的结果。所有这些结果表明,这些基于Obovatol的Neolignan类似物构成了追求新型降血糖药物的有希望的候选人。
内容数量/容量储存温度蛋白酶 250µl -20°C 蛋白酶缓冲液 5ml RT 裂解缓冲液 20ml RT 沉淀缓冲液 15ml RT 洗涤缓冲液 2×50ml RT 溶剂缓冲液 2×1250µl RT 描述易于使用的 DNP TM 试剂盒用于从人或动物来源中分离双链 DNA。该过程需要 35-55 分钟,不需要在过程中进行苯酚提取或换管。DNA 分离基于细胞裂解和随后的选择性 DNA 沉淀。最后,用洗涤缓冲液洗涤和脱盐不溶性 DNA。通过这种方法获得的 DNA 可用于所有分子生物学程序(PCR、限制性消化、克隆、Southern 印迹、DNA 测序等)。
1. 巴斯夫公司 2. 普莱克斯 3. 亨斯迈先进材料 4. ENSTOR(海湾天然气存储) 5. 奥林公司 6. 泰特莱尔 7. 普莱克斯 8. 美国胺类公司 9. 阿科玛 10. 诺力昂 11. 兰精纤维公司 12. FMC 公司 13. AMVAC 化学公司 14. Vertex 能源公司 15. Matheson Tri-gas 公司 16. Southern Ionics 公司 17. Mobile Rosin Oil 公司 18. Occidental 公司 19. 霍尼韦尔 UOP 公司 20. 凯米拉公司 21. 三菱多晶硅公司 22. 普莱克斯 23. 赢创公司 24. INEOS 苯酚公司 25. 巴斯夫公司 26. W&T Offshore 公司 27. Harcros 化学公司 28. Millard Maritime 公司 29. Core Industries 公司 30. APM Terminals 公司
