图3。水溶液中珠与DNA比对碎片恢复的影响。 为了确定不同的珠与DNA比对DNA片段尺寸选择的影响,将DNA尺寸梯子稀释至总体积为50 µL,并与各种体积的QIASEQ珠子从25 µL(0.5倍)到75 µL(1.5x)孵育。 在室温下DNA结合5分钟后,将管子放在磁性台上,再将溶液清除为止。 接下来,将上清液丢弃,并用200 µl 80%乙醇洗涤两次珠子。 在最终的乙醇洗涤后,除去上清液并将磁珠完全干燥。 将沉淀在6 µL缓冲液EB中洗脱。 在Agilent生物分析仪高灵敏度芯片上分析了等分试样(1 µL)以及未覆盖的尺寸梯子(参考阶梯)。 (a)片段定量。 (b)片段分布的百分比与参考相比。水溶液中珠与DNA比对碎片恢复的影响。为了确定不同的珠与DNA比对DNA片段尺寸选择的影响,将DNA尺寸梯子稀释至总体积为50 µL,并与各种体积的QIASEQ珠子从25 µL(0.5倍)到75 µL(1.5x)孵育。在室温下DNA结合5分钟后,将管子放在磁性台上,再将溶液清除为止。接下来,将上清液丢弃,并用200 µl 80%乙醇洗涤两次珠子。在最终的乙醇洗涤后,除去上清液并将磁珠完全干燥。将沉淀在6 µL缓冲液EB中洗脱。在Agilent生物分析仪高灵敏度芯片上分析了等分试样(1 µL)以及未覆盖的尺寸梯子(参考阶梯)。(a)片段定量。(b)片段分布的百分比与参考相比。
简介 文库制备是新一代测序 (NGS) 应用的关键要求,也是测序工作流程中最昂贵的部分之一。这不仅是一个耗时的步骤,而且还可能由于操作错误导致样本丢失或输出文库 DNA 质量下降。为了减少这些问题,简化的 QIAseq FX DNA 文库协议经过优化,可在酶促碎裂后直接进行接头连接,而无需中间清理步骤。此外,简单的协议(仅包含三个步骤)可确保在 Hamilton NGS STARlet 上顺利完成高优先级样本和低通量样本数量的文库制备自动化(图 1)。
Abbreviations ..................................................................................................................................................... 107
请参阅表1,以确定片段输入DNA所需的时间到所需的大小。如果输入DNA小于10 ng,请根据协议添加FX增强子,并将列出的反应时间一半用于10 ng输入DNA。例如,要产生一个从1 ng输入的片段分布,以约300 bp的含量为中心,请孵育FX反应,包括FX增强剂10分钟。制作新鲜的80%乙醇。冰上解冻试剂。一旦融化试剂,通过快速涡旋彻底混合缓冲液以避免任何局部浓度。使用前在使用前简要旋转涡旋试剂。程序热循环器。为了提高速度和便利性,可以预先编程并预先保存协议的所有孵化步骤。使用前,将QIASEQ珠平衡至室温(15–25°C)20-30分钟。涡流,然后在使用前旋转融化的适配器板。
QIAseq Targeted DNA Pro Panel 可简化 Sample to Insight® 的 DNA 靶向新一代测序 (NGS)。靶向富集技术增强了 DNA NGS,使用户能够对特定感兴趣区域 (ROI)(而不是整个基因组)进行测序,从而有效提高测序深度和样本通量,同时最大限度地降低成本。QIAseq Targeted DNA Pro Panel 利用高度优化的反应化学,将独特的分子指数 (UMI) 整合到单个基因或 ROI 特定的基于引物的靶向富集过程中,从而克服偏差/伪影。通过在连接和靶向富集步骤后用酶净化代替珠子净化,QIAseq Targeted DNA Pro Panel 可实现更高效、快速、一致且自动化友好的工作流程。
AIIC - 澳大利亚工业化学品名录;ASTM - 美国材料测试协会;bw - 体重;CERCLA - 综合环境反应、赔偿和责任法;CMR - 致癌物、诱变剂或生殖毒物;DIN - 德国标准化协会标准;DOT - 运输部;DSL - 国内物质清单(加拿大);ECx - 与 x% 反应相关的浓度;EHS - 极其危险物质;ELx - 与 x% 反应相关的负载率;EmS - 紧急时间表;ENCS - 现有和新化学物质(日本);ErCx - 与 x% 增长率反应相关的浓度;ERG - 紧急响应指南;GHS - 全球协调制度;GLP - 良好实验室规范;HMIS - 危险材料识别系统;IARC - 国际癌症研究机构;IATA - 国际航空运输协会; IBC - 《国际散装运输危险化学品船舶建造与设备规则》;IC50 - 半数抑菌浓度;ICAO - 国际民用航空组织;IECSC - 中国现有化学物质名录;IMDG - 国际海上危险货物运输规则;IMO - 国际海事组织;ISHL - 日本工业安全与健康法;ISO - 国际标准化组织;KECI - 韩国现有化学品名录;LC50 - 半数试验人群致死浓度;LD50 - 半数试验人群致死剂量(半数致死量);MARPOL - 国际防止船舶造成污染公约;MSHA - 矿山安全与健康管理局;nos - 否则除外
商标:Qiagen®,样本到Insight®,Dneasy®(Qiagen Group)。注册名称,商标等。在本文档中使用的,即使没有明确标记,法律也不被认为不受保护。
•没有公众发表的陈述和t at tat ant and tat and t ante:2023年3月24日,星期五,东部时间凌晨9:00:Eisenhower Execuceight Offection Building,Washington,Washington,Washington,Washington,Washington,Washington,DC,实际上是通过Zoom for Compaimment O Pening Wong召集了会议的命令。联合主席塔汉(Tahan)介绍了自己,并提供了国家量子倡议咨询委员会(NQIAC)的背景,该委员会根据国会在《国家量子倡议》(NQI)法案中指示为总统咨询委员会。NQIAC负责提出改进NQI的建议,该NQI于五年前推出。Tahan分享了会议议程的细节,并引入了联席主席Moler。联合主席莫勒感谢NQIAC成员,他于2022年12月首次开会,他们迄今为止的辛勤工作。她承认并感谢过去几个月与NQIAC小组委员会会面的个人,以回答有关NQI活动的问题,包括来自联邦机构,DOE国家实验室和其他人的个人。她还感谢国家量子协调办公室(NQCO)的工作人员为协调NQIAC活动所做的不懈努力。联合主席然后将地板翻转为NQIAC科学和基础设施小组委员会的草稿和建议的介绍。cience and I nfrstructure s UbCommittee f指示和r commentions小组委员会联合主席梅森(Mason)和奥利弗(Oliver)介绍了小组委员会过程的详细信息。1 Moler开放了地板,以进行完整的委员会评论,反馈和讨论。ye同意,基本工程很重要,应与NQI中的科学融合。小组委员会每周开会,以考虑NQI的科学和基础设施维度,包括审查与NQI相关的文档并与量子信息科学(QIS)研究中心(中心)和联邦机构的专家互动。联合主席介绍了小组委员会对中心,NQI,合作和合作伙伴关系,行政负担,基础设施和测试台的初步草案和建议,正如其幻灯片甲板所捕获的那样。梅森(Mason)指出,该小组委员会专注于科学和基础设施,并同意在最终报告中不会错过NQIAC的跨切割领域。Schoelkopf补充说,他的理解是,这些中心是在新研究领域进行新合作的催化剂,而不是更多。Clarke介绍了建立综合系统的主题,这表明几乎没有工作正在进行中,从行业中节省了一些工作,并且该领域的联邦政府可能会有机会。Oliver指出,小组委员会的建议是,鉴于集成所需的许多工程尚待开发,因此基本工程是NQI的额外重点。克拉克同意