三重四极杆质谱仪是生物分析 LC-MS/MS 的黄金标准。SCIEX 7500 系统通过关键硬件功能提供增强的正极和负极灵敏度,从而最大限度地提高离子的生成、捕获和传输。快速极性切换(5 毫秒)和高达 6 个数量级的线性动态范围 (LDR) 使 SCIEX 7500 系统成为生物分析的首选三重四极杆质谱仪。高分辨率质谱仪 (HRMS)(例如四极杆飞行时间 (QTOF) 仪器)由于其更高的选择性、更高的质量分辨率和 TOF MS/MS 数据分析的灵活性,越来越多地被用于定量生物分析。从历史上看,QTOF 平台的定量性能受到占空比问题的限制(传统 QTOF 系统的典型占空比 < 30%)。ZenoTOF 7600 系统具有 Zeno 阱,可将占空比提高到 ≥90%。采样效率的提高对于需要高灵敏度的定量工作流程非常有利,并有助于维持
监管组织,例如环境保护署(EPA),欧盟(EU),食品和农业组织(FAO)和世界卫生组织(WHO),已确定了最大残留水平(MRLS),以为所有农产品制定食品或动物饲料的所有农产品的共同评估计划。一般默认的MRL为10 µg/kg的MRL适用于未提及农药的地方。欧盟Sante 11312/2021 V2指南已应用于使用LC-MS/MS QTOF的不同类型的食品基团对一组农药的定量分析,并采用优化的片段离子方法来帮助增强敏感性和选择性。2。材料和方法
摘要:背景:类风湿关节炎(RA)是一种常见的自身免疫性疾病。鸡屎藤(Lour.)Merr 是中国海南省一种常见的民间偏方,用于祛除与 RA 相关的风湿。方法:利用网络药理学提取鸡屎藤中的活性成分。利用活性成分的潜在靶点确定激活途径,并在 RA 成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)中验证鸡屎藤提取物的体外作用。结果:我们利用超高效液相色谱(UHPLC)-四极杆飞行时间(QTOF)-质谱(MS)鉴定出 27 种活性成分。在具有高连接性的主要靶基因中,IL-1β、PI3K、TNF 和 JAK2 已知在 RA 发展中起关键作用。鉴定出鸡屎藤提取物中的活性化合物与 Janus 激酶 JAK 2 之间存在高亲和力相互作用,后者是 JAK 信号转导和转录激活因子 (STAT) 信号通路的关键成分。在 HFLS-RA 细胞中,鸡屎藤提取物处理降低了 IL-6 、IL-1β 和 IL-17 的 mRNA 水平。鸡屎藤提取物处理还显著抑制了 JAK 2 和 STAT3 的磷酸化,从而调节细胞增殖。结论:基于这些结果,我们确认鸡屎藤具有作为治疗和预防食品的潜力,并通过调节和抑制 JAK-STAT 通路激活来控制 RA 中的炎症反应。
化学物质和样品:目标分析物列表包括105种药物和3种替代物质内部标准。单个纯标准标准以制备甲醇中的库存溶液,从中校准标准(5-1000 ng/l)在milliq水中制备以进行半定量。的进水废水样品作为24小时复合材料。收集后,将1 L等分试样的复合废水转移到冷藏玻璃瓶中,并存储在-20°C下直至分析。样品制备:将100 mL废水样品以4000 rpm离心5分钟,并通过0.22 µm滤波器进行真空过滤。将30 ml等分试样的过滤废水施加了位替型内部标准,并使用Oasis HLB SPE墨盒提取(200 mg,6 cm 3,Waters,Waters,Milford,MA)。将每个墨盒用5 ml甲醇和5 ml的Milliq水预先加载,然后再加载样品,然后用真空干燥并用10 mL甲醇洗脱。蒸发干燥后,将残留物用50 µL甲醇重构进行LC-MS/MS分析。尖刺的Milliq水,以半定量检测限制(LOD)和提取回收率进行半定量评估。色谱法:使用现象Kinetex C18柱(100 x 2.1 mm,1.7 µm,p/n:00d-4475-an)在Sciex eotlc AC系统上进行LC分离。使用0.5 mL/min的流速,使用注射体积为5 µL,柱温度为45°C。所使用的LC条件如表1所示。表2显示了用于质谱仪的方法参数。质谱法:使用X500R QTOF系统以正面和负电喷雾电离模式进行分析。Swath DIA方法由16个可变窗户组成,覆盖M/Z 130–520的质量范围。