9/03/24 Alberts 的第 6 章 – 第 1 部分:DNA 到 RNA • RNA 转录 • RNA 加工 • 一些相关的 CMB 技术 9/05/24 第 7 章 - 基因表达的控制 • 转录因子 • 激活因子和抑制因子 • RNAi + 文章讨论
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•DNA/RNA SHIELD™试剂是一种在任何生物样品中稳定核酸的裂解溶液。•消除冷链。确保在环境温度下样品传输/存储期间的DNA/RNA稳定性。•灭活感染剂(病毒,细菌,真菌和寄生虫)。•简单的样品处理。DNA/ RNA可以直接分离而无需取消样品沉淀或试剂去除(与大多数DNA和RNA纯化试剂盒/高通量工作流程兼容)。
目前的单细胞 RNA 测序 (RNA-seq) 方法仅提供有关基因表达动态的有限信息。我们在此介绍 RNA 时间戳,这是一种通过利用 RNA 编辑推断 RNA-seq 数据中单个 RNA 年龄的方法。为了引入时间戳,我们用一个报告基序标记 RNA,该基序由多个 MS2 结合位点组成,这些位点会募集与 MS2 衣壳蛋白融合的腺苷脱氨酶 ADAR2。ADAR2 与标记 RNA 结合会导致 A-to-I 编辑随时间累积,从而可以以小时级精度推断 RNA 的年龄。通过结合由同一启动子驱动的多个带时间戳的 RNA 的观察结果,我们可以确定启动子何时处于活跃状态。我们证明该系统可以推断多个过去转录事件的存在和时间。最后,我们应用该方法根据过去转录活动的时间来对单个细胞进行聚类。RNA 时间戳将允许将时间信息纳入 RNA-seq 工作流程。
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结构化的RNA位于许多中心生物学过程的核心,从基因表达到催化。RNA结构预测由于缺乏与有机体表型相关的高质量参考数据而无法为RNA功能提供的,因此无法进行预测。我们提出了石榴石(GTDB获得了带有环境温度的RNA),这是一个固定在基因组分类数据库(GTDB)的RNA结构和功能分析的新数据库。石榴石将RNA序列与GTDB参考生物的实验和预测的最佳生长温度联系起来。使用石榴石,我们开发了序列和结构感知的RNA生成模型,重叠的三重态Tokeni-Zation为GPT样模型提供了最佳的编码。在石榴石和这些RNA生成模型中利用高嗜热RNA,我们确定了核糖体RNA中的突变,这些突变赋予了赋予大肠杆菌核糖体的热稳定性。此处介绍的GTDB衍生的数据和深度学习模型为理解RNA序列,结构和功能之间的连接提供了基础。