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World File Search SystemRNF8
MDC1将佩里诺的招募介导为DNA Double ...
泛素化与DNA双链断裂的识别和修复至关重要。衔接蛋白MDC1介导关键DNA损伤反应E3泛素连接酶RNF8的募集到断裂位点。它是通过涉及RNF8 FHA结构域的磷酸化依赖性方式直接与RNF8相互作用的，从而在休息位点启动了靶向的染色质Ubiq-脉络性。在这里，我们报告MDC1还直接与另外两个E3泛素连接酶，佩里诺1和2结合，这些连接酶最近与DNA损伤响应有关。通过生化，生物物理和X射线晶体学方法的结合，我们揭示了MDC1-Pellino复合物的分子细节。此外，我们表明，在哺乳动物细胞中，MDC1通过两种蛋白质之间的直接磷酸化相互作用介导了佩里诺募集到DNA双链断裂的位点。总的来说，我们的发现为控制基因组稳定性维持的泛素化途径提供了新的分子见解。
一个模块化的DNA组件作为miRNA抑制剂
图3。miRNA储物柜的miRNA抑制作用的验证。（a）示意图表示miR-214对癌细胞EMT过程的影响。两个miRNA储物柜LC-1和LC-2有望通过阻止miR-214对EMT促进蛋白的RNF8的抑制作用来促进EMT。（b）IP-PCR分析确定miRNA储物储物在A549细胞中与靶microRNA的结合能力。启动设计的示意图表示，Hago2代表了表达质粒的标志标记的人AGO2，输入表示总DNA的等分试样。用于免疫沉淀的抗体在泳道上方指示。（c）RT-QPCR结果证明了用miR-214储物柜LC-C（作为对照）/LC-1/LC-1/LC-2或miR-214 Antagomir（AN-214）/Antagomir对照（ANANTAGOMIR对照）转染的A549细胞中miR-214的丰度。（d）用miR-214储物柜LC-C/LC-1/LC-2或Antagomir AN-214/AN-C转染的A549细胞中RNF8表达水平的蛋白质印迹。 （e）用miR-214储物柜LC-C/LC-1/LC-2或Antagomir AN-214/AN-C转染的A549细胞中迁移的Transwell分析。 （F）CCK8分析表明用miR-214储物柜LC-C/LC-1/LC-2转染的A549细胞的增殖。使用2-ΔΔCT方法计算了相对基因表达，并在每组内针对U6 snRNA的基因初始归一化。对照组（LC-C或AN-C）中每个基因的表达水平