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新英格兰生物实验室分析证书
NEB 部件编号 组件描述 批号 单个 QC 结果 T3062-1 Monarch® 蛋白质分离溶液 10265475 通过 T3061-1 Monarch® HMW gDNA 组织裂解缓冲液 10265472 通过 T3056-1 Monarch® gDNA 洗脱缓冲液 II 10265465 通过 T3018-2 Monarch® RNase A 10265371 通过 T3015-1 Monarch® gDNA 洗涤缓冲液 10265355 通过 T3005-1 Monarch® DNA 捕获珠 (100) 10265326 通过 T3004-1 Monarch® 珠子固定器 10265323 通过 T3003-1 Monarch® 2 ml 试管 (50) 10264542 通过 T3002-1 Monarch® 研杵(50) 10264539 合格 T3001-1 Monarch® 研杵管 (50) 10152756 合格 T2118-1 Monarch® 旋转收集管 10245009 合格 P8200SVIAL 蛋白酶 K，分子生物学级 10262750 合格
钛®DNA扩增套件分析证书
描述Titanium Taq是一种混合物，该混合物由缺乏5ʹ外核酸酶的TAQ聚合酶和Taqstart®抗体（一种单克隆抗体，在环境温度下抑制钛Taq。taqstart抗体提供自动热启动PCR。还包括了优化的缓冲液混合物（最终浓度为3.5 mm mgcl 2）和DNTP的纯化混合物（每种2.5 mm）。无RNase GC熔化试剂（5M）提高了PCR反应的特异性和产量，尤其是在使用具有高GC含量或复杂二级结构的模板时。该套件包含足够的试剂，可用于每个100μl的钛反应。钛DNA扩增试剂盒设计为与Affymetrix DNA映射产物一起使用（见表1）。
所以，您想对…… - 基因组技术核心
我们将对样品进行质量控制测试。对于基于DNA的文库（例如，整个基因组测序和甲基序列文库），我们不会在片段分析仪上运行样品，因为这些样品先前已被证明可以减少片段分析仪的分辨率（我们非常依赖于准确性）。研究人员应在琼脂糖凝胶上运行这些样品，以确保DNA质量良好并且没有明显的RNA。GTC没有带宽来执行此操作的带宽，并且必须由研究人员完成。提交项目信息表格时，请提供琼脂糖凝胶的图片，显示DNA的状况。许多DNA隔离方案包括使用RNase来摆脱该组件。质量更好的DNA会导致质量更好的DNA库。
DNA依赖性腺病毒基因A ...
摘要我们已经开发了一种无细胞的系统，用于研究哺乳动物细胞中mRNA的合成。该系统由透析和浓缩的全细胞提取物组成，从HeLa细胞，小分子和转录所需的辅助因子和外源添加DNA组成。RNA聚合酶II的准确介绍完全取决于添加含有启动子的真核DNA。在最佳DNA和提取浓度下，易于检测到来自腺病毒血清型2后期启动子的转录起始，并且可以使用超过4000个核苷酸的特定转录本。在体外合成的RNA包含与体内transkipt相同的5'限制RNase T1 Undeclepleotide。RNA合成还可以在早期和中间腺病毒启动子位点准确地启动。
Allex®基因组DNA试剂盒（VER 1.1）。 ...
将1.5 mL样品转移到1.5 mL微输出管中，并以13,000 rpm离心3分钟。丢弃上清液。如果单元格的量不够，请重复步骤1。加入300 µL缓冲液CL（未提供），并通过涡旋充分混合。在90°C下孵育15分钟。短暂旋转以去除盖子内部的任何滴剂。在室温下孵育2分钟。加入20 µL蛋白酶K溶液，并简要涡旋混合。在60°C下孵育10分钟，然后短暂旋转以去除盖子内部的任何滴剂。将20 µL蛋白酶K溶液分配到1 st（7th）。将10 µL的RNase A至3 rd（9 th）处分。将多达200 µL的液体样品转移到1 st（7 th）。
修改的协议Wizard®基因组DNA纯化套件...
修改的方案向导®基因组DNA纯化试剂盒的基因组纯化试剂盒通过离心在10ml颗粒2ml中通过离心在13,000 rpm 1以13,000 rpm 1恢复5分钟，在540 µl EDTA中重悬于540 µl的EDTA中，在50 mm，PH 87 µL，pH 30 µl，在10 mg lysozeme中，lysozym/c在10 mL在13,000 rpm丢弃的13,000 rpm处离心3分钟，将沉淀物恢复为600 µl的“核酸溶液”（来自KIT），并在80°C下混合热量5分钟（允许下一步冷却至下一步）加入3 µL RNase（从KIT中）添加3 µL RNase（从KIT中）在37°C下添加200 µL，并加入200 µL（oft of kit）（oft of of kit），并加入200 µL（oft of of of kit）（oft of of Kit）。 ice for 5 min Centrifuge for 3 min at 13,000 rpm TRANSFER supernatant to a 1.5 mL tube Add 600 µL isopropanol at ambient temperature Mix by inverting the tube Centrifuge for 3 min at 13,000 rpm DISCARD the supernatant 2 Add 600 µL of 70% ethanol at ambient temperature Centrifuge for 3 min at 13,000 rpm 3 DISCARD ethanol Dry pellet at 37°C在50-100 µL的水或洗脱缓冲液中重悬于gDNA（套件）：如果需要更多的DNA，则每个培养物多个管子以上一个管。这些可以在较小的体积中洗脱，并在洗脱步骤中合并。根据细菌菌株以达到所需的DNA量，提取1至4个颗粒可能是必需的。2 DNA颗粒可能并不总是可见。乙醇洗涤通常会显示出更长的3个离心机，如果白色颗粒保持松动，以促进收集干净的上清液。QC
使用核转染技术利用 RNP 对人类 iPS 细胞进行 CRISPR 编辑
使用 RNA 和 RNP • 建议戴上手套并使用无核酸酶的试管和试剂，以避免 RNase 污染。 • 始终保持无菌技术，并使用无菌过滤移液器吸头。 • 所有 Synthego 和 Nucleofector™ 试剂均应根据制造商的建议储存。 • 合成的 sgRNA 应溶解在 TE 缓冲液中，并使用无核酸酶的水稀释至工作浓度。请参阅 Synthego 快速入门指南，了解溶解和储存合成 sgRNA 的最佳实践。 • RNP 可直接在 Nucleofector™ 溶液中形成。 • RNP 复合物在室温下可稳定保存长达 1 小时（可在 4°C 下保存长达一周，或在 -20°C 下保存长达 1 个月）。请注意，在 4°C 下储存的 RNP 长时间后可能会受到微生物生长的污染。
新型PDE4B4营地特异性磷酸二酯酶同工型的分子克隆和亚细胞分布
我们具有编码PDE4B4的孤立cDNA，这是一种新的营地磷酸二酯酶（PDE4），具有新的特性。PDE4B4的氨基酸序列表明它是由PDE4B基因编码的，但它与先前隔离的PDE4B1，PDE4B2和PDE4B3同工型不同，它通过存在17个氨基酸的新N端区域而存在。PDE4B4包含上游保守区域1（UCR1）和UCR2调节单元，它们是“长” PDE4同工型的特征。RNase保护表明，PDE4B4 mRNA优先在肝脏，骨骼肌和大脑的各个区域中表达，这与其他已知的PDE4B长形式，PDE4B1和PDE4B3的组织分布模式不同。在变性条件下，PDE4B4 cDNA在COS7细胞中的表达产生了85 kDa的蛋白质。重组，COS7细胞表达的PDE4B4的亚细胞分级表明该蛋白质位于
大肠杆菌的
先前的工作归因于降低的脂多糖水平和脂质双层的暴露归因于降低的脂多糖水平。在此处介绍的Enva渗透性表型的详细表征中，Enval突变被证明可以赋予周质酶，-lactamase和RNaseI。在三种不同的遗传背景中观察到泄漏，包括原始的Enkal菌株及其母体。相反，未观察到细胞质酶i8-乳糖苷酶的可检测到可检测的泄漏。测试了Enkal菌株对先前未报告的一系列抗生素的敏感性，并确定了多种抗生素的亲脂性（分区系数）。根据对大型亲水性抗生素和溶菌酶的敏感性的观察结果，提议ENK突变体的渗透性表型的一部分是由于短暂的破裂和EDTA敏感性外膜的重新密封。在这方面，Enva渗透性表型属于大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的一般渗透性/渗漏突变体。
Primeway Genomic II DNA提取试剂盒
1。使用砂浆和杵用液氮将粉末磨粉样品磨成细粉。有关样本中断的详细信息，请参阅第5页。2。将多达25毫克的组织粉转移到新的1.5 ml微量离心管中。注意：对于具有较高细胞数量（例如肝脏或脾脏）的组织样品，将样品输入降低至10 mg。 3。加入200 µL GL1缓冲液和20 µL蛋白酶K溶液。涡流混合。4。将样品在60°C孵育3小时/过夜。偶尔将管子倒转。5。在14,000 x g处离心2分钟，到颗粒不溶性碎片。6。将上清液转移到新的1.5 mL微输出管中。7。加入200 µL GL2缓冲液。涡流混合。8。添加4 µL RNase A溶液。涡旋在室温下混合并孵育5分钟。