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表达 Cas9 的鸡和猪
Denise Bartsch 1 †、Hicham Sid 1 †、Beate Rieblinger 2 †、Romina Hellmich 1、Antonina 3 Schlickenrieder 1、Kamila Lengyel 1、Krzysztof Flisikowski 2、Tatiana Flisikowska 2、Nina Simm 2、4 Alessandro Grodziecki 2、Carolin Perleberg 2、Christian Kupatt 3、Eckhard Wolf 4、Barbara Kessler 4、5 Lutz Kettler 5、Harald Luksch 5、Ibrahim T. Hagag 6、Daniel Wise 7、Jim Kaufman 7,8、Benedikt B. 6 Kaufer 6*、Angelika Schnieke 2* 和 Benjamin Schusser 1 * 7
基于CRISPR的猪功能基因组学和核酸检测研究进展
靶向核酸酶等高精度基因组编辑工具的发展加速了人类基础医学、动物科学、动物育种以及疾病诊断等领域的进步（Doudna and Charpentier，2014；Kurtz 等，2021；Rieblinger 等，2021；Xie 等，2021）。尤其是被称为 CRISPR 技术的基因组编辑系统自首次报道以来发展迅速（Jinek 等，2012），成为最热门的技术之一。CRISPR/Cas9 技术可精准识别靶序列并实现高效的 DNA 切割，从而完成全基因组范围的基因敲除/敲入（Cong 等，2013；Koike-Yusa 等，2014）。但由于编辑过程中会发生双链断裂（DSB），该技术往往会引入大量不理想的InDel（插入和缺失）突变（Zhao et al.，2019）。随后，人们开发了碱基编辑器（BE），可以利用胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶实现单核苷酸的精准编辑，而不会诱导DSB（Gaudelli et al.，2017；Rees and Liu，2018）。近来，引物编辑器（PE）进一步扩展了基于CRISPR的编辑工具包，可实现所有12种可能的碱基转换和短DNA片段的插入和缺失。该技术融合逆转录酶和Cas9蛋白，以引物编辑向导RNA（pegRNA）为修复模板，实现精准的基因编辑（Anzalone et al.，2019）。在这篇小型评论中，我们总结并讨论了 CRISPR 技术在猪中的最新应用。