教授(S)没有什么永远不会莫莱尔:名人分子生理学; DNA及其复制品; gênic的RNA和表达;合成和运输运输。聚合酶的Cadeia Tech(PCR);真正节奏的PCR;约束,DNA/RNA重组;干扰RNA(RNAi);蛋白质印迹;免疫尿素;花细胞仪。分子技术应用于动物产品中的鱼类。圣经:Ausubl,F。M。;布伦特(Brent) Comm,R。E。; Moure,D。D。; Seidman,J.G。;史密斯,J。 a。; Struhl,K。分子生物学的当前方案。 1s。 约翰·威利(John Wiley)和声音。 零件:2003。 Brown,T.A。 基因克隆和DNA分析。 4a。 牛津,布莱克韦尔科学,2001年。 Gibson,G。;缪斯(S.V.) 基因组学院的第一个。 Sunderland,Associty System,Inc.,2002。 lewin,B。 创世纪VIII。 纽约,国际版,2004年。 LOD,H。分子生物学。 4a。 纽约,H。Freemanand Co.,2000年。 Mir,L。Genômic。 第一版。 圣保罗,雅典娜,2005年。 Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。 3a ed。 寒冷的春天。 Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集圣经:Ausubl,F。M。;布伦特(Brent) Comm,R。E。; Moure,D。D。; Seidman,J.G。;史密斯,J。a。; Struhl,K。分子生物学的当前方案。1s。约翰·威利(John Wiley)和声音。零件:2003。Brown,T.A。 基因克隆和DNA分析。 4a。 牛津,布莱克韦尔科学,2001年。 Gibson,G。;缪斯(S.V.) 基因组学院的第一个。 Sunderland,Associty System,Inc.,2002。 lewin,B。 创世纪VIII。 纽约,国际版,2004年。 LOD,H。分子生物学。 4a。 纽约,H。Freemanand Co.,2000年。 Mir,L。Genômic。 第一版。 圣保罗,雅典娜,2005年。 Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。 3a ed。 寒冷的春天。 Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集Brown,T.A。基因克隆和DNA分析。4a。牛津,布莱克韦尔科学,2001年。Gibson,G。;缪斯(S.V.) 基因组学院的第一个。 Sunderland,Associty System,Inc.,2002。 lewin,B。 创世纪VIII。 纽约,国际版,2004年。 LOD,H。分子生物学。 4a。 纽约,H。Freemanand Co.,2000年。 Mir,L。Genômic。 第一版。 圣保罗,雅典娜,2005年。 Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。 3a ed。 寒冷的春天。 Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集Gibson,G。;缪斯(S.V.)基因组学院的第一个。Sunderland,Associty System,Inc.,2002。lewin,B。创世纪VIII。纽约,国际版,2004年。LOD,H。分子生物学。 4a。 纽约,H。Freemanand Co.,2000年。 Mir,L。Genômic。 第一版。 圣保罗,雅典娜,2005年。 Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。 3a ed。 寒冷的春天。 Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集LOD,H。分子生物学。4a。纽约,H。Freemanand Co.,2000年。Mir,L。Genômic。 第一版。 圣保罗,雅典娜,2005年。 Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。 3a ed。 寒冷的春天。 Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集Mir,L。Genômic。第一版。 圣保罗,雅典娜,2005年。 Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。 3a ed。 寒冷的春天。 Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集第一版。圣保罗,雅典娜,2005年。Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。 3a ed。 寒冷的春天。 Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集Sambrook,J。;罗素,D.W。分子克隆 - 手动实验室。3a ed。寒冷的春天。Periance:实验新闻保留,细胞重编程,生物学发展,自然,科学集
1。primrose&twyman。基因组分析和基因组学原理。Blackwell(2003)。 2。 Hartl&Jones。 遗传学:基因和基因组的原理和分析。 Jones&Bartlett(1998)。 3。 Sambrook等。 分子克隆I,II,III。 CSHL(2001)。 4。 掠夺者。 分子生物技术。 Panima(2001)。 5。 Clark&Switzer。 实验生物化学。 Freeman(2000)6。 Sudbery。 人分子遗传学。 Prentice-Hall(2002)。 7。 威尔逊。 临床遗传学 - 短期课程,Wiley(2000)。 8。 pasternak。 分子人遗传学介绍。 Fritzgerald(2000)。 9。 Biostatistics Analysis(第四版),Jerrold H. Zarr,Pearson Education Inc.,德里。 10。 G. W. Snecdecor和W. G. Cochran的统计方法(第八版),WilleyBlackwell(2003)。2。Hartl&Jones。遗传学:基因和基因组的原理和分析。Jones&Bartlett(1998)。 3。 Sambrook等。 分子克隆I,II,III。 CSHL(2001)。 4。 掠夺者。 分子生物技术。 Panima(2001)。 5。 Clark&Switzer。 实验生物化学。 Freeman(2000)6。 Sudbery。 人分子遗传学。 Prentice-Hall(2002)。 7。 威尔逊。 临床遗传学 - 短期课程,Wiley(2000)。 8。 pasternak。 分子人遗传学介绍。 Fritzgerald(2000)。 9。 Biostatistics Analysis(第四版),Jerrold H. Zarr,Pearson Education Inc.,德里。 10。 G. W. Snecdecor和W. G. Cochran的统计方法(第八版),WilleyJones&Bartlett(1998)。3。Sambrook等。 分子克隆I,II,III。 CSHL(2001)。 4。 掠夺者。 分子生物技术。 Panima(2001)。 5。 Clark&Switzer。 实验生物化学。 Freeman(2000)6。 Sudbery。 人分子遗传学。 Prentice-Hall(2002)。 7。 威尔逊。 临床遗传学 - 短期课程,Wiley(2000)。 8。 pasternak。 分子人遗传学介绍。 Fritzgerald(2000)。 9。 Biostatistics Analysis(第四版),Jerrold H. Zarr,Pearson Education Inc.,德里。 10。 G. W. Snecdecor和W. G. Cochran的统计方法(第八版),WilleySambrook等。分子克隆I,II,III。CSHL(2001)。 4。 掠夺者。 分子生物技术。 Panima(2001)。 5。 Clark&Switzer。 实验生物化学。 Freeman(2000)6。 Sudbery。 人分子遗传学。 Prentice-Hall(2002)。 7。 威尔逊。 临床遗传学 - 短期课程,Wiley(2000)。 8。 pasternak。 分子人遗传学介绍。 Fritzgerald(2000)。 9。 Biostatistics Analysis(第四版),Jerrold H. Zarr,Pearson Education Inc.,德里。 10。 G. W. Snecdecor和W. G. Cochran的统计方法(第八版),WilleyCSHL(2001)。4。掠夺者。分子生物技术。Panima(2001)。 5。 Clark&Switzer。 实验生物化学。 Freeman(2000)6。 Sudbery。 人分子遗传学。 Prentice-Hall(2002)。 7。 威尔逊。 临床遗传学 - 短期课程,Wiley(2000)。 8。 pasternak。 分子人遗传学介绍。 Fritzgerald(2000)。 9。 Biostatistics Analysis(第四版),Jerrold H. Zarr,Pearson Education Inc.,德里。 10。 G. W. Snecdecor和W. G. Cochran的统计方法(第八版),WilleyPanima(2001)。5。Clark&Switzer。实验生物化学。Freeman(2000)6。Sudbery。人分子遗传学。Prentice-Hall(2002)。7。威尔逊。临床遗传学 - 短期课程,Wiley(2000)。8。pasternak。分子人遗传学介绍。Fritzgerald(2000)。 9。 Biostatistics Analysis(第四版),Jerrold H. Zarr,Pearson Education Inc.,德里。 10。 G. W. Snecdecor和W. G. Cochran的统计方法(第八版),WilleyFritzgerald(2000)。9。Biostatistics Analysis(第四版),Jerrold H. Zarr,Pearson Education Inc.,德里。10。G. W. Snecdecor和W. G. Cochran的统计方法(第八版),Willey
细菌菌株,培养基和质粒。乳酸乳酸乳酸亚生。乳酸IPLA 972(Martı!Nez等,1995)和L。 乳酸Mg 1614(Str R,Rif R)(Gasson,1983)分别用作生产者和乳酸菌素-972敏感的菌株。 培养物在补充了0±5%乳糖的M17培养基(Biokar)中种植(l。 乳酸IPLA 972)或0±5%葡萄糖(l。 乳酸Mg 1614)。 孵育在32°C。大肠杆菌HB101(Bolivar&Backman,1979)和Xl-1蓝色在2- ty(Sambrook等,1989)在37°C上生长。 在克隆实验中使用了vectors pacyc184(Chang&Cohen,1978)和M13MP18和19(Yanisch-Perron等,1985)。 在含有10%(v} V)甘油的生长培养基中,将菌株保持在®80°C下,并在每个实验之前两次繁殖。 适当时,使用了氯霉素(50 µ g ml--“),四环素(50 µ g ml--”),spectinymycin(50 µ g ml----“)或链霉素(500 µ g g ml---”)。Nez等,1995)和L。乳酸Mg 1614(Str R,Rif R)(Gasson,1983)分别用作生产者和乳酸菌素-972敏感的菌株。培养物在补充了0±5%乳糖的M17培养基(Biokar)中种植(l。乳酸IPLA 972)或0±5%葡萄糖(l。乳酸Mg 1614)。孵育在32°C。大肠杆菌HB101(Bolivar&Backman,1979)和Xl-1蓝色在2- ty(Sambrook等,1989)在37°C上生长。在克隆实验中使用了vectors pacyc184(Chang&Cohen,1978)和M13MP18和19(Yanisch-Perron等,1985)。在含有10%(v} V)甘油的生长培养基中,将菌株保持在®80°C下,并在每个实验之前两次繁殖。适当时,使用了氯霉素(50 µ g ml--“),四环素(50 µ g ml--”),spectinymycin(50 µ g ml----“)或链霉素(500 µ g g ml---”)。
大肠杆菌DNA污染单元已测试了N/A N/A 30 30 30 30规范> 99%5,555 U/mg功能功能性功能性NO转化率<10拷贝<10份蛋白质:从表达重组T4 DNA聚合酶基因的大肠杆菌菌株中纯化。单位定义:1个单位定义为将在37°C下30分钟内将10 nmol的DNTP纳入酸性材料的酶量(1)。分子量:103,609 Daltons质量控制分析:使用2倍连续稀释方法测量单位活动。在1倍反应缓冲液中制成酶的稀释液,并将其添加到含有小腿胸腺DNA,1x蓝色缓冲液,3 H-DTTP和100 µM DNTP的50 µL反应中。在37°C下孵育10分钟,浸入冰上,并使用Sambrook和Russell的方法进行分析(Molecular Cloning,V3,2001,pp。A8.25-A8.26)。蛋白浓度(OD 280)由OD 280吸光度确定。
蛋白质的来源:一种重组大肠杆菌菌株,携带来自嗜热有机体Thermus aquaticus YT-1的TAQ DNA聚合酶基因。单位定义:1个单位定义为将在75°C的30分钟内将10 nmol的DNTP纳入酸 - 不溶性材料的酶。分子量:93,910 Daltons质量控制分析:使用2倍连续稀释方法测量单位活动。在1X反应缓冲液中制成酶的稀释液,并将其添加到含有小腿胸腺DNA,25 mM TAPS(pH 9.3),50 mM KCl,2.0mm MGCL2,1 mM DTT,3H-DTTP和100 µm DNTP的50 µL反应中。 在75°C下孵育10分钟,浸入冰上,并使用Sambrook和Russell的方法进行分析(Molecular Cloning,V3,2001,pp。 A8.25-A8.26)。 蛋白浓度(OD 280)由OD 280吸光度确定。 通过浓缩和稀释酶溶液的SDS-PAGE评估物理纯度,然后进行银色染色检测。 通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。 单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定,在37°C下孵育4小时4小时。 双链外切核酸酶在50 µL反应中确定,该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。 双链核酸内切酶在50 µL反应中确定,该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。在1X反应缓冲液中制成酶的稀释液,并将其添加到含有小腿胸腺DNA,25 mM TAPS(pH 9.3),50 mM KCl,2.0mm MGCL2,1 mM DTT,3H-DTTP和100 µm DNTP的50 µL反应中。在75°C下孵育10分钟,浸入冰上,并使用Sambrook和Russell的方法进行分析(Molecular Cloning,V3,2001,pp。A8.25-A8.26)。蛋白浓度(OD 280)由OD 280吸光度确定。物理纯度,然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定,在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定,该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定,该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。
大肠杆菌DNA污染单位测试了N/A N/A 200 200 200 200 200个规范> 99%27,400 U/mg <5.0%释放<1.0%<1.0%释放no conversion <10拷贝蛋白质的来源:大肠杆菌菌株,一种带有来自calf thymus的calf thymus的大肠杆菌菌株,该菌株具有N-Calf thymus,该基因具有N-Calf Thymus,该基因具有N-末端式纤维质质质质质量。单位定义:1个单位定义为在37°C下1小时内将1 nmol DTTPS转换为酸不溶性材料所需的聚合酶量。分子量:82.6 KDA质量控制分析:使用2倍连续稀释方法测量单位活动。在1X反应缓冲液中制成酶的稀释液,并将其添加到50 µL含有寡做DT 20 MER DNA,1X反应缓冲液,0.25 mM COCL 2 3 H-DTTP和100 µM DTTP的反应中。在37°C下孵育10分钟,浸入冰上,并使用Sambrook和Russell的方法进行分析(3)。蛋白浓度(OD 280)由OD 280吸光度确定。物理纯度,然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定,在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定,该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定,该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。大肠杆菌16S rDNA的污染是使用5 µL重复的酶溶液的重复样品,并在Taqman QPCR测定中筛选,以使用与16S RRNA locus相应的寡核苷酸引物,以存在污染的大肠杆菌基因组DNA。
大肠杆菌DNA污染单元测试了N/A N/A 100 100 100规格> 99%13,333 U/mg功能性功能性NO conversion <10份蛋白质来源:重组大肠杆菌菌株,携带毒液T7基因5和E. coli trxa基因。单位定义:1个单位定义为将10 nmol的总DNTPS转换为酸不溶性材料所需的聚合酶量,在37°C下30分钟内。分子量:92.1 KDA质量控制分析:使用2倍连续稀释方法测量单位活动。稀释酶,并将其添加到含有小腿胸腺DNA,1x T7 DNA聚合酶单位表征缓冲液(20 mM Tris-HCl,100 mm KCl,6 mM MGCL,6 mM MGCL 2,6mmmmmgcl 2,0.1 mm EDTA,5 mmβ-MMβ-MERCAPTOETOETHANANOL),3 H-DTT的反应中,3 H-DTT,在37°C下孵育10分钟,浸入冰上,并使用Sambrook和Russell的方法进行分析(6)。蛋白浓度(OD 280)由OD 280吸光度确定。物理纯度,然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定,在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定,该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定,该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。大肠杆菌16S rDNA的污染是使用5 µL r菌酸溶液的样品变性的样品,并在Taqman QPCR分析中筛选,以使用与16S rRNA locus相应的寡核苷酸引物,使用污染的大肠杆菌Genomic DNA。
xi Zhu A,B,Yoojean Kim B,Orren Ravid-,Sicg-Mino-Mano,Amit Lazarov A.教练,Inga K. Lebois,Li,以色列Liberzon BB,Guang Ming Lu,Vincent A. Magnotta BD,Steven M. Nelson,Richard W.J.转到Wee Bt,Steven J.A.去Werff Bt,Theo G.M.van Erp,Sanne J.H.van Erp,Sanne J.H.成立,Jack B,M。Leary,Olatunji BK,Miranda Olff,BM,BN的Ivan Rector,Kerry Ressler AY。 Pavel Riha BN,美丽的Ross,Isabelle M. Rosso,AZ,Lauren E Alan N. Simmons BQ,Raluca M. Sophia I. Thomas,Nic J.A.罗伯特·R.J.M.Xin Wang Q,Carissa Weis W,The Winteritz AR,Hong Xie,Zhu BA,Melanie Wall A,B,Yeval Neria, *, *, *