混合前,彻底搅拌或机械摇动基料(A 部分)至少 10 分钟,以确保所有固体完全分散。将一体积的催化剂成分(B 部分)添加到三体积的基料(A 部分)中。请勿使用其他颜色的催化剂成分(B 部分)。通过手动搅拌、油漆搅拌器或机械混合进行混合,以确保基料/催化剂混合物均匀。请勿摇动或机械混合混合材料超过 10 分钟。混合材料不需要稀释剂。聚氨酯可用的稀释剂有 MIL-T-81772B I 型* (IS-213)、VOC 豁免减量剂 (IS-256) 和低 HAPS 稀释剂 (IS-260)。不要添加稀释剂来尝试补偿超出其有效适用期的涂层。注意:在混合前,将所有材料放置在车间或机库中,环境温度在 13° 至 35°C(55° 至 95°F)之间,对油漆进行 24 小时的调节非常重要。混合前,油漆成分的最低温度应为 13°C (55°F)。
细菌细胞培养YEEI VKM B-3302细菌菌株dipacoccus paracoccus paracoccus yeei vkm b-3302是由作者的研究小组分离出来的,这些污泥是由从市政废水处理厂衍生而来的活性污泥中的。paracoccus yeei细菌是强氧。革兰氏阴性球菌具有小细胞直径(约0.5-0.9μm),可以在产生的催化剂中产生细菌支撑的高钯纳米粒子含量。它们在纯文化中表现出高增长率,易于传播和维持2。这些微生物的另一个值得注意的特征是它们对金属盐3、4的抗性,它允许在具有活细胞载体的系统中形成纳米颗粒。在luria – bertani(lb)的养分培养基上培养了,这些培养基补充了10 g/l肽,10 g/l NaCl和5 g/l酵母提取物。在750 cm 3的Erlenmeyer烧瓶中栽培的细菌细胞在28°C的温度下,养分培养基体积为200 cm 3,同时以180 rpm的振荡器充气。48小时后,通过以8000 rpm的速度在试管中以8000 rpm的速度离心细菌培养。将细胞生物量干燥,然后在+4°C的测试管中储存。
EB培养基是基于Stapel培养基(31,32)(表1)。要生成EB,使用细胞释放缓冲液(1/1000 EDTA/PBS)将IPSC细胞145酶脱离,并通过使用EB介质(表1)吸管以147天0-1(表2)来收集细胞146的团块146。通过70 µm大小的滤网将收集的细胞团过滤到50ml 148无菌管中。通过10ML血清学移液移除细胞团,并将其轻轻添加到超低149附件培养皿中(Sigma Aldrich,CAT#CLS3261),在37°C下保持在37°C,将5%CO2 150放置在轨道振荡器上(Scientififix,CAT#NBT-101SRC)旋转32rpm。每100mm 151盘,将2至3×10 6个细胞用于EB形成。媒体更改策略,包括152个分化因子的细节,如表2所述。为了在EB组153步骤中提高细胞活力,将0.2 nm岩石抑制剂Y-27632(Stemcell Technologies,#72307)添加到媒体154天0-1中,并从那时起停产。从第7天开始,IPSC衍生的造血细胞开始从胚胎体作为悬浮细胞出现。156
电子邮件:paredes.g@aluno.ifsp.edu.br摘要钻探浪费的适当管理,尤其是页岩振动器的残留固体中的流体含量,仍然是石油和天然气运营中的一项关键挑战。 依靠实验室分析的传统方法引入了重大延迟,从而阻碍了实时过程优化。 本研究提出了一个基于人工神经网络(ANN)的虚拟传感器,以实时预测振动筛选残留固体中的流体含量。 在不同的操作参数下,从工业页岩振动器系统中收集了实验数据,包括运动速度,进料流量和屏幕倾斜度。 使用TensorFlow开发了多层感知器模型,该模型具有输入归一化,辍学正则化和随机梯度下降的优化训练。 ANN体系结构达到的平均绝对误差为0.03,损失为0.002,证明了强大的收敛而不拟合。 通过t检验进行的统计验证证实,预测值和实验值之间没有显着差异(测试数据的p值为0.67,整个数据集为0.85)。 模型在稳定的操作条件下的准确性可以连续监视而无需其他硬件,从而解决了行业对延迟实验室的依赖电子邮件:paredes.g@aluno.ifsp.edu.br摘要钻探浪费的适当管理,尤其是页岩振动器的残留固体中的流体含量,仍然是石油和天然气运营中的一项关键挑战。依靠实验室分析的传统方法引入了重大延迟,从而阻碍了实时过程优化。本研究提出了一个基于人工神经网络(ANN)的虚拟传感器,以实时预测振动筛选残留固体中的流体含量。在不同的操作参数下,从工业页岩振动器系统中收集了实验数据,包括运动速度,进料流量和屏幕倾斜度。使用TensorFlow开发了多层感知器模型,该模型具有输入归一化,辍学正则化和随机梯度下降的优化训练。ANN体系结构达到的平均绝对误差为0.03,损失为0.002,证明了强大的收敛而不拟合。通过t检验进行的统计验证证实,预测值和实验值之间没有显着差异(测试数据的p值为0.67,整个数据集为0.85)。模型在稳定的操作条件下的准确性可以连续监视而无需其他硬件,从而解决了行业对延迟实验室的依赖
Imad Alsyouf,沙迦大学,阿联酋Emanuele Borgonovo,意大利Bocconi商学院,意大利Jens vankeirsbilck,Ku Leuven,系计算机科学,比利时Sobhan Sarkar,印度印度管理学院,印度印度管理研究所Barosan,荷兰埃因霍温大学,荷兰Podofillini Luca,Paul Scherrer Institute,瑞士Lujie Shi,NormandieUniversté/Insa Rouen Normandie,France Sudipta Das,计算机科学系,印度RKMVERI,印度RKMVERI基础架构,德国Xintian Liu,上海工程科学大学,中国亚历山大·福雷,西门子行业,荷兰荷兰B.V. Modena和Reggio Emilia,意大利的Ali Cheaitou,Sharjah大学,阿拉伯联合酋长国Sanja Lazarova-Molnar,Karlsruhe技术学院,德国魏Wang,香港城市大学,香港,
传染病的严重性仍然是畜牧业经济可行性的主要制约因素。针对多种传染病的联合疫苗可降低疫苗接种的成本、时间和劳动量。在本研究中,使用多杀性巴氏杆菌 P 52 菌株和梭菌 49 菌株制备了针对出血性败血症和黑季病的正式疫苗。将这两种疫苗的不同比例混合以配制各种联合疫苗组,随后对其进行无菌性、安全性和效力标准化。在所有组合中,我们发现包含 1 ml HS 酪蛋白蔗糖酵母提取物琼脂洗涤疫苗和 4 ml BQ 巯基乙酸盐肉汤和培养疫苗(摇动)的组合最有效。在对单个疫苗进行的效力测试中,这种联合疫苗分别对兔子和豚鼠产生了 100% 的 HS 病保护率和 75% 的 BQ 病保护率。研究还表明,酪蛋白蔗糖酵母琼脂和液体硫代乙醇酸盐肉汤是培养巴氏杆菌和肖沃氏梭菌的更好培养基。与静态培养相比,在振荡器上培养时,肖沃氏梭菌的生长速度更快。
1。简短离心管,包含siRNA,以确保在管子的底部收集siRNA颗粒。2。使用表1。a中列出的所需量的所需的最终浓度重悬于无RNase 1X siRNA缓冲液中(请参见下面的注释)。例如:对于10 nmol的siRNA和20 µm库存浓度,加入500 µl 1x siRNA缓冲液。3。移液器上下溶液上下3-5次,避免引入气泡并牢固密封管(或多孔板)。4。在室温下将溶液放在轨道搅拌机/振动器上30分钟。5。简短离心管,包含siRNA,以确保将溶液收集在管子底部。6。使用260 nm处的紫外分光光度法验证siRNA的浓度。对于siRNA,1 µm = 13.3 ng/µl。对于microRNA模拟,1 µm = 14.1 ng/µl和microRNA发夹抑制剂,1 µm = 18.5 ng/µl请参阅FAQ,有关其他信息。7。RNA可以立即使用,或将等分等分为较小的体积以限制冻融周期的数量。重悬于的siRNA应将其存储在-20°C中,以手动除霜或非周期冰柜。在4°C下存储最多可容纳6周。
Woodruff @ Red Rock Rd 9 NBS 生物滞留区 12265 5 0 5 3 3 5 4 5 3 5 3 3 4 Pixley Hill Rd 10 NBS 生物滞留区 980 3 2 5 3 1 3 4 5 5 5 3 3 9 State Line Rd @ Smith Rd 11 NBS 人工湿地 67430 3 4 5 5 3 1 1 5 1 5 4 5 10 Red Rock Rd 12 NBS 生物滞留区 1725 5 2 5 3 1 3 4 1 3 1 3 3 15 Austerlitz Rd 13 NBS 生物滞留区 1720 5 1 5 3 3 5 4 1 3 1 3 3 8 South St 14 NBS 生物滞留区17775 5 0 5 3 3 5 1 1 5 1 3 3 14 South St 15 NBS 溪流修复 17885 5 0 5 5 1 5 2 5 1 5 5 5 5 Great Barrington Rd @ Card Pond 16 NBS 生物滞留 5860 0 0 5 3 1 3 3 3 3 3 3 3 19 Great Barrington Rd @ Card Pond 17 NBS 透水路面 15230 0 0 0 3 3 3 3 3 3 3 3 1 28 West Center Rd 18 NBS 溪流修复 49450 3 5 5 5 3 5 1 5 1 5 5 5 1 Oak Street 和 Main St 交叉口 GI1 GI 生物滞留 150 0 0 5 3 3 3 5 5 3 5 3 3 7 沿 Main St 向下经过橡树街前往市中心 GI2 GI 渗透、沟渠、洼地、多孔带 431 0 0 3 3 3 3 5 5 3 5 3 3 11 沿 102 街向下经过车库街前的砾石停车场 GI3 GI 多孔 724 3 0 0 3 1 1 4 1 5 1 5 5 20 Harris St 与 Moscow Rd 绿地交叉口 GI4 GI 生物滞留 475 5 0 5 3 1 1 5 1 5 1 3 3 17 Hotel St. 与 102 街交叉口 GI5 GI 生物滞留 116 5 0 5 3 1 1 5 5 3 5 3 3 12 Lenox 与 Swamp Rd 交叉口 GI6 GI 生物滞留 260 5 0 5 3 3 3 5 5 5 5 3 3 3 市中心经过 Hotel St GI7 GI 透水摊位 545 5 0 0 3 1 0 4 5 3 5 5 5 16 Old Great Barrington 与 102 号公路交叉口 GI8 GI 生物滞留、雨水花园、迷你森林 287 5 0 5 3 3 5 5 5 3 5 3 3 2 Old Great Barrington 与 102 号公路交叉口 GI9 GI 生物滞留、树坑、渗透。沿路缘开沟 224 5 0 5 3 3 3 5 5 3 5 3 3 6 停车场沿 Main St 向下经过 Oak 前往市中心 GI10 GI 透水铺路、渗透。 644 0 3 0 3 3 3 4 1 3 1 5 5 13 Shaker Mill Pond Dam (MA00732) D5 D 增加存储/降低的潜力 N/A 0 3 0 0 0 0 3 0 1 5 1 1 34 Card Pond Dam (MA01047) D6 D 增加存储/降低的潜力 N/A 0 1 0 0 0 0 3 0 1 5 1 1 35 Kingsmont Dam (MA02223) D12 D 大坝拆除候选 N/A 3 3 3 3 3 0 1 1 1 1 5 5 22 Alford Brook Club Dam (MA02224) D13 D 大坝拆除候选 N/A 0 3 3 3 3 0 1 1 1 1 5 5 26 Rose Lower Dam (MA02631) D14 D 大坝拆除候选 N/A 0 2 3 3 3 0 1 1 1 1 5 5 29 Shaker Mill Pond Dam (MA00732) D15 D 大坝拆除候选 N/A 0 5 3 3 3 0 1 3 1 5 5 5 18 无名大坝,West Stockbridge,位于 46 Main Street 后面 D16 D 大坝拆除候选 N/A 0 1 3 3 3 0 1 1 1 1 5 5 31 无名大坝,West Stockbridge,毗邻 30 Great Barrington Road D17 D 大坝拆除候选 N/A 0 1 3 3 3 0 1 1 1 1 5 5 31 无名大坝,West Stockbridge,毗邻 245 Great Barrington Road D18 D 拆除大坝候选 N/A 0 4 3 3 3 0 1 1 1 1 5 5 23 West Alford Road(毗邻 15 West Alford Road 车道) CWS2 C 高风险涵洞 N/A 5 4 1 1 5 1 1 1 3 5 3 3 21 West Alford Road(距 9 West Alford Road 私人车道以东约 50 英尺) CWS4 C 高风险涵洞 N/A 5 0 1 1 5 1 1 1 3 5 3 3 24 Wilson Road(位于 Alford Brook Club 和电线杆 7-84 之间) CWS5 C 高风险涵洞 N/A 5 2 1 1 5 1 1 1 1 5 3 3 24 Quarry Road(进入 Quarry Road 200 英尺,私人,距大门约 100 英尺) CWS1 C 高风险涵洞 N/A 0 5 1 1 5 1 1 1 1 5 3 3 30 Baker Street(毗邻 22 Baker Street) CWS3 C 高风险涵洞 N/A 0 0 1 1 5 1 1 1 1 5 3 3 33 Smith Road(3 Smith Road 以南) CWS6 C 高风险涵洞 N/A 5 1 1 1 5 1 1 1 1 5 3 3 27
●将细胞和质粒混合到预燃烧的(ICE)1毫米比色杯以进行电穿孔(例如),非常小心地避免气泡(如果需要时,可以避免使用气泡,以避免气泡,移液器<25 ul)。将比色杯保持在冰上。●电塑料(例如Biorad Gene脉冲器,2 kV,200 𝛀,25 UF)。点击比色杯以消除气泡,并先用吸收纸从比色杯中擦拭冰/水。时间常数应在4.0至4.3 ms范围内。短时常数带有火花,表明出现问题。如果发生这种情况,请重复,减少质粒的量并注意气泡。●成功进行电穿孔后,立即添加475 UL恢复介质(例如SOC),转移到1.5 ml管,并在37℃下摇动。●串行稀释电穿孔,板块在氨苄青霉素板上的转化为0.1%,以评估转化效率。●您可以将电穿孔的细胞保持在4C,直到确认高效率,也可以用氨苄青霉素在LB中过夜(通常在250毫升250 mL烧瓶中,37C,37C,轨道振荡器200 rpm)。●确认高效率后(您应该在0.1%板中看到> 1000个菌落,对应于1m> 1m的转化剂),制作甘油库存以备将来使用,并通过mini或MIDI Prep纯化质粒或MIDI PREP,适用于下游克隆
带有安全门禁电话系统的公共前门可通往维护良好的公共入口走廊,走廊上有通往所有三间公寓的门和一个大型公共自行车储藏室。这所完美无瑕的住宅的私人前门通向入口走廊,走廊设有通往卧室和浴室的楼梯,门通向厨房/早餐室。这间现代化的厨房配备了一系列落地和壁挂式“Benchmarx”橄榄绿色振动筛式单元、40 毫米实心橡木台面以及包括洗碗机和冰箱/冰柜在内的一体化电器。这个时尚的空间有足够的空间容纳一张小早餐桌。大型双开门通向大小适中、朝西的客厅/餐厅,客厅/餐厅铺设了与厨房相同的狮子橡木复合地板。这间房间朝西,配有大窗户和双开门,可通往私人阳光露台,明亮通风,有空间容纳沙发和餐桌。地下一层是主双人卧室,面积宽敞,为 13 英尺 05 英寸 x 11 英尺 05 英寸,还配有嵌入式衣柜。还有一间办公室/书房,可以用作“卧室”。宽敞的现代浴室配有地暖,配有全套四件套白色卫浴用品,包括步入式淋浴间、浴缸、马桶和洗手盆。浴室旁边是杂物间,可以放置叠放式洗衣机和滚筒式烘干机。