原生质体再生困难是CRISPR/Cas9基因编辑技术在油菜(Brassica napus L.)研究和育种中有效应用的一大障碍。本研究首次描述了一种快速有效的油菜品种Kumily原生质体分离、再生和转染的方法,及其在基因编辑中的应用。从3-4周龄叶片中分离的原生质体在MI和MII液体培养基中培养以形成细胞壁和细胞分裂,然后在芽诱导培养基和芽再生培养基中继代培养以产生芽。研究了不同基础培养基、植物生长调节剂的类型和组合以及每种培养基上原生质体培养时间与原生质体再生的关系。结果表明,MI培养基中较高浓度的NAA(0.5 mg l −1)和2,4-D(0.5 mg l −1)对原生质体形成细胞壁和维持细胞分裂至关重要,而此后应降低生长素的浓度以形成愈伤组织和诱导芽。对于芽再生,需要相对高浓度的细胞分裂素,在所有测试组合中,2.2 mg l −1 TDZ与生长素0.5 mg l −1 NAA的组合可获得最佳效果,芽再生率高达45%。我们的结果还表明,原生质体在不同培养基上的培养时间至关重要,因为较长的培养时间会显著降低芽再生频率。此外,我们优化了油菜的转染方案。利用该优化方案,我们成功编辑了控制油菜中硫代葡萄糖苷运输的BnGTR基因,且突变频率很高。
原生质体再生困难是CRISPR/Cas9基因编辑技术在油菜(Brassica napus L.)研究和育种中有效应用的一大障碍。本研究首次描述了一种快速有效的油菜品种Kumily原生质体分离、再生和转染的方法,及其在基因编辑中的应用。从3-4周龄叶片中分离的原生质体在MI和MII液体培养基中培养以形成细胞壁和细胞分裂,然后在芽诱导培养基和芽再生培养基中继代培养以产生芽。研究了不同基础培养基、植物生长调节剂的类型和组合以及每种培养基上原生质体培养时间与原生质体再生的关系。结果表明,MI培养基中较高浓度的NAA(0.5 mg l −1)和2,4-D(0.5 mg l −1)对原生质体形成细胞壁和维持细胞分裂至关重要,而此后应降低生长素的浓度以形成愈伤组织和诱导芽。对于芽再生,需要相对高浓度的细胞分裂素,在所有测试组合中,2.2 mg l −1 TDZ与生长素0.5 mg l −1 NAA的组合可获得最佳效果,芽再生率高达45%。我们的结果还表明,原生质体在不同培养基上的培养时间至关重要,因为较长的培养时间会显著降低芽再生频率。此外,我们优化了油菜的转染方案。利用该优化方案,我们成功编辑了控制油菜中硫代葡萄糖苷运输的BnGTR基因,且突变频率很高。
由于估计每次感染的芽的概率,在追赶时未检测到一个受感染的野鸡的概率,因此“每芽”水平的不确定性很高。这假定被感染的鸟类没有在追赶时出现临床体征,因此会被抓住。这也取决于捕获每芽的鸟类数量以及野生鸟类种群中感染的预期流行率。例如,每次拍摄捕获的野鸡的平均数量为206只鸟。当地的环境污染将取决于栖息地和感染野生鸟类聚集的距离,但在某些情况下可能很重要。在这种情况下,如果1%的野鸡被感染,那么每芽将有两只受感染的鸟类,其中一个或两个都可能仍在孵化期内,因此没有显示迹象。即使两只受感染的鸟类显示出迹象,它们可能会在羊群中错过,那里可能会因其他原因而导致死鸟。一旦陷入困境,感染就会通过羊群传播,导致更多的病鸟,因此被发现和报道是被感染的场所(IP)。
查尔斯康奈尔 查尔斯康奈尔在诺维奇长大,1966 年毕业于诺维奇自由学院。他的双向飞碟射击运动始于 1964 年,当时他 16 岁,成为诺维奇鱼类和野生动物俱乐部的正式成员,偶尔与年纪较大的男子一起射击。1969 年,他被征召入伍,加入美国海军,驻扎在 USS Waddell DDG-24 上,母港在日本横须贺,他在那里参加越南枪支支援线。基地有一个大型双向飞碟射击场,所以当他们在港口的午休时间时,他继续射击。查尔斯最终被邀请参加一场大型 NSSA(全国)射击比赛,并在 21 岁时成为第一位获得同级别高分的“舰队”水手。从海军退役后,他于 1971 年 1 月进入康涅狄格大学,并加入了飞碟射击俱乐部。凭借在日本、冲绳和菲律宾与海军队一起射击的经验;随后,他作为队长在康涅狄格大学射击队效力四年。他两次参加世界大学生射击比赛。他最好的一次胜利是在耶鲁大学邀请赛上,来自新英格兰、纽约和宾夕法尼亚各地的大学生队参加了比赛。他在那里以满分 100/100 赢得了飞碟射击锦标赛。1981 年,他被邀请参加东部康涅狄格州飞碟射击联盟,这是该国现存最古老的飞碟射击联盟。家庭和工作使他一直很忙,直到 20 世纪 80 年代中期他才可以定期射击。该联盟有 350-450 名参与者,分为 6-8 个分区,每队有 5-8 名射手,排名前五名射手的平均水平。查尔斯在 1999 年的平均成绩位居联盟第二,2003 年位居联盟第四。此外,他在 1992 年和 2010 年赢得了 ECSL 秋季射击比赛,并在 2008-2022 年开始在该州最大的场地:鳍毛羽毛俱乐部举办 ECSL 春季射击比赛,参赛人数多达 110 名。他获得了 2013 年康涅狄格州射击 12 号亚军称号 (NSSA) 和众多一区、所有新英格兰和纽约级冠军。通常有 6-8 名全美射手参加这些大型射击比赛,所有胜利都必须是 100/100,然后以 100 为标准进行射击。查尔斯的最后一个奖项是在 2021-2022 ECSL 冬季联赛结束时获得的,当时他获得了 70 岁以上射手的“老年人高平均成绩”奖。 “总而言之,我参加了 50 多年的飞碟射击比赛,就像高尔夫球手一样,我会继续比赛,直到我不能再挥动枪为止......也许我下次会尝试打高尔夫球!”
摘要:木薯淀粉(C)胶卷,木薯淀粉/壳聚糖(C/CS)膜(C/CS)薄膜和木薯淀粉/壳聚糖/壳聚糖/柠檬草精油(C/CS/LEO)通过土壤埋葬20天的掩埋,使用重量损失,傅里叶传输式semmircred semrors semmose(FTIR)(FTIR)(FTIR)(FTIR)(FTIR)(ftir)。FTIR分析表明,官能团的去除与淀粉膜减肥相对应。从SEM进行的观察结果表明,电影在退化过程中的外观发生了变化。使用板数方法确定20天埋葬后的土壤微生物的数量。在第20天,对照样本显示的微生物计数明显少于所有处理。通过测量芽的长度,根新鲜的重量和射击新鲜重量,研究了淀粉膜对水疗(ipomoea aquatica)生长21天的影响。发现用C/CS和C/CS/LEO膜在土壤中种植的水经过21天,显示出相似的芽长,芽新鲜重量和根重量。然而,与在C膜和对照的土壤中生长的水经短相比,它明显更高(p <0.05)。该研究得出的结论是,释放的壳聚糖会影响水流的生长。
摘要:木薯淀粉(C)胶卷,木薯淀粉/壳聚糖(C/CS)膜(C/CS)薄膜和木薯淀粉/壳聚糖/壳聚糖/柠檬草精油(C/CS/LEO)通过土壤埋葬20天的掩埋,使用重量损失,傅里叶传输式semmircred semrors semmose(FTIR)(FTIR)(FTIR)(FTIR)(FTIR)(ftir)。FTIR分析表明,官能团的去除与淀粉膜减肥相对应。从SEM进行的观察结果表明,电影在退化过程中的外观发生了变化。使用板数方法确定20天埋葬后的土壤微生物的数量。在第20天,对照样本显示的微生物计数明显少于所有处理。通过测量芽的长度,根新鲜的重量和射击新鲜重量,研究了淀粉膜对水疗(ipomoea aquatica)生长21天的影响。发现用C/CS和C/CS/LEO膜在土壤中种植的水经过21天,显示出相似的芽长,芽新鲜重量和根重量。然而,与在C膜和对照的土壤中生长的水经短相比,它明显更高(p <0.05)。该研究得出的结论是,释放的壳聚糖会影响水流的生长。