A dynamic subpopulation of CRISPR-Cas overexpressers allows Streptococcus pyogenes to rapidly respond to phage Marie J. Stoltzfus 1 , Rachael E. Workman 1 , Nicholas C. Keith 1 , Joshua W. Modell 1 * 1 Department of Molecular Biology & Genetics, Johns Hopkins University School of Medicine, Baltimore, MD 21205, USA *Correspondence: jmodell1@jhmi.edu摘要许多CRISPR-CAS系统,可为细菌提供适应性免疫,以防止噬菌体,在其本土宿主中受到转录抑制。如何根据需要诱导CRISPR-CAS的表达,例如在噬菌体感染期间,人们对此仍然了解不足。在链球菌为链球菌中,一种非典型的指南RNA TRACR-L指导Cas9自动燃烧自己的启动子。在这里,我们描述了具有破坏Cas9结合并导致CRISPR-CAS过表达的单个突变的细胞的动态亚群。CAS9通过提高TRACR-L目标部位的突变率来积极扩大该人群。过表达者表现出更高的记忆形成率,旧记忆的效力更强,并且相对于野生型细胞具有更大的记忆存储能力,而野生型细胞非常容易受到噬菌体感染的影响。然而,在没有噬菌体的情况下,CRISPR-CAS过表达会降低健身。我们建议CRISPR-CAS过表达者是噬菌体防御中的关键参与者,使细菌种群能够对噬菌体的快速转录反应,而无需任何一个单元格中的短暂变化。引言有效的免疫系统必须迅速识别和破坏外国威胁,同时避免宿主内的类似主题。细菌编码了越来越多的免疫效应子来防御噬菌体(噬菌体)和质粒,但是这些系统如何平衡免疫力和自身免疫仍然是一个悬而未决的问题。CRISPR-CAS系统可为细菌提供针对异物核酸的适应性免疫,已作为转化基因编辑工具,但是在许多细胞类型中,CAS核酸酶的异源过表达是有毒的1-4。在其本地宿主中,CRISPR-CAS系统通常在没有噬菌体或其他压力源的情况下被转录抑制。尽管这种抑制能够减轻自身免疫性,但尚不清楚(i)原生CIRSPR-CAS启动子是否足够强大以在其解除抑制状态下引起自身免疫性以及(ii)如何根据需要暂时诱导CRISPR-CAS表达。在某些细菌和古细菌物种中,CRISPR-CAS表达对噬菌体感染的直接反应增加了5-9。但是,对噬菌体感染的任何反应都是与相对较短的裂解周期的种族,这可能会限制这种反应的效用。另一种策略是在噬菌体到来之前增加CRISPR-CAS的表达。的确,许多CRISPR-CAS阻遏物受环境信号的调节,可能会预测噬菌体感染,包括种群密度,包络压力和营养供应10-13。然而,噬菌体感染可能会或可能不会先于这些信号,我们想知道是否可能存在更可靠的机制来为噬菌体感染制备细胞。CRISPR-CAS免疫包括三个阶段:适应,生物发生和干扰。在适应性链球菌中II-A型系统,30 bp的噬菌体DNA或“间隔者”中被从噬菌体中捕获,并将其掺入CRISPR阵列的5'末端,并将
摘要。由病原体链球菌引起的链球菌病是淡水养殖养殖中的一个严重问题。这项研究旨在使用多草药成分来刺激鱼类免疫系统的改善,以抵抗致病性细菌S. agalactiae的感染。该研究是在FKIP化学实验室,FKP的鱼类孵化场和繁殖实验室以及吉隆坡Syiah Syiah Medicinate的实验室进行的。使用的测试鱼是罗非鱼的长度为7-8 cm。研究方法是使用由5种处理和3种复制组成的完全随机设计进行实验进行的,即A(阴性对照),B(阳性对照),C(添加C. gigantea),D(添加了M. oleivera),E(添加了C. alata L)。使用方差分析对测试结果数据进行分析。与未经浸入提取物中没有浸泡的人相比,在血液参数(白细胞,血红蛋白,血细胞比容)中观察到的血液参数(白细胞,血红蛋白,血细胞比容)中观察到的免疫反应的研究结果表明,免疫反应的增加,血液参数(白细胞,血红蛋白,血细胞比容)和更高的存活率增加。在83.33%的10 ppm叶片叶提取物处理10 ppm时获得了最高的存活率。
摘要:糖尿病是一种代谢性疾病,具有较高的全球健康负担,并在人类中引起高死亡率和发病率。药草和植物为糖尿病治疗的常规疗法提供了有希望的替代方法。罗斯玛丽(fifinalis of -fincinalis L.)是一种传统的药草,用于治疗多种疾病。因此,本研究研究了补充链蛋白酶诱发的糖尿病性Wistar大鼠的饮食的抗糖尿病特性。首先,确定了植物化学物质和2,2-二苯基-1-苯基氢羟基(DPPH)自由基清除活性。链蛋白酶诱导的糖尿病雄性Wistar大鼠分别以3%,6%和12%的饮食为饮食中,饮食中补充了饮食,持续6周。根据标准程序估算了根据标准程序估算食物摄入,体重,大鼠相对器官重量,血糖,脂质蛋白,肌酐,胆红素,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的研究。结果表明,ROP水提取物含有大量的酚类,抗螺旋体和单宁,它们表现出体外DPPH自由基清除活性。基于体内研究,ROP降低了链蛋白酶诱导的糖尿病动物的血糖水平(P <0.05)。我们的发现表明,补充炎症叶粉粉末的饮食具有抗糖尿病的潜力,其健康结果改善,这是我们动物模型中改善的脂质和肝脏促进酶所证明的。在糖尿病大鼠中用ROP补充饮食(p <0.05),降低了Alt,AST,胆红素,肌酐,甘油三酸酯(TG),总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)水平,同时增加高密度脂肪蛋白(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDL)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)(HDLS)。
植物是草药中最著名的候选人之一。正在为针对糖尿病的有效植物进行大量研究。该实验旨在评估以不同浓度为150、250和350 mg/kg体重对糖尿病大鼠血清和体重参数的不同浓度,以不同的浓度进行否浓度的甲醇提取物(Azadirachta Indica:Men)的影响,并将这些结果与标准药物对照组的结果进行比较。男性和对照进行了28天的治疗,在此期间,观察到对肝功能参数和血清葡萄糖水平的影响。估计的参数包括丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸转移酶,血清胆固醇,葡萄糖,尿酸,尿素,甘油三酸酯和肌酐。结果表明,男性的影响是以剂量依赖性的方式。在处理组中,体重增加和葡萄糖水平的降低显着增加(P <0.05)。脂质谱以及肝脏和肾功能相关的血清参数在用男性治疗的组中保持正常,剂量率为350 mg/kg。350 mg/kg浓度结果与标准药物组相当(p> 0.05)。该研究的结果表明,以350 mg/kg的剂量速率施用neEM的甲醇提取物可以有效控制肝损伤和血清参数。考虑到这项研究的发现,可以提出,印em种子的甲醇提取物值得进一步研究作为潜在的抗糖尿病药物。在此过程中的一个重要步骤是确定提取物的特定组成部分,这些组件有助于其有效性。应进行进一步的研究,以确定印em种子的甲醇提取物的最佳治疗剂量。
德克萨斯州健康与安全法规(HSC),第94A.001节要求州卫生服务部(DSHS)制定一项国家计划,以预防和治疗由肺炎链球菌引起的疾病,包括对受肺炎链球菌的不成比例影响的人群群体的策略。这些群体包括65岁或以上的成年人,两岁以下的儿童,吸烟,患有哮喘的人和免疫功能低下的人。根据本节,DSHS至少每五年至少每五年审查并修改肺炎链球菌(州计划)的州计划。
抽象肺炎链球菌(肺炎球菌)是一种人类病原体,负责肺炎,败血症和脑膜炎等多种疾病。胶囊是主要的肺炎球菌毒力因子,由盖帽小多糖(CPS)基因座编码,这是一种重组热点,已导致迄今为止确定的100多种不同的帽多糖类型(血清型)。最近,提出了33倍(也称为10倍)作为推定的新型血清型,但胶囊结构尚未阐明。在这里,我们提供了33倍的深入研究,证明它是一种新的肺炎球菌血清型。在这项研究中,我们在2015年至2022年期间收集了来自健康儿童和肺炎患者(成人和儿童)的12,850名鼻咽拭子(成人和儿童)。我们确定了20个肺炎球菌33x分离株。使用整个基因组测序,我们发现33x CPS基因座是来自肺炎球菌血清群35、10和33的基因的嵌合体以及其他链球菌。通过Quellung反应对33倍肺球运动的血清分型揭示了独特的血清学特征,键入为10b和33b。竞争ELISAS证实,针对33倍的小鼠产生的抗体受到33倍肺炎球菌的抑制,而不是10b或33b。Lastly, the elucidation of the 33X capsule structure revealed that the polysaccharide is distinct from other serotypes, consisting of an O-acetylated hexasaccharide repeat unit of → 5)-β-Gal f -(1 → 3)- β-Glc p -(1 → 5)-β-Gal f 2Ac-(1 → 3)-β-Gal p NAc-(1 → 3)-α-gal p-(1→4)-rib-ol-(5→P→。因此,33倍符合必要的遗传,血清学和生化标准,该标准被指定为一种新的血清型,我们将其命名为33G。
1 墨西哥圣路易斯波多西自治大学医学院免疫学系,圣路易斯波多西 78290,圣路易斯波多西,墨西哥; r.sanchez@ttuhsc.edu (RS-G.); diana.alvarado@uaslp.mx(DLA-H.); rgonzale@uaslp.mx (RG-A.) 2 德克萨斯理工大学健康科学中心埃尔帕索保罗 L. 福斯特医学院分子与转化医学系,美国德克萨斯州埃尔帕索 79905 3 牙科学院牙髓病学研究生课程; ana.amaro@uaslp.mx(AMG-A.); veronica.mendez@uaslp.mx (VM-G.) 4 墨西哥社会保障研究所-IMSS 萨卡特卡斯生物医学研究部,萨卡特卡斯 98000,墨西哥萨卡特卡斯; bruno.rivas@imss.gob.mx 5 墨西哥圣路易斯波多西自治大学牙科学院基础科学实验室,圣路易斯波多西 78290,圣路易斯波多西,墨西哥; apozos@uaslp.mx 6 分子生物医学系,墨西哥城 07360,墨西哥,墨西哥 * 通信地址:marlen.vitales@uaslp.mx † 为了纪念学生 Janeth Araujo Pérez,本文的作者是她硕士论文的一部分。
摘要:微生物技术在改进工业过程方面发挥着至关重要的作用,特别是在生产具有多种应用的化合物方面。在本研究中,我们使用生物信息学方法分析了链霉菌 MGMM6 的基因组结构,并确定了参与各种代谢途径的具有重大生物技术潜力的基因。基因组挖掘显示,MGMM6 由 6,932,303 bp 的线性染色体组成,G+C 含量高达 73.5%,缺乏任何质粒重叠群。在注释的基因中,预测有几个基因编码酶,例如染料过氧化物酶、芳香环开双加氧酶、多铜氧化酶、细胞色素 P450 单加氧酶和芳香环羟基化双加氧酶,这些酶负责生物降解多种内源性和外来污染物。此外,我们还鉴定了与重金属抗性相关的基因,例如砷、镉、汞、铬、碲、锑和铋,这表明 MGMM6 具有用于环境修复目的的潜力。对次生代谢物的分析表明,存在多个生物合成基因簇,这些基因簇负责产生具有强效抗菌和金属螯合活性的化合物。此外,在受控条件下进行的实验室测试表明,MGMM6 可有效抑制植物病原微生物,使废水中的芳香族三苯甲烷染料(尤其是 Blue Brilliant G250)脱色和降解,效果高达 98 ± 0.15%。总体而言,我们的研究结果凸显了 S. albidoflavus MGMM6 的生物技术潜力。
1挪威卑尔根Haukeland大学医院微生物学系; 2挪威卑尔根卑尔根大学临床科学系; 3挪威卑尔根Haukeland大学医院胸部医学系; 4挪威洛伦斯科格阿克胡斯大学医院肺部医学系; 5医学和实验室科学系,挪威奥斯陆奥斯陆大学临床医学研究院学院; 6挪威阿克什斯阿克胡斯大学医院的微生物和感染控制系; 7挪威Stavanger Stavanger大学医院肺部医学系; 8挪威Stavanger Stavanger大学医院微生物学系; 9挪威卑尔根Haraldsplass Deaconess医院医学系; 10挪威特隆德海姆医院圣奥拉夫医院胸科医学系; 11挪威特隆德海姆的Trondheim大学医院圣奥拉夫医院医学微生物学系; 12挪威Førde中央医院医学系; 13挪威FørdeFørde中央医院微生物学系; 14挪威卑尔根Haukeland University Hospital的颌面外科系;和15位卫生科学学院,挪威北极大学,挪威,挪威
抽象背景信息:糖尿病(DM)在新兴国家和发达国家都大大峰值,并且使用营养方法来控制糖尿病控制,最近引起了很多关注。香蕉(Musa spp。)在世界热带地区无处不在。在热带和亚热带气候中发现了野生植物穆萨·阿克米纳塔(Musa acuminata),也称为卡文迪许香蕉。近年来,敏锐的敏锐的健康优势引起了很多关注。植物的每个组成部分都被用于传统医学治疗多种疾病。虽然已经报道了Musa Acuminata各个部分的抗糖尿病潜力,但尚未对CORM进行广泛的研究。目的:考虑到缺乏有关抗糖尿病性抗糖尿病潜能的数据,我们建议使用斑马鱼模型评估相同的数据。材料和方法:腹膜内施用链霉菌素(STZ)在斑马鱼中诱导糖尿病。将鱼类维持在2%的蔗糖溶液中,用于48小时,以诱导糖尿病,然后将其转移到10、20或30 µg/ml的相应的含有CORM提取物的治疗罐中;在第8天,它们都被安乐死并用于生化和组织病理学分析。结果:在10、20和30 µg/ml时,穆萨·阿克米纳塔(Musa acuminata Corm)提取物(MACE)在糖尿病斑马鱼模型中引起了明显的葡萄糖降低作用。这是从酶分析中可以明显看出的。在这一点上,这项研究中鉴定出的MACE的抗糖尿病潜力的精确作用方式无法完全解密。组织病理学分析还揭示了绒毛的生长增长,并且在经过MACE治疗组的肠道中增加了杯状细胞的数量。结论:MACE在预防糖尿病并发症等高胆固醇和高脂血症等糖尿病并发症中的作用支持其主张,即它可以用作辅助药物或替代其他糖尿病药物。需要进行其他研究才能缩小负责这种效果的主动植物成分以及发挥这种作用的机制。