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T7 DNA聚合酶 Qiagen验证报告 b'' T7 DNA连接酶 Qiagen®多路复用PCR加套件 T4基因32蛋白
大肠杆菌DNA污染单元测试了N/A N/A 100 100 100规格> 99％13,333 U/mg功能性功能性NO conversion <10份蛋白质来源：重组大肠杆菌菌株，携带毒液T7基因5和E. coli trxa基因。单位定义：1个单位定义为将10 nmol的总DNTPS转换为酸不溶性材料所需的聚合酶量，在37°C下30分钟内。分子量：92.1 KDA质量控制分析：使用2倍连续稀释方法测量单位活动。稀释酶，并将其添加到含有小腿胸腺DNA，1x T7 DNA聚合酶单位表征缓冲液（20 mM Tris-HCl，100 mm KCl，6 mM MGCL，6 mM MGCL 2，6mmmmmgcl 2，0.1 mm EDTA，5 mmβ-MMβ-MERCAPTOETOETHANANOL），3 H-DTT的反应中，3 H-DTT，在37°C下孵育10分钟，浸入冰上，并使用Sambrook和Russell的方法进行分析（6）。蛋白浓度（OD 280）由OD 280吸光度确定。物理纯度，然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定，在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定，该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定，该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。大肠杆菌16S rDNA的污染是使用5 µL r菌酸溶液的样品变性的样品，并在Taqman QPCR分析中筛选，以使用与16S rRNA locus相应的寡核苷酸引物，使用污染的大肠杆菌Genomic DNA。
T7 DNA连接酶
蛋白质的来源：一种带有克隆的T7 DNA连接酶基因的重组大肠杆菌菌株。单位定义：1个单位定义为在30分钟内在23°C下在30分钟内将100 ng DNA片段的50％结合的T7 DNA连接酶的量。分子量：41.1 kDa质量控制分析：使用2倍连续稀释方法测量单位活动。稀释液，并添加到含有双链DNA片段和1倍快速连接缓冲液的20 µL反应中。在23°C（室温）下孵育30分钟，浸在冰上，并在用溴化乙锭染色的1％琼脂糖凝胶上进行分析。蛋白浓度（OD 280）由OD 280吸光度确定。物理纯度，然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定，在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定，该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定，该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。大肠杆菌16S rDNA的污染是使用5 µL r菌酸溶液的样品变性的样品，并在Taqman QPCR分析中筛选，以使用与16S rRNA locus相应的寡核苷酸引物，使用污染的大肠杆菌Genomic DNA。
三星便携式固态硬盘 T7
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转录援助T7高产量转录套件
描述Thermo Scientific™Transcriptaid™T7高收益转录套件设计用于来自含有T7 RNA聚合酶启动子的DNA模板的高产量在体外转录。该套件含有50 µL反应的试剂。取决于转录长度，每个反应在2小时内从1 µg模板中产生约150 µg RNA（图1），比常规体外转录反应中可实现的10倍。可以扩大反应以产生毫克量的全长RNA。该套件提供了用于转录反应，转录物加载和分析凝胶的所有组件。转录辅助酶混合物含有T7 RNA聚合酶，可方便地用重组Thermo Scientific™Ribolock™RNase抑制剂进行预混合，以确保RNA转录的完整性。dnase I，无RNase，用于有效去除转录反应后模板DNA。包括2x RNA载荷染料溶液为了方便RNA载荷。Thermo Scientific™Riboruler™RNA梯子，高范围，即用凝胶上的RNA尺寸和定量量化的辅助工具。ntps在单个管中提供，以合成非放射性标记的探针或限制的RNA的灵活性。
数据夏滑金属蛋白酶抑制剂3（timp3）抗体
构建编码肠杆菌噬菌体T3（噬菌体T3）SSB蛋白蛋白（1-232AA）的质粒是表达重组型噬菌体T3（噬菌体T3）SSB蛋白蛋白的一般方法的第一步。然后将质粒转化为大肠杆菌细胞。阳性大肠杆菌细胞并培养，诱导蛋白质表达，并裂解细胞。蛋白质与N末端6XHIS-SUMO标签融合。然后通过亲和力纯化纯化所得的重组肠杆菌噬菌体T3（T3）SSB蛋白蛋白，并进行SDS-PAGE分析以验证并评估蛋白质的纯度。其纯度超过90％。
纳米技术可以实现神经调节的新型方式
T7表达系统是确保严格控制和高级诱导表达的常见方法。然而，该系统只能在某些细菌菌株中起作用，其中T7 RNA聚合酶基因位于染色体中。在这项研究中，我们成功地引入了在LACUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因的染色体副本中，以大肠杆菌BW25113。T7表达系统在名为BW25113-T7的突变株中有效工作。我们证明了这种突变菌株可以通过C5途径令人满意地产生5-氨基乙酸。最终研究旨在通过构建T7启动子变体库来增强该突变株中T7表达系统的可控性。这些努力提高了大肠杆菌BW25113-T7，成为未来代谢工程工作的实用主持人。
洞悉交易系统动力学DeutscheBörse的T7®
投机触发。10 GBIT/S访问层开关以“切割”模式和以太网框架储备优先级的第一个字节在竞争性网络路径上的优先级，用于上下一个开关。这激励延迟敏感的交易参与者将技术交易纯粹用于保留开关优先级，从而在T7系统上产生高负载。为了避免T7上不必要的技术交易，已经实施了技术解决方案。
T7 DNA连接酶
图6。使用Qiagen多路复用PCR加套件有效的19-PLEX PCR。使用Qiagen Multiplex PCR Plus套件的标准条件进行了19个目标（99-955 bp）的多重PCR，而无需进一步优化（QIAGEN）或使用供应商A II的各种热启动DNA聚合酶。使用琼脂糖凝胶进行分析。B分析使用Qiaxcel高级系统。Qiagen多路复用PCR加套件可导致所有目标的特定扩增，而无需优化。尽管使用不同的酶浓度进行了长时间的优化，但使用Supper A II的试剂盒的多重PCR也会导致片段缺失，即使使用较高的浓度也是如此。m：gelpilot 100 bp加梯子。
MNYC/BZ/62/M379 表达 Cas9 和 T7 RNA 聚合酶
简介 墨西哥利什曼原虫是一种可感染人类的单细胞真核生物，是引起利什曼病的物种之一。由于其毒性较低（引起皮肤利什曼病而非内脏利什曼病）并且能够在适当的无菌培养中容易分化为无鞭毛体形式，它通常被用作分子细胞生物学的模型利什曼原虫物种。我们之前曾描述过表达 Cas9 和 T7 RNA 聚合酶的转基因墨西哥利什曼原虫 MNYC/BZ/62/M379 的生成，该菌株可进行快速反向遗传修饰 1 。由于这不是参考基因组菌株（参考基因组菌株为 MHOM/GT/2001/U1103） 2 并且可能在实验室培养和/或 Cas9 或 T7 表达的选择压力下积累了突变，因此我们对这种广泛使用的菌株的基因组进行了测序，作为设计反向遗传策略的高质量参考。