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使用Nebridge®金门组件进行蛋白质工程的DNA洗牌
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型，以预测片段的进一步组合，从而导致其他新型颜色。用适配器（TwistBioscience®，South San Francisco，CA）重新排序基因片段，以进行扩增，并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix（NEB＃M0494）在50 µL反应中放大了PCR，并使用Spri®Beads清洁，并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2，将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件（BSAI-HFV2）的组件组件组装在4°C温度模块上，然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后，液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2，在3小时以上（总计576个零件）的过程中，将每个组件的6个零件移动。然后将板密封，并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟，然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上，并在37°C下生长过夜。菌落生长后，将它们从孵化器中取出，并允许在台式上开发颜色过夜，然后在4°C的冰箱中发育。
NAR突破性文章-Lirias
An enzymatic method has been successfully es- tablished enabling the generation of partially base- modified RNA (previously named RZA) constructs, in which all G residues were replaced by isomorphic fluorescent thienoguanosine ( th G) analogs, as well as fully modified RZA featuring th G, 5-bromocytosine, 7- deazaadenine and 5-氯酸。被发现的Extigive RZA的转录效率从使用各种T7 RNA聚合酶变体中受益。此外，可以通过TAQ DNA聚合酶以及其他三个基型型核苷酸将D Th G掺入PCR产物中。值得注意的是，在体外CRISPR- CAS9裂解测定中，获得的RNA产物以及与5-溴细胞的RNA产物一起与天然SGRNA一样有效地发挥作用。n 1-甲基丙啶也被证明是尿苷的忠实非典型的肠道构造，当掺入SGRNA时，可以指导Cas9核酸酶切割。7-二氮嘌呤的CAS9失活表明，在SGRNA和PAM位点，嘌呤的7-氮原子的重要性对于实现了有效的Cas9裂解。与SGRNA-蛋白质和PAM的显着性讨论了这项研究的其他方面 - 蛋白相互作用，这些相互作用并未由Cas9 – Sgrna -DNA复杂晶体结构突出显示。这些发现 -
使用Nebridge®金门组件进行蛋白质工程的DNA洗牌
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型，以预测片段的进一步组合，从而导致其他新型颜色。用适配器（TwistBioscience®，South San Francisco，CA）重新排序基因片段，以进行扩增，并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix（NEB＃M0494）在50 µL反应中放大了PCR，并使用Spri®Beads清洁，并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2，将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件（BSAI-HFV2）的组件组件组装在4°C温度模块上，然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后，液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2，在3小时以上（总计576个零件）的过程中，将每个组件的6个零件移动。然后将板密封，并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟，然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上，并在37°C下生长过夜。菌落生长后，将它们从孵化器中取出，并允许在台式上开发颜色过夜，然后在4°C的冰箱中发育。
Panchagavya作为有机投入对后期生长，产量和经济学的影响
在乔尔哈特的阿萨姆邦农业大学的ICR农场进行了一次实地实验，以评估Panchagavya对2020 - 21年Rabi季节中阿萨姆邦的生长，产量和经济性迟到的菜。The experiment was laid out in Randomised Block Design with three replications and eight treatments like T1: control, T2: RDN through vermicompost (VC), T3: Vedic panchagavya soil application (3%), T4: 1 tonne VC/ha as basal + vedic panchagavya foliar application (3%), T5: enriched panchagavya soil application(3%), T6:富集的Panchagavya叶面应用（3％），T7：吠陀Panchagavya的基础应用（1.5％） +吠陀Panchagavya叶面应用（1.5％），T8：富集的Panchagavya基底应用（1.5％） +富含Panchagavya foliar foriar forpapply（1.5％）。结果表明，发现T4在所有有关生长，产量特征和近来播种的Rapeseed的收益率的处理中都是最好的。在处理T4下记录了生长指标的最高值以及产量指标。这种处理产生了最高的种子产量（6.89 Q/ha）和僵硬的产量（20.48 Q/ha）。同样，油菜菜和最高总收益（卢比55120/ha）。，但是，最大净返回（卢比34020/ha）和b：c比率（1.90）在治疗T5下记录。
化学品安全技术说明书
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型，以预测片段的进一步组合，从而导致其他新型颜色。用适配器（TwistBioscience®，South San Francisco，CA）重新排序基因片段，以进行扩增，并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix（NEB＃M0494）在50 µL反应中放大了PCR，并使用Spri®Beads清洁，并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2，将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件（BSAI-HFV2）的组件组件组装在4°C温度模块上，然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后，液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2，在3小时以上（总计576个零件）的过程中，将每个组件的6个零件移动。然后将板密封，并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟，然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上，并在37°C下生长过夜。菌落生长后，将它们从孵化器中取出，并允许在台式上开发颜色过夜，然后在4°C的冰箱中发育。
家族的重新分类A DNA聚合酶揭示了新型的功能亚家族和独特的结构特征
家族A DNA聚合酶（Polas）形成了参与DNA复制和修复的现有聚合酶的重要且研究的一类。否则，尽管在独立的，专门的作品中表征了多个子家族，但到目前为止，他们的综合性分类却缺少。因此，我们重新审查了所有目前可用的pola semence，将它们的成对相似性转化为欧几里得空间中的位置，将它们分为19个主要簇。中有11个对应于已知的亚家族，但以前没有八个特征。对于每个组，我们都会汇编它们的一般特征，检查其系统发育关系，并在基本序列基序中进行保护分析。大多数亚家族与生命的特定领域有关（包括噬菌体），但一个亚科出现在细菌，古细菌和真核生物中。我们还表明，两个新的小家族含有功能性酶。我们使用alphafold2来生成缺乏实验降低结构的所有群集的高牢固预测模型。我们确定了涉及结构变化，有序的插入和明显的尿嘧啶-DNA糖基酶（UDG）结构域的明显结构掺入的新的保守效果。最后，T7样噬菌体子集的网络和结构分析表明，将3'–5'EXO和POL结构域分裂为两个单独的基因，第一次在Polas中观察到。
重组人尿蛋白载体无用
描述环蛋白最初被鉴定为鼠肿瘤细胞系NIH3T3/克隆T7的条件培养基中的生长抑制因子。它属于包括EGF，TGF-α，肝素结合EGF类似增长因子（HB-EGF），Epigen，Epigen，epiregulin，betacellullulin，neuroRegulin和pyororegulin的EGF家族。它与其他与EGF相关的生长因子的序列占24-50％的氨基酸序列同一性。所有EGF家族成员均被合成为I型膜蛋白前体，它们可以在质膜上进行蛋白水解裂解，以释放成熟的可溶性异构域。epiregulin充当人表皮角质形成细胞中的自分泌生长因子，可以由HB-EGF，Amphiregulin和TGF-α诱导。epiregulin由角质形成细胞和组织驻留巨噬细胞的免疫相关反应中表达，并发挥关键作用。已经表明，上环蛋白缺陷型（EP - / - ）小鼠会出现慢性皮炎。此外，环保蛋白参与骨髓来源的巨噬细胞中促炎细胞因子的产生。此外，环保蛋白诱导人角膜上皮细胞的增殖，其表达可以通过TGF-α，HB-EGF，AR和EGF在这些细胞中诱导。epiregulin在中耳胆道瘤发病机理期间在高乳突发育中起作用，并且在银屑病表皮中过表达。上环蛋白多态性似乎与对TB的不同临床表型的敏感性有关，而环保蛋白则调节结核病的先天免疫反应。
在番茄中应用CRISPR/CAS9介导的基因编辑
crispr-/cas9介导的基因编辑已在包括番茄在内的许多食品作物中证明。番茄（Solanum lycopersicum）既是重要的粮食作物，又是一种模型植物物种，已广泛用于研究基因功能，尤其是与水果生物学有关的植物。这种双重性在目的中与随时可用的资源（突变种群，基因组序列，转化方法）相结合，使番茄成为基因编辑的理想候选者。我们实验室通常使用的CRISPR/CAS9系统已应用于各种番茄基因型和野生物种solanum pimpinellium。矢量系统基于金门克隆技术。盒，该基因既赋予对卡纳米霉素的抗性，Kanamycin是由CAMV 35S启动子驱动的人类密码子驱动的Cas9，并在控制拟南芥U6 Polymerase促进剂的控制下引导RNA（GRNA）是组装成T-Dna的casss cass9。通常，我们设计了每个基因靶标的两个GRNA的CRISPR/CAS9构建体。但是，我们已经成功地包括多达八个grnas，以同时针对多个基因和区域。将CRISPR-/CAS9设计的构建体引入番茄中是通过基于基于NPTII基因的存在的培养基的培养基的培养基感染的转化方法来实现的。本章详细介绍了CRISPR/CAS9构建体和基因型分析（基于PCR的扩增子测序和T7核酸内切酶）的方法。
用饲料和/或水的硒上调与免疫反应，程序性细胞有关的肝组织中的基因表达饮食补充后生物学的影响...
该研究研究了从乳杆菌（LAP）和lactiplantibacillus Plantarum（LPP）产生的生物后生物学对生产性能，鸡蛋质量和血清生化参数的影响。在40周龄时，将126只Lohmann母鸡随机分配给7种疗法，每只复制六只鸟类。基础饮食（T1）是没有补充（阴性对照）或以0.02％（阳性对照）补充四环素（T2）的。其他五个组：T3，T4（补充了生物后（圈）0.35％，（分别由乳杆菌细菌）产生的0.70％（lap）0.70％）； T5，T6（补充了后饮食后饮食（LPP）0.35％，（LPP）分别由乳杆菌植物细菌产生的0.70％）； T7（补充后饮食后饮食（0.35％圈 + 0.35％LPP）。生物学后和四环素（TET）不会影响体重，进食摄入量，进料转化率（FCR），鸡蛋重量，鸡蛋质量，鸡蛋质量或血清总蛋白质，白蛋白和球蛋白的体重（p≥0.05）。鸡蛋的产生和鸡蛋数量更大（p≤0.05）（lap 0.70％，LPP 0.70％和混合物（0.35％lap + 0.35％LPP）和TET补充组，与对照组相比（T1）。胆固醇和甘油三酸酯（0.35％的LAP，0.35％LPP除外），比T1显着降低（P≤0.05）。超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性（0.35％的LAP，0.35％LPP除外）提高了。结果表明，补充后生物学对生育性能和某些生化参数具有积极作用。
CRISPR-CAS9介导的人类天然杀伤细胞中的TIM3敲除增强对人神经胶质瘤细胞的生长抑制作用 血管紧张素II受体和Neprilysin抑制剂的组合通过预防肝星状细胞激活
摘要：胶质母细胞瘤（GBM）是成年人中最常见和侵略性的原发性恶性脑肿瘤。天然杀伤（NK）细胞是针对诱导GBM细胞的肿瘤细胞有效的细胞毒性细胞。因此，基于NK细胞的免疫疗法可能是GBM中有希望的靶标。t细胞免疫球蛋白粘蛋白家族成员3（TIM3）是在NK细胞上表达的受体，已被称为功能障碍NK细胞的标志物。，我们使用簇状的定期插入的短篇小学重复序列（CRISPR）-CRISPR相关蛋白9（CAS9）建立了NK细胞中的TIM3敲除。TIM3外显子2或外显子5靶向引导RNA- Cas9蛋白复合物（RNP）的电穿孔抑制了具有不同效率的NK细胞上TIM3表达。T7核酸内切酶I突变分解测定表明，这两个RNP都破坏了预期的基因组位点。其他检查点受体的表达，即编程细胞死亡1（PD1），淋巴细胞激活基因3（LAG3），具有Ig和ITIM结构域（TigIT）的T细胞免疫受体（TIGIT）和触觉（CD96）在TIM3基因敲除NK细胞上没有变化。实时细胞生长测定表明，TIM3基因敲除增强了NK细胞介导的GBM细胞的生长抑制。这些结果表明TIM3敲除增强了人类NK细胞介导的GBM细胞的细胞毒性。未来，NK细胞中的CRISPR-CAS9介导的TIM3敲除可能被证明是GBM患者的有前途的免疫治疗替代方案。