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神经祖细胞中的同时NBS1和p53失活触发高级神经胶质瘤
f i g u r e 1 p53失活挽救NBS1 NES-CRE有害脑表型。（a）通过p53失活在p21处拯救NBS1 NES-CRE脑缺陷。（b）与NBS1 NES-CRE EGL和大脑皮层相比，NBS1 NES-CRE，P53 / EGL和大脑皮层缺乏凋亡。比例尺=20μM。（c）与NBS1 NES-CRE的大脑相比，NBS1 NES-CRE EGL中的Tunel阳性细胞数量显着减少。nbs1 nes-cre（n = 3），nbs1 nes-cre，p53 /（n = 2），nbs1 ctrl（n = 4）。nbs1 nes-cre vs nbs1 ctrl（脑皮质**：p = 0.0018，egl ****：p <0.0001），nbs1 nes-cre，p53 / vs nbs1 nbs1 nbs1 nes-cre（大脑皮层NBS1 CTRL（脑皮质 *：P = 0,0181，EGL *：P = 0.0360）。（d）NBS1 NES-CRE和NBS1 NES-CRE，P53 / EGL表现出γ-H2AX灶。比例尺=20μM。（E）NBS1 NES-CRE和NBS1 NES-CRE，p53 / eGL和脑皮质中γ-H2AX +细胞的定量。n.s：没有显着差异。nbs1 nes-cre
以自噬为靶点，联合使用氯喹和雷帕霉素，是治疗高分化脂肪肉瘤的新型有效方法
摘要。背景/目的：脂肪肉瘤是一种源自脂肪组织的软组织肉瘤。它在软组织肉瘤中比较常见。抗疟药氯喹 (CQ) 可抑制自噬并诱导癌细胞凋亡。雷帕霉素 (RAPA) 是 mTOR 的抑制剂。RAPA 和 CQ 的组合是自噬的强效抑制剂。之前，我们表明 RAPA 和 CQ 的组合对去分化脂肪肉瘤患者来源的原位异种移植 (PDOX) 小鼠模型有效。在本研究中，我们研究了 RAPA 和 CQ 的组合在体外靶向高分化脂肪肉瘤 (WDLS) 细胞系中的自噬的功效机制。材料和方法：使用人类 WDLS 细胞系 93T449。使用 WST-8 试验检测 RAPA 和 CQ 的细胞毒性。使用蛋白质印迹法检测自噬体组成部分微管相关蛋白轻链 3-II (LC3-II)。还对 LC3-II 进行了免疫染色以进行自噬体分析。使用 TUNEL 试验检测凋亡细胞，并在三个随机选择的显微镜视野中计数凋亡阳性细胞以进行统计验证。结果：RAPA 单独和 CQ 单独抑制细胞活力
o r i g i n a l r e s a r c h近环素的局部递送和伏诺替纳斯特靶向肿瘤微环境抑制神经胶质瘤的复发
背景：术后复发是神经胶质瘤患者临床结局不良的主要原因，因此预防肿瘤复发对于胶质瘤的治疗至关重要。方法：在这项研究中，通过RNA-Seq分析检测到正常组织中基质金属蛋白酶（MMP）的表达。这项研究包括来自公共数据库（TCGA），中国神经胶质瘤基因组图集（CGGA）的神经瘤病例。在添加光启动剂时，水凝胶含有米诺环素（Mino）和伏诺替氏（mino）（vor）（vor）（g/mino+vor）。高性能液相色谱（HPLC）用于评估在G/mino+VOR水凝胶中释放药物。使用MTT分析来探索Gelma的生物安全性。免疫组织化学，ELISA和TUNEL分析用于证明G/mino +VOR水凝胶的抗肿瘤作用。结果：我们成功开发了G/mino+VOR水凝胶。实验在体外和体内证实了MMPS响应性在水凝胶中递送米诺环素和伏诺酯，以及对不完全的肿瘤操作模型的抗脱糖瘤作用，这表明G/MINO+VOR水凝胶有效地抑制了手术后Glioma的复发性。结论：总而言之，G/mino+VOR水凝胶可以连续释放药物并改善针对复发性神经胶质瘤的治疗作用。关键字：米诺环素，伏诺替纳斯特，复发性神经胶质瘤，水凝胶，肿瘤微环体
sgk1.1通过m依赖电流依赖和独立机制限制了癫痫持续状态后的脑损伤
癫痫是与状态癫痫症（SE）产生的明显脑损伤相关的神经系统疾病，包括神经变性，神经胶质性和异位神经发生。减少这些过程是一种有用的策略，可以改善最初侮辱后的恢复和改善负面结果。sgk1.1，血清和糖皮质激素调节的激酶1（SGK1）的神经元同工型（SGK1）已被证明会增加神经元的M-电流密度，从而降低兴奋性和防止癫痫发作。在这项研究中，我们使用了4-5个月大的男性转基因C57BL/6 J和FVB/NJ小鼠，其内源性启动子控制的激酶的组成型活性形式的生理水平接近。在这里我们表明，SGK1.1激活有效地降低了神经元死亡的水平（使用氟-jade C染色评估）和在高潮区域和皮层中的反应性神经胶质激活（由GFAP和IBA-1标记报告），即使在高含水率的情况下，Kainate诱导的72 H，在72 H中进行了72 h。这种神经保护作用不仅是通过M-电流激活而直接与通过TUNEL分析评估的凋亡水平降低以及通过海马蛋白提取物的Western印迹对BIM和BCL-X L的量化水平有关。我们的结果表明，这种新描述的SGK1.1激活的抗凋亡作用与细胞兴奋性的调节协同作用，从而显着减少与癫痫生成有关的区域中SE诱导的脑损伤。
研究论文主动脉钙化通过诱导心肌细胞凋亡加速心脏功能障碍
血管钙化（VC）是动脉粥样硬化和慢性肾脏疾病患者心血管事件的已知预测指标。但是，VC与心血管死亡率之间的确切关系尚不清楚。在此，我们研究了VC进展，动脉僵硬和心脏功能障碍之间的基本机制。c57bl/6小鼠以35×10 4 IU/天的剂量为腹膜内维生素D 3（VD 3），持续14天。在第42天，VC范围，动脉弹性，颈动脉血流，主动脉脉冲传播速度，心脏功能和病理变化。使用TUNEL和免疫组织化学染色检测到心脏凋亡。在体外，将大鼠心肌细胞H9C2暴露于钙化培养基中培养的钙化大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）中，然后评估H9C2凋亡和与心脏功能相关的基因表达。VD 3处理的小鼠表现出显着的主动脉钙化，主动脉的脉冲传播速度增加，心脏功能降低。主动脉显示出增加的钙化和弹性，心脏凋亡增加。心脏显示出更高水平的ANP，BNP，MMP2和BCL2/BAX的较低水平。此外，钙化的大鼠VSMC培养基诱导的H9C2凋亡和与心脏功能障碍相关的基因表达上调。我们的数据提供了VC加速心脏功能障碍的证据，部分通过诱导心肌细胞凋亡。
原始研究骨髓间充质干细胞衍生的外泌体通过抑制细胞凋亡和炎症
背景和目的：先前的研究证实了骨髓间充质干细胞衍生的外泌体（BMSC-EXO）的抗炎作用。我们旨在研究BMSC-EXO对糖尿病肾脏疾病（DKD）以及基本机制的治疗作用。方法：SD大鼠是通过链唑替辛与高脂饮食结合诱导的，以建立糖尿病疾病模型。bmscs-exo通过尾静脉以每周100 µg的剂量注入12周。使用HE，Masson和Adikicic Acid-Schiff和免疫组织化学染色评估了大鼠肾脏中的病理变化。tunel染色和蛋白质印迹用于评估大鼠肾细胞中与凋亡相关蛋白的表达水平。通过Western印迹通过PCR和NF-κB（p65）检测TNF-α水平，以检查肾脏组织中的炎症反应。结果：BMSCS-EXO显着缓解了糖尿病大鼠中肾脏结构损伤和凋亡细胞的分布。此外，BMSCS-EXO增加了凋亡蛋白Bax的表达，并降低了细胞凋亡的蛋白质裂解caspase 9的表达，并切割了caspase 3。此外，通过BMSCS-EXO处理，肾脏组织和NF-κB（p65）表达的TNF-α的转录水平也降低。此外，BMSC-EXO治疗降低了糖尿病大鼠中葡萄糖（GLU），肌酐（CR）和官僚氮（BUN）的水平。结论：BMSCS-EXO可以通过抑制凋亡和炎症来减轻糖尿病肾脏损害。
宫颈癌活检中的生物标志物表达谱揭示 WT1 是青蒿琥酯的靶点
摘要。背景/目的：青蒿素及其衍生物不仅是已获批准的抗疟药，还具有强大的抗癌活性。基于此前报道的青蒿琥酯 (ART) 在宫颈癌中的临床活性，我们研究了一组 12 种不同的生物标志物，并确定了 Wilms 肿瘤 1 (WT1) 蛋白是 ART 的潜在靶点。患者和方法：对接受 ART 治疗的患者在治疗前、治疗期间和治疗后匹配的宫颈癌活检样本进行研究，以了解其是否诱导细胞凋亡 (TUNEL 检测) 以及 Wilms 肿瘤蛋白 1 (WT1)、14-3-3 ζ、分化标志物簇 (CD4、CD8、CD56)、ATP 结合盒转运蛋白 B5 (ABCB5)、谷胱甘肽 S-转移酶 P1 (GSTP1)、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)、翻译控制肿瘤蛋白 (TCTP)、真核延伸因子 3 (eIF3) 和 ADP/ATP 转位酶的表达情况。已选择 WT1 进行更详细的分析，使用分子对接进行计算机模拟，使用重组 WT1 进行微尺度热泳动，并使用转染了四种不同 WT1 剪接变体的 HEK293 细胞进行细胞毒性测试 (刃天青检测)。结果：ART 治疗患者肿瘤后，凋亡细胞比例和 WT1、14-3-3 ζ 和 CD4 表达增加。ART 在计算机中与位于 WT1 的 DNA 结合位点的结构域结合，而二氢青蒿素 (DHA) 以低亲和力与 WT1 的另一个与 DNA 结合无关的位点结合。使用微尺度验证了结果
2021; 12(9): 2768-2776. doi: 10.7150/jca.51434 研究论文携带表达 p21Ra 的重组溶瘤腺病毒的细胞因子诱导杀伤细胞
背景：溶瘤腺病毒介导的基因治疗是一种新兴的癌症治疗策略。但溶瘤腺病毒主要在肿瘤部位局部给药。静脉注射溶瘤腺病毒进行癌症基因治疗是一个亟待解决的问题。方法：构建携带抗p21Ras scFv的重组溶瘤腺病毒KGHV500，利用CIK细胞递送KGHV500。采用TUNEL、划痕愈合、MTT和Transwell侵袭实验检测KGHV500对肝癌细胞的体外抗肿瘤作用。采用裸鼠异种移植模型检测CIK细胞联合KGHV500在体内的抗肿瘤作用。此外，检测KGHV500在不同器官中的蓄积以评估其安全性。结果：KGHV500抑制肝癌细胞的迁移、增殖、侵袭并诱导其凋亡。在裸鼠异种移植模型中，携带KGHV500的CIK细胞能够到达肿瘤部位，发挥比CIK细胞或单独的KGHV500更好的抗肿瘤效果。此外，我们在裸鼠的不同器官中检测到了KGHV500和抗p21Ras scFv，对器官的影响很小。结论：我们通过将CIK细胞与表达抗p21Ras scFv的溶瘤腺病毒相结合，开发了一种治疗Ras驱动的肝癌的新策略。体内静脉注射携带KGHV500的CIK细胞可显著抑制肿瘤生长，对正常器官的影响很小，并且相对安全。
研究文章 载有白藜芦醇的介孔二氧化硅纳米粒子用于乳腺癌靶向治疗
目的.白藜芦醇（Res）由于药代动力学差、稳定性差、溶解度低等特点严重限制了其在乳腺癌的临床应用。因此，本研究旨在开发一种Res的递送系统，以更好地用于乳腺癌的治疗。方法.化学构建白藜芦醇修饰的介孔二氧化硅纳米粒子（MSN-Res）。分别用透射电子显微镜、傅里叶变换红外光谱仪和紫外光谱检测其形状和包封率。通过皮下注射建立MGF-7荷瘤小鼠，用苏木精-伊红染色检测病理变化。CCK-8和Ki-67免疫组织化学染色用于体外和体内增殖评估。流式细胞术、TUNEL、划痕愈合和Transwell实验检测细胞凋亡、侵袭和迁移。结果.成功制备了MSN-Res，具有较高的生物安全性。 MSN-Res 在体外抑制 MGF-7 细胞增殖、侵袭和迁移并促进细胞凋亡。此外，在乳腺癌小鼠模型中，MSN-Res 表现优于 Res。此外，我们发现 MSN-Res 通过抑制 NF- κ B 信号通路抑制肿瘤生长。结论。MSN-Res 通过抑制 NF- κ B 信号通路抑制乳腺癌进展，比单独使用 Res 治疗更有效，提示 MSN-Res 是一种更有效的乳腺癌辅助治疗方法。因此，我们的研究结果可能为在乳腺癌的联合治疗中使用植物化学物质提供一种新的、更安全的方法。
研究论文 lncRNA MNX1-AS1下调促进非小细胞肺癌铁死亡和细胞凋亡
非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌的主要组织学类型，对人类健康构成严重威胁。越来越多的证据表明，长链非编码RNA（lncRNA）MNX1-AS1参与了癌症（包括肺癌）的发生发展。细胞凋亡和铁死亡是两种受调控的细胞死亡形式，可由抗癌药物诱导。然而，MNX1-AS1在细胞凋亡和铁死亡中的作用尚不清楚。本文我们发现，敲低MNX1-AS1可促进RSL3诱导的NSCLC细胞铁死亡，导致细胞活力下降，活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）水平升高。吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)实验及Annexin V/PI双染实验均显示敲低MNX1-AS1可促进紫杉醇诱导的NSCLC细胞凋亡。此外，敲低MNX1-AS1还导致促凋亡蛋白BAX、cleaved caspase-3及PARP1表达增加，抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。RNA测序及实时荧光定量PCR检测发现，敲低MNX1-AS1后，ACSL4表达增加，而ABCG2表达减少。挽救实验显示，ACSL4和ABCG2分别参与了MNX1-AS1介导的铁死亡和细胞凋亡。此外，敲低 MNX1-AS1 可增加 NSCLC 细胞对 RSL3 和紫杉醇组合的敏感性。总之，我们的数据表明 MNX1-AS1 可能是肺癌的潜在治疗靶点，尤其是与铁死亡和/或凋亡诱导药物组合使用时。