摘要 微小RNA(miRNA)是真核生物中起作用的20-24个核苷酸(nt)小RNA。miRNA的长度和序列不仅与miRNA的生物发生有关,而且对下游生理过程(如ta-siRNA产生)也很重要。为了研究这些作用,在成熟的miRNA序列中产生小突变是有益的。我们使用TALEN(转录激活因子样效应核酸酶)和成簇的规则间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)在成熟miRNA序列中引入可遗传的碱基对突变。对于水稻,TALEN构建体针对五种不同的成熟miRNA序列构建,并产生可遗传的突变。在产生的突变体中,mir390 突变体表现出茎尖分生组织 (SAM) 的严重缺陷,这是一种无茎表型,可以通过野生型 MIR390 来挽救。小 RNA 测序表明 mir390 中的两个碱基对缺失会严重干扰 miR390 的生物合成。在拟南芥中,CRISPR/Cas9 介导的 miR160* 链编辑证实了 miRNA 的不对称结构不是二次 siRNA 产生的必要决定因素。使用双向导 RNA 的 CRISPR/Cas9 成功生成了具有片段缺失的 mir160a 无效突变体,其效率高于单向导 RNA。Col-0 和 Ler 背景下 miR160a 突变体的表型严重程度之间的差异凸显了 miR160a 在不同生态型中的不同作用。总的来说,我们证明 TALEN 和 CRISPR/Cas9 均能有效地修改 miRNA 前体结构、破坏 miRNA 加工并产生 miRNA 无效突变植物。
摘要 微小RNA(miRNA)是真核生物中起作用的20-24个核苷酸(nt)小RNA。miRNA的长度和序列不仅与miRNA的生物发生有关,而且对下游生理过程(如ta-siRNA产生)也很重要。为了研究这些作用,在成熟的miRNA序列中产生小突变是有益的。我们使用TALEN(转录激活因子样效应核酸酶)和成簇的规则间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)在成熟miRNA序列中引入可遗传的碱基对突变。对于水稻,TALEN构建体针对五种不同的成熟miRNA序列构建,并产生可遗传的突变。在产生的突变体中,mir390 突变体表现出茎尖分生组织 (SAM) 的严重缺陷,这是一种无茎表型,可以通过野生型 MIR390 来挽救。小 RNA 测序表明 mir390 中的两个碱基对缺失会严重干扰 miR390 的生物合成。在拟南芥中,CRISPR/Cas9 介导的 miR160* 链编辑证实了 miRNA 的不对称结构不是二次 siRNA 产生的必要决定因素。使用双向导 RNA 的 CRISPR/Cas9 成功生成了具有片段缺失的 mir160a 无效突变体,其效率高于单向导 RNA。Col-0 和 Ler 背景下 miR160a 突变体的表型严重程度之间的差异凸显了 miR160a 在不同生态型中的不同作用。总的来说,我们证明 TALEN 和 CRISPR/Cas9 均能有效地修改 miRNA 前体结构、破坏 miRNA 加工并产生 miRNA 无效突变植物。
2009 年,德国哈雷马丁路德大学的 Ulla Bonas、Jens Boch、Thomas Lahaye 和 Sebastian Schornack 首次在《科学》杂志上发表了 TAL 代码的发现。5 美国非营利组织 2Blades 基金会与科学家合作,监督专利保护以及研究和商业应用的许可。科学家和 2Blades 共同将生物医学商业化权利和所有研究和试剂使用权利独家授权给 Life Technologies(现为 ThermoFisher),而 2Blades 基金会则负责授权将 TALEN 用于农业植物。2
识别:满足行业要求的酶通常供应不足。这种稀缺使人们寻求适应极端条件的新型酶。生物信息学方面的最新进展,再加上具有成本效益的测序的增殖,可以解锁对与未表征的遗传序列充满的数据库。利用算法和专业软件,我能够搜索这些数据库,识别用于克隆,生产和表征的候选序列。近年来,我的工作集中在三个糖基水解酶家族上:GH2(糖苷酶和乳糖酶),GH10和GH11(木聚糖酶)。这项研究产生了重要的发现,包括表征能够产生益生元二糖糖苷的极端乳糖酶和两个对高温和碱性pH的抗二甲烷酶。值得注意的是,这些木聚糖酶之一已获得专利,用于工业生产,目前正在造纸行业(Raiz-Navigator)进行纸浆漂白剂的测试。
3教学类型:课程的官方教学名称:基本教学iii类型的课程类型:学士学位类型的教学类型:实用工作(教室 - 问题)主题类型:强制性大学学位:GradoEnFísica课程给出:1活动频率:1活动频率:3开始日期:3开始日期:08/02/2017小时:17/0/05/05/05/2019/2019/2019年/2019年/2019年/2019年/2019年/2019年/c. 14实体:马德里大学大学实体类型:大学教职员工,学院或中心:ciencias院长:FísicaTeórica主题语言:西班牙语
自2005年以来,我一直是USAL代谢工程组的一部分,自2023年以来,我是代谢工程GIR的联合导演。 div>该群体致力于开发生物技术过程,以生产工业兴趣化合物。 div>由于我们的工作,我们与该行业合作开发了一种替代化学过程的维生素B2发酵生产过程。 div>欧盟选择了这一过程作为工业生物技术的范式,现在称为生物经济。 div>我是5项国际专利(WP和EP)的作者,他们已转移到该行业(BASF SE)进行剥削。 div>目前,我们小组开发的维生素B2发酵过程占世界总产量的80%以上。 div>最近,我们开发了真菌菌株,这些真菌菌株是维生素B9,Biolipids和Terpenes生产过程的基础。 div>我参加了20个竞争性研究项目,是其中8个的首席研究员(IP)。 div>此外,我是一项合作协议的知识产权(Art。60 losu)与跨国化学BASF SE。 div>我曾是46篇科学文章和2本书章节的作者(索引h:23; Scopus Quotes:8886)。 div>我已经执导了3个博士学位论文,目前是他人的主任2。
a,b这些作者对摘要摘要摘要大米(Oryza sativa L.)是全球重要的主食。面对气候变化,需要改善水稻的定性和定量特征,满足人口增加的营养需求不断增长。近年来,基因组编辑在谷物作物的优质种类的发展中发挥了重要作用。基因组编辑和速度繁殖提高了水稻育种的准确性和速度。在大米中已经建立了包括基因组编辑在内的新育种技术,从而扩大了作物改善的潜力。在十年中,诸如锌指核酸酶(ZFN),转录激活剂样效应核酸酶(Talens)(Talens)和群集定期间隔短的短质体重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(CAS9)系统(CAS9)系统使用蛋白质9(Cas9)系统的诸如锌指核酸酶(ZFN)(ZFN),类似于转录激活剂样效应子核酸酶(Talens)(Talens)(CAS9(CAS9),并在赖斯分配中起着非常出色的作用。 此外,最近的其他基因组编辑技术(例如Prime编辑和基础编辑者)也已用于大米中的有效基因组编辑。 由于大米是一个出色的模型系统,因此由于其小基因组和与其他谷物作物的密切合成关系,因此继续开发用于大米的新基因组编辑技术。 采用基因组编辑技术(GET)等基因组改变进行了反向遗传学,已经在农业科学(例如水稻产量和谷物质量改善)方面开辟了新的途径。 这些方法的有效性正在全球研究人员和作物科学家验证。诸如锌指核酸酶(ZFN)(ZFN),类似于转录激活剂样效应子核酸酶(Talens)(Talens)(CAS9(CAS9),并在赖斯分配中起着非常出色的作用。此外,最近的其他基因组编辑技术(例如Prime编辑和基础编辑者)也已用于大米中的有效基因组编辑。由于大米是一个出色的模型系统,因此由于其小基因组和与其他谷物作物的密切合成关系,因此继续开发用于大米的新基因组编辑技术。采用基因组编辑技术(GET)等基因组改变进行了反向遗传学,已经在农业科学(例如水稻产量和谷物质量改善)方面开辟了新的途径。这些方法的有效性正在全球研究人员和作物科学家验证。目前,CRISPR/CAS9技术被研究人员广泛用于基因组编辑,以实现所需的生物学目标,因为它具有简单的定位,易于设计,具有成本效益和多才多艺的工具,用于精确有效的植物基因组编辑。在过去的几年中,通过CRISPR/CAS9技术方法成功编辑了许多与水稻纹理质量和产量相关的基因,以满足全球对食品需求不断增长的需求。在这篇综述中,我们着重于用于水稻改进的基因组编辑工具,以解决取得的进展,并提供大米基因组编辑的例子。我们还讨论了获得无转基因作物的安全问题和方法。
微注射预复合逆转录病毒SCNT转座子-基于基因组编辑的DNA进入早期DNA,通过精子递送遗传介导的基因组改变阶段受精卵进入受精卵工程细胞整合(ZFNs,TALENs,CRISPR / Cas9)