主要的文献参考和用于编译SDS毒物和疾病注册机构(ATSDR)的数据来源危险物质数据库国际化学信息数据库(IUCLID)国家技术与评估研究所(NITE)澳大利亚国家工业化学化学通知和评估计划(NICNAS)NIOSH(国家职业安全与健康研究所国家医学研究所)经济合作环境,健康与安全出版物组织经济合作与开发组织的数据库(CCID)组织高产量化学批量化学计划组织的经济合作和发展筛查信息数据集
摘要:马匹质质症(EP)是由Theileria Equi(T。Equi),Babesia Caballi(B。Caballi)和Theileria haneyi(T. Haneyi)引起的寄生疾病。这种疾病被世界动物健康组织(WOAH)认为是可报告的。实时定量PCR(QPCR)被认为是一种直接,快速和敏感的诊断方法,可检测病原体。但是,QPCR尚未用于Haneyi的各种流行病学研究中。在这项研究中,我们开发了一种新的QPCR方法来检测基于CHR1SCO(染色体1染色体单拷贝开放式阅读框(ORF))基因的Haneyi,该基因在T. equi或B. caballi中没有可检测到的直系同源物。用于开发QPCR分析的Taqman MGB探针。构建了含有CHR1SCO基因的质粒并用于建立标准曲线。 新型的QPCR技术证明了出色的特殊特异性,用于检测其他频繁的马传染病和敏感性,以检测稀释的标准质粒。 在分析96个临床样品中,通过与优化的嵌套PCR(NPCR)测定进行比较,进一步验证了该QPCR。 NPCR分析与已建立的QPCR分析之间的协议为85.42%。 新建立的方法可能有助于准确诊断马匹中的Haneyi感染。构建了含有CHR1SCO基因的质粒并用于建立标准曲线。新型的QPCR技术证明了出色的特殊特异性,用于检测其他频繁的马传染病和敏感性,以检测稀释的标准质粒。在分析96个临床样品中,通过与优化的嵌套PCR(NPCR)测定进行比较,进一步验证了该QPCR。NPCR分析与已建立的QPCR分析之间的协议为85.42%。新建立的方法可能有助于准确诊断马匹中的Haneyi感染。
批次 数量 描述 2771123 0.1 mL Platinum Taq DNA 聚合酶,不含 DNA 2771129 1 mL 50 mM MgCl2,不含 DNA 2758190 1.25 mL 10X PCR 缓冲液 (-MgCl2),不含 DNA
* 提供的两种反应缓冲液均可与 TaqNova DNA 聚合酶一起使用。对于需要高特异性的应用,建议将 10x TaqNova KCl 缓冲液作为首选方法。对于需要高灵敏度和扩增效率的应用(例如扩增多个 DNA 片段),建议使用 10x TaqNova (NH4,) 2SO2 缓冲液。可以评估这两种缓冲液以确定最适合特定应用的缓冲液。
AIIC-澳大利亚工业化学品库存; ASTM-美国材料测试学会; BW-体重; CERCLA-全面的环境响应,赔偿和责任法; CMR-致癌,诱变剂或生殖有毒物; DIN-德国标准化研究所的标准; DOT-运输部; DSL-国内物质清单(加拿大); ECX-与X%响应相关的浓度; EHS-极其危险的物质; ELX-与X%响应相关的负载率; EMS-紧急时间表; ENC-现有的和新的化学物质(日本); ERCX-与X%增长率响应相关的浓度; ERG-紧急响应指南; GHS-全球统一的系统; GLP-良好的实验室实践; HMIS-危险材料识别系统; IARC-国际癌症研究机构; IATA-国际航空运输协会; IBC-国际批量携带危险化学物质的船舶建筑和设备的国际守则; IC50-最大抑制浓度;国际民航组织 - 国际民航组织; IECSC-中国现有化学物质的清单; IMDG-国际海事危险货物; IMO-国际海事组织; ISHL-工业安全与卫生法(日本); ISO-国际标准化组织; Keci-韩国现有化学品库存; LC50-致命浓度占测试人群的50%; LD50-致死剂量至测试人群的50%(中位致死剂量); Marpol-预防船舶污染的国际公约; MSHA-矿山安全与健康管理; N.O.S.- 不否则
兰花是重要的观赏植物,其病毒感染会导致大量经济损害。Cymbidium Mosaic病毒(Cymmv),Odontoglossum Ringspot病毒(ORSV)和Cymbidium Ringspot病毒(CYMRSV)代表三种重要且普遍存在的兰花病毒。本研究中提出的检测系统使用三QMAN定量实时PCR测定法以同时方式识别CYMMV,ORSV和CYMRSV。我们为Cymmv,ORSV和CYMRSV设计了特定的引物和探针,分别为156 bp,148 bp和145 bp的放大序列。cymmv和cymrsv的三重QRT-PCR分析的最小检测极限为1拷贝/测定,最小检测极限为ORSV的10副本/测定。CYMMV,ORSV和CYMRSV的最小稳定检测极限分别为10、10 2和10 2拷贝/分析。因此,该系统比RT – PCR具有更高的灵敏度(约10至10 4倍)。CQ值的内部和跨间隙CV分别小于0.55和0.95%,这表明三重测定法是高度可靠且准确的。此外,使用已建立的测定和基因芯片分析了来自五个不同兰花属的66个样品。检测结果表明,与基因芯片相比,三重探针QRT-PCR具有更高的灵敏度,表明可以将三重实时PCR分析用于检测现场样品。我们的发现表明,三元实时RT – PCR检测系统代表了一种快速,简单,准确的工具,用于在兰花上检测Cymmv,ORSV和CYMRSV。
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图3。MGCL₂,KCL和TMAC对在60°C的延长温度下在靶标的90%放大的影响。使用Platinum II TAQ热启动DNA聚合酶在Proflex PCR系统上从金黄色葡萄球菌中扩增了富含的目标序列。每个20 µL反应包含10 ng的金黄色葡萄球菌和其他(a)1、1.5、2或2.5 mmmgcl₂,(b)30、50、70或90 mm kcl或(c)50、70、70、90、90、90、90或110 mm tmac。热循环条件:94°C时2分钟;在94°C,最佳退火温度下15秒的15秒循环(表4),在60°C下为30秒/kb。PCR产品以2%E-Gel 48含Sybr安全染色的琼脂糖凝胶运行。车道M:E-GEL 1 KB Plus Express DNA梯子。
批量描述01263642 0.5 KU TAQ DNA聚合酶(rec。)2655825 2 x 1.25 ml 10x TAQ缓冲液(NH4)2SO4 2667128 2 x 1.25 ml 10x TAQ缓冲液与KCl 2655522 2 x 1.25 ml 25mm 25mm 25mm mgcl2