DNA寡核能全长产品耦合效率图1。IDT专有平台比其他供应商具有更好的耦合效率,后者在您的订单中提供更全长的寡核苷酸。耦合效率的少量增加(≤1%)会导致全长产品产量可测量增加。曲线根据99.4%的耦合效率(IDT Oligos,n = 126)和99.1%(其他供应商,三个不同供应商的n = 134),使用公式,使用公式,全长百分比product =(eff)(eff)(n – 1) *100 is n is n is n is n in – 99.4 = 4.4 = 4.4 = 4.4 = 4.4 = 4.4 = 4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4. n = coupling效率(例如,99.4)使长度为n的寡核所需的耦合反应数。
IDT自定义寡核能是在礼节综合平台上制造的,并使用优化的磷光体化学用于可持续制造。IDT提供了广泛的修改和净化选项以及大量的配方服务菜单,以满足您苛刻的项目需求。Ultramer™DNA或RNA寡核能是较长的高质量寡核,最适合苛刻的应用,例如克隆,DDRNAI,同源指导的修复和基因构建。
(ssDNA) 是优于 dsDNA 的 HDR 模板。在此,我们报告了一项系统研究,比较了 HEK293 细胞中的 dsDNA HDR 模板和 IDT Ultramer® 寡核苷酸 ssDNA HDR 模板。测试了链选择和同源臂长度,以确定 HDR 在 Cas9 dsDNA 断裂点创建新的限制位点(6 个碱基插入)的效率。使用较长 ssDNA HDR 模板的初步实验表明,与较短 ssDNA 模板具有类似的优势和行为。具有不对称同源臂的模板的 HDR 插入。使用具有不对称同源臂的 HDR 模板导致 EcoRI 插入率与对称同源臂的插入率相似。使用靶向链模板获得了高 HDR 效率,其中
寡核苷酸和基于序列的试剂 PCR 引物 本研究 从 IDT ssODN 合成 Ittiprasert 等人,2019 年和本研究 Ultramer DNA Oligos, 从 IDT 合成向导 RNA Ittiprasert 等人,2019 年和本研究 从 IDT 合成 化学品、酶和其他试剂 Alt-R® CRISPR-Sp HiFi Cas9 酶 V3 Integrated DNA Technologies 1081060 Alt-R® CRISPR-AsCas12a 酶 V3 Integrated DNA Technologies 1081068 DNAzol® ES 试剂 Molecular Research Center DN127 RNAzol® RT 试剂 Molecular Research Center RN190 Opti-MEM FisherScientific Gibco™ 31985062 DMEM FisherScientific 88364 胎牛血清 FisherScientific Gibco™ 26140079 100x 青霉素-链霉素-两性霉素 B FisherScientific SV30079.01 NucleoSpin® 凝胶和 PCR 纯化 Takara 740609