a 丹麦奥尔堡大学医院肿瘤学和临床癌症研究中心;b 丹麦奥尔堡大学临床医学系;c 丹麦奥尔堡大学和奥尔堡大学医院临床数据科学中心;d 丹麦奥尔堡大学临床医学系炎症性肠病分子预测中心(PREDICT);e 丹麦奥尔堡大学医院分子诊断和临床癌症研究中心;f 丹麦奥尔堡大学医院临床遗传学系;g 丹麦奥尔堡大学医院神经外科系;h 丹麦奥尔堡大学医院血液学系;i 丹麦奥尔堡大学医院临床药理学系;j 丹麦奥尔堡大学医院放射学系; k 丹麦奥尔堡奥尔堡大学医院病理学系
区室化是生命的标志,也是当前构建人工细胞的核心目标。[1] 人们研究了不同类型的区室,包括脂质体、蛋白质体、聚合物体和凝聚层,以深入了解区室化对活细胞中常见的生物分子和生化反应网络的作用。[2] 然而,这些区室无法模拟活细胞的所有功能特征,包括高内部生物分子浓度、选择性膜和与其他细胞相互作用的能力。凝聚层液滴是一种类似细胞的区室,由RNA、肽或小分子在多种非共价相互作用的驱动下通过液-液相分离(LLPS)自发形成。[3] 凝聚层的物理性质取决于其组成部分的结构-功能关系。一般来说,它们含有高浓度的肽或RNA,模拟活细胞内的物理化学环境。[4] 然而,由于缺乏膜,通常会导致快速聚结,这对它们的稳定性构成了挑战。此外,没有屏障意味着难以选择性地吸收营养物质并去除废物同时保留有用的产品。[3,5] 脂质基膜结合区室(其中脂质体是最著名的例子)也常被用作原始细胞模型进行研究,但它们内部的溶质浓度通常低于活细胞中的生物分子浓度,或者当高渗透压没有得到仔细平衡时,它们有破裂的危险。[6]
图1:A。本研究中使用的颗粒和实验方案的特征。从上到下:VLP HIV,像人免疫缺陷病毒的粒子一样; MLV,鼠白血病病毒; HBV,肝素B病毒; AAV,Adeno相关病毒(血清型8和9);电动汽车,细胞外囊泡。需要荧光标记颗粒:可以通过基因组修饰(HIV和MLV的GFP标记)或直接通过在样品中添加荧光团(AAV和HBV的Yoyo-1,EVS的DIO)来实现。潜在的细胞DNA在VLP HIV和EV中以红色表示,MLV中的粉红色病毒RNA和HBV和AAV中的紫色病毒DNA表示。然后将样品稀释。大小由NTA确定HIV,MLV和EVS,以及AAV 37和HBV 38的冷冻EM重建。B.零模式波导设置,用于通过纳米孔转移的颗粒。顺式腔室包含荧光标记的颗粒。在施加压力时,颗粒在跨室中的孔中推动,并在孔末端越过evanevencent的田地区域时照亮。一旦他们离开了毛孔,他们就没有专心和漂白。C.事件的荧光演变是时间和粒子出口快照的函数。归一化强度表示为AAV时间的函数(紫罗兰和红点,平均在n = 50事件上)。通过最大强度分配强度获得归一化强度。时间在事件开始时被重新缩放至零,红点与事件发生前的强度相对应。指数衰减以蓝色表示。孔径400 nm,施加压力为0.5 mbar。帧速率:112 fps。插图:图像尺寸= 10 µm。
致谢该项目是通过大学在纽约州布法罗大学的支持和罗斯威尔公园综合癌症中心流量和图像细胞仪共享资源而实现的。如果没有Maggie Vogel-Cryan,LVT和Beth Palka的出色技术支持,这些研究就无法完成。我们承认将生物者用于人物设计。
摘要:细胞外囊泡的分泌,EVS,是原核生物和真核细胞的常见过程,用于细胞间交流,生存和发病机理。先前的研究表明,来自细菌纯培养物的上清液中的EV存在,包括革兰氏阳性和革兰氏阴性的聚糖降解肠道分子。但是,复杂微生物群落分泌的电动汽车的隔离和表征尚未清楚地报告。在最近的一篇论文中,我们表明,木材衍生的复杂β -mannan与常规饮食纤维具有结构性相似,可用于调节猪肠道肠道菌群的组成和活性。在本文中,我们研究了24小时在复合β -Mannan富集后,猪粪便菌群分泌的EV的产生,大小,组成和蛋白质组。使用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析,我们以165 nm的平均大小识别电动汽车。我们利用猪蛋白的基于质谱的元蛋白质蛋白基于猪蛋白的数据库,并从猪群中鉴定出355个元基因组组装的基因组(MAG),从而鉴定出303蛋白。对于从β -mannan生长的培养物中分离出来的EV,大多数蛋白质映射到两个MAGS MAG53和MAG272,分别属于梭菌和细菌。此外,具有第三次蛋白质的MAG为MAG 343,属于肠杆菌阶。在β -Mannan EV蛋白质组中检测到的最丰富的蛋白质参与了翻译,能量产生,氨基酸和碳水化合物转运以及代谢。总体而言,这项概念验证研究表明,从复杂的微生物群落中释放出的电动汽车的成功隔离。此外,电动汽车的蛋白质含量反映了特定微生物对可用碳水化合物源的响应。
总而言之,Voltex加热背心是一款顶级加热服装,提供出色的温暖,舒适和风格。无论您是进入大型户外活动还是只是试图在日常活动中保持舒适,这背心对于任何希望与寒冷作斗争的人都是必备的。凭借其先进的供暖技术,耐用的结构和时尚的设计,Voltex加热背心肯定会成为您的首选冬季必不可少的。不要让寒冷的天气阻碍您退缩 - 投资Voltex加热背心,无论您走到哪里,都会体验无与伦比的温暖和舒适感。
总之,VolteX 加热背心是一款顶级加热服装,可提供出色的温暖、舒适和时尚感。无论您是外出户外活动还是只是想在日常活动中保持舒适,这款背心都是任何想要抵御寒冷的人的必备品。凭借其先进的加热技术、耐用的结构和时尚的设计,VolteX 加热背心一定会成为您冬季的必备品。不要让寒冷的天气阻碍您 - 购买 VolteX 加热背心,无论您走到哪里都能体验无与伦比的温暖和舒适。