简而言之,该方法使用一组代表性软表面纺织品的1厘米直径盘或1厘米2个正方形(载体)。每个载体接收10 µL的微生物接种物(具有三部分的土壤负荷),沉积在每个载体的中心。允许接种物干燥,然后暴露于50 µL抗菌治疗中;对照载体获得等效量的无害流体(例如增长培养基)。允许曝光时间经过;然后将液体中和添加到小瓶中,以停止抗菌作用。每个带有载体的小瓶是涡旋,连续稀释的,并将其镀到细胞上,以恢复可行的病毒颗粒。存在可行的病毒颗粒的存在为适用于测试系统(例如,细胞病变效应(CPE),直接荧光抗体(DFA)染色(DFA)染色,血凝等染色等)。基于未经处理的对照和处理过的载体的平均log 10密度值之间的差,计算生存病毒颗粒中的平均log 10减少(LR)。LR值用作产品有效性的度量。
1动物菌丝病的预防和控制剂的关键实验室(农业和农村事务部),霍贝里农业科学学院动物饲养和兽医研究所,特殊ONE,Nanhuyaoyuan,Hongshan地区,洪山区,Wuhan 430064,中国; DJF0825@163.com(J.D.); wangzui@webmail.hzau.edu.cn(Z.W.); lili_0215@126.com(L.L.); luqin198909@126.com(Q.L.); jinxinxin@webmail.hzau.edu.cn(X.J.); Cheery2221@163.com(X.L.); shhb1961@163.com(H.S.)2 Hubei Hongshan Laboratory, Wuhan 430064, China 3 Department of Animal Medicine, College of Life Science and Food Engineering, Hebei University of Engineering, Handan 056038, China 4 Department of Microbiology and Immunology, Dalhousie University, Halifax, NS B3H 4R2, Canada * Correspondence: zhaixg1966@163.com (X.Z.); qingping0523@163.com(q.l.)†这些作者为这项工作做出了同样的贡献。
摘要:疫苗是传染病控制和预防的基石。SARS-COV-2的爆发已经确定了对新型疫苗设计的新方法的迫切需求。植物病毒及其衍生物越来越多地用于开发新的医学和生物技术应用,这在许多临床前和临床研究中都反映了这一点。植物病毒具有独特的特征组合(生物安全性,低反应性,便宜和易于生产等等。),这决定了它们的潜力。本评论介绍了有关使用不同类型的对称性作为疫苗成分和癌症免疫疗法辅助的植物病毒的最新数据。讨论得出的结论是,最有前途的方法可能是使用从烟草马赛克病毒获得的结构修饰的植物病毒(球形颗粒)的方法。这些颗粒将高吸附特性(作为载体)与强烈的免疫原性相结合,并且在动物模型中使用各种抗原确认。根据当前的研究,很明显,植物病毒在疫苗开发和癌症免疫疗法中具有很大的应用。
儿童中许多传染病的发生与初始病毒感染直接相关,而对病毒感染的免疫反应则导致了随后的病理生理变化(Getts等,2013)。儿童在对病毒的敏感性以及他们引起的免疫反应的种类方面有很大不同(Prendergast等,2012)。婴儿在暴露于不同环境时通常代表关键窗口,病毒感染可以调节免疫细胞的成熟度,甚至可以重塑其免疫系统的功能(Renz和Skevaki,2021)。这意味着先天免疫在从新生儿到成年人的发育过程中演变(例如Schreurs等,2021),例如,干扰素反应较弱,可以解释其对病毒感染的敏感性的增加。在其中,一种非常典型的疾病是胆道闭锁(BA)。ba被认为是病毒诱导的自身免疫性疾病(Mack,2007),其中病毒感染,尤其是轮状病毒,通常被视为发病机理中的发起剂。已知,发现NK细胞的激活以年龄依赖性的方式被炎性细胞因子上调(Sundstrom等,2007)。随着NK细胞随着小鼠的年龄的增长而增加的活化,它们会在轮状病毒感染的胆管细胞上增加细胞毒性,从而导致持续性胆道损伤并导致BA(Qiu等,2014)。另一方面,成年NK细胞在感染后不久消除了轮状病毒感染的胆管细胞,从而阻止了这种情况下胆管中持续的轮状病毒感染。Russo等。除了BA外,还具有类似的免疫细胞成熟模式的儿童中还有其他一些病毒感染疾病。因此,儿童免疫细胞成熟与病毒感染之间的特殊关系需要将来深入研究。在这个主题研究主题中,向读者提供了5项高质量的原始研究。作者从不同角度研究了病毒感染后儿童免疫功能变化的特征,治疗方法和证据,并向读者指出了未来的研究热点。尽管Covid-19在过去三年中已成为研究热点,但儿童Covid-19感染的发生率低于成年人的原因仍然不清楚。尤其是,关于COVID-19的儿童的T细胞反应知之甚少。提供了一种新的观点,即不同CD4 +
The Biology of Viruses MMI / B IOCHEM 575 ( 2 CREDITS ) - S PRING 2023 I NSTRUCTORS : Professor Paul Friesen Professor Andrew Mehle C OURSE D ESCRIPTION : “Biology of Viruses” (MMI/Biochem 575) is a 2-credit course that teaches upper-level students the molecular biology and biochemistry of viruses and virus infection.学生将学习病毒结构,病毒繁殖,疾病机制,预防和感染的干预以及病毒如何通过出现和进化对人类健康构成威胁的基础。我们将讨论影响我们世界和日常生活的病毒的选定例子。该课程将集中在动物的病毒病毒上,但不会成为“每天的虫子(病毒)”阶级风格。在课程的结论中,学生将了解现代病毒学中的原理和主题,包括病毒发病机理,疫苗接种,抗病毒药物和基因治疗。病毒学575是一门高奖课程,将使对医学,公共卫生,生物学和研究生水平研究感兴趣的学生有益。该课程具有本科荣誉选项,可用于研究生学分(具有大学规定的要求)。m eeting t ime and m Odity:l e术:星期二和星期四,1:00 pm - 1:50 pm 1520房间,微生物科学大楼
摘要:最近的 COVID-19 危机凸显了 RNA 病毒的重要性。该组中最突出的成员是 SARS-CoV-2(冠状病毒)、HIV(人类免疫缺陷病毒)、EBOV(埃博拉病毒)、DENV(登革热病毒)、HCV(丙型肝炎病毒)、ZIKV(寨卡病毒)、CHIKV(基孔肯雅病毒)和甲型流感病毒。除了产生逆转录酶的逆转录病毒外,大多数 RNA 病毒都编码 RNA 依赖性 RNA 聚合酶,这些聚合酶不包括分子校对工具,这是这些病毒在宿主细胞中繁殖时具有高突变能力的原因。加上它们能够以不同方式操纵宿主的免疫系统,它们的高突变频率对开发有效和持久的疫苗和/或治疗方法提出了挑战。因此,使用抗病毒靶向剂虽然是抗感染治疗策略的重要组成部分,但可能会导致选择耐药变体。宿主细胞复制和加工机制对于病毒的复制周期至关重要,并引起了人们对针对宿主机制的药物作为治疗病毒感染的治疗替代品的潜在用途的关注。在这篇综述中,我们讨论了具有抗病毒作用的小分子,它们针对许多 RNA 病毒感染周期不同阶段的细胞因子。我们强调重新利用 FDA 批准的具有广谱抗病毒活性的药物。最后,我们假设 ferruginol 类似物 (18-(邻苯二甲酰亚胺-2-基) ferruginol) 是一种潜在的宿主靶向抗病毒药物。
摘要:植物中的病毒感染威胁粮食安全。因此,需要简单有效的病毒检测方法,以采用可以防止病毒扩散的早期措施。然而,基于聚合酶链反应(PCR)扩增病毒基因组的当前方法需要实验室条件。在这里,我们利用了CRISPR-CAS12A和CRISPR-CAS13A/D系统来检测三种RNA病毒,即烟草的烟叶病毒,烟草蚀刻病毒和马铃薯病毒X,在Nicotiana Benthamiana植物中。我们应用了CRISPR-CAS12A系统来检测由PCR或等温扩增产生的病毒DNA扩增子,并且在混合感染的植物中也进行了多重检测。此外,我们调整了检测系统以绕过昂贵的RNA纯化步骤,并获得带有横向流条的可见读数。最后,我们应用了CRISPR-CAS13A/D系统直接检测病毒RNA,从而避免了进行前置步骤的必要性,并获得了随病毒载荷缩放的读数。这些方法允许在收获叶片后半小时内进行病毒诊断的性能,因此可能与可灭绝的应用有关。关键词:核酸检测,CRISPR诊断,多重诊断,植物病毒■简介
近年来,神经毒性循环疫苗衍生脊髓灰质炎病毒 (cVDPV) 在非洲和亚洲多个国家出现并在全球蔓延,对根除所有形式脊髓灰质炎病毒的目标构成了重大挑战。大约 90% 的 cVDPV 疫情是由 2 型萨宾疫苗毒株引起的,该疫苗是一种口服减毒活疫苗;cVDPV 疫情通常发生在免疫覆盖率持续较低的地区 ( 1 )。2017-2019 年期间,一种新型 2 型口服脊髓灰质炎病毒疫苗 (nOPV2) 已开发并通过 I 期和 II 期临床试验进行评估,该疫苗是通过对 2 型萨宾疫苗病毒基因组进行基因改造而产生的。事实证明,nOPV2 安全且耐受性良好,具有非劣效的免疫原性,并且与 Sabin 单价 2 型相比具有优异的遗传稳定性(以主要减毒位点 [5' 非编码区中的结构域 V] 的保留和转基因小鼠粪便脱落疫苗病毒的神经毒力显着降低来衡量)(3-5)。这些发现表明,nOPV2 可能是降低产生疫苗衍生脊髓灰质炎病毒 (VDPV) 风险和疫苗相关麻痹性脊髓灰质炎脊髓炎病例风险的重要工具。基于良好的临床前和临床数据,以及正在发生的野生脊髓灰质炎病毒地方性传播和 cVDPV 2 型疫情所引发的国际关注的突发公共卫生事件,世界卫生组织于 2020 年 11 月批准根据紧急使用清单 (EUL) 途径使用 nOPV2,并允许其在 2021 年 3 月首次用于应对疫情(6)。根据 EUL 流程的要求,除其他 EUL 义务外,还制定并部署了一项广泛的计划,用于获取和监测在急性弛缓性麻痹 (AFP) 监测、环境监测、免疫接种后不良事件监测和针对特别关注的不良事件(即可能与疫苗产品有因果关系的预定事件)的针对性监测、疫情应对期间以及通过计划的实地研究检测到的 nOPV2 分离株。在该监测框架下,全球脊髓灰质炎联盟 nOPV 工作组的基因表征小组审查了从 nOPV2 分离株的全基因组测序生成的数据,以及来自 AFP 和环境监测系统的分离株的其他病毒学数据
摘要:我们对 2018-2019 年提交给康涅狄格州兽医诊断实验室 (CVMDL) 的蝙蝠中检测到的狂犬病毒 (RABV) 进行了全基因组测序和遗传表征。在提交给 CVMDL 的 88 只蝙蝠中,6 个脑样本(6.8%,95% 置信区间:1.6% 至 12.1%)经直接荧光抗体试验检测呈阳性。在棕蝠 (Eptesicus fuscus, n = 4)、灰毛蝠 (Lasiurus cinereus, n = 1) 和未知蝙蝠物种 (n = 1) 中检测到了 RABV。获得了六种检测到的 RABV 中的四种的完整编码序列。在系统发育分析中,大棕蝠的 RABV(18-62、18-4347 和 19-2274)属于蝙蝠 EF-E1 进化枝,与在宾夕法尼亚州和新泽西州从同种蝙蝠中检测到的 RABV 聚类。从迁徙灰毛蝠中检测到的蝙蝠 RABV(19-2898)属于蝙蝠 LC 进化枝,与在亚利桑那州、华盛顿州、爱达荷州和田纳西州从同种蝙蝠中检测到的 11 种病毒聚类。本研究中使用的方法产生了有关 RABV 变体遗传关系的新数据,包括它们的宿主和空间起源,这些数据将作为未来在北美研究 RABV 的参考数据。需要对蝙蝠 RABV 进行持续监测和基因组测序,以监测病毒的进化和传播,并评估可能与公共卫生相关的基因突变的出现。