图1。在37°C下以6,000个细胞/cm的密度为6,000个细胞的密度,在含有10%FBS或Cell-Vive™MSC无需Xeno Xeno无生长培养基(CAT#420519)中,以6,000个细胞/cm的密度为6,000个细胞/cm的密度(CAT#420519),将人骨骨髓衍生的间充质干细胞(BM-MSC)(BM-MSC)播种(BM-MSC)。在含有10%FBS(B)或Cell-Vive™MSC无XENO生长培养基中生长的(A)αMEM生长的粘附细胞的形态。细胞扩张(C)和细胞活力(D)在αMEM中包含10%FBS(白色条)或Cell-Vive™MSC无XENO-fime-Frent-Frention Media(CAT#420519,黑色棒)中确定。使用PE Anti-Human CD105(克隆43A3,CAT#323206),PE/CYANINE7 ANTI-INTI-HUMUNE CD90(CYN-HUMUNE CD90(CYAN)5E10,CLONE 73A3,CLONE 73A3,CLONE 73A3,CLONE 43A3,CAT902411281,CAT#328181,,通过流式细胞仪(E)(CAT#3281),通过流式细胞仪(E)(CAT#323206),CAT-328181,通过流式细胞仪(E)(CAT#323206),通过流式细胞仪(E)(CAT#3281)收集和分析了第5天的代表性BM-MSC。抗人CD73(克隆AD2,CAT#344044),FITC抗人CD45(克隆HI30,CAT#304054)和APC抗人类CD34(克隆581,CAT#343510)。细胞对CD105,CD90和CD73呈阳性,但缺乏CD45和CD34表达(蓝色衬里直方图)。同种型匹配的控件(黑色衬里直方图)。
仅用于研究使用。不适用于诊断程序。©2023 Thermo Fisher Scientific Inc.保留所有权利。除非另有说明,否则所有商标都是Thermo Fisher Scientific及其子公司的财产。col121894 1223
预印本(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。此版本的版权持有人于2025年2月3日发布。 https://doi.org/10.1101/2024.05.28.596179 doi:biorxiv preprint
引言间充质干细胞或骨髓基质细胞(MSC)是多能干细胞,主要存在于骨髓中,但据报道,由于其易于分离,多能,多能,副细胞活性,副细胞活性和免疫瘤性质,因此与其他组织隔离并具有巨大的治疗潜力。1-5通常,MSC的特征是三个标准:遵守塑料;特定表面标记的表达:CD105,CD90和CD73,以及CD34和CD45的表达不足;并保持与脂肪细胞,成骨细胞和软骨细胞的分化能力。6随着MSC的临床应用数量的增加,必须确保为治疗目的提供足够的MSC供应。临床应用所需的MSC数量远远超过可以从组织本身隔离的MSC。因此,识别最佳单元格
matrixome®的Imatrix-511是一种无XENO重组人层粘连蛋白-511 E8片段底物,用于维持和膨胀胚胎干细胞(ES)和诱导的多能干细胞(IPS)。层粘连蛋白,细胞外基质(ECM)的糖蛋白是地下膜的主要成分,对于调节细胞功能的生存,细胞粘附和增殖至关重要。
Nutrifreez®D10冷冻保存介质是一种优化的冻结溶液,设计和验证了用于对各种组织和细胞类型的冷冻保存,包括但不限于hesc,IPSC和MSC等敏感细胞类型。Nutrifreez®D10培养基在冷冻保存过程中保持定义和无动物成分条件,对于在无Xeno的系统中培养细胞时保持一致性至关重要。Nutrifreez®D10培养基已准备使用,并通过DMSO进行了预先构建,在冷冻,存储和解冻过程中为细胞提供了保护环境。
由Nucleus Biologics开发和制造的 VITRONECTIN XF™是一种定义的,无XENO的细胞培养基质,支持HPSC的生长和分化。 Use with mTeSR ™ 1 ( Catalog #85850 ), mTeSR ™ Plus ( Catalog #100-0276 ), TeSR ™ -E8 ™ ( Catalog #05990 ), or TeSR ™ -AOF ( Catalog #100-0401 ) medium to provide a defined culture system for the maintenance of ES and iPS cells and greater control over the culture environment, resulting in more consistent在下游应用中,细胞群体和可重复的结果。 人类ES和IPS细胞在玻璃连蛋白XF™上培养的细胞保留多能性和正常菌落形态,而无需适应步骤(图1)。 与温和的细胞解离试剂(GCDR;目录#07174)或RELESR™(目录#05872)搭配以维持高质量的培养物。VITRONECTIN XF™是一种定义的,无XENO的细胞培养基质,支持HPSC的生长和分化。Use with mTeSR ™ 1 ( Catalog #85850 ), mTeSR ™ Plus ( Catalog #100-0276 ), TeSR ™ -E8 ™ ( Catalog #05990 ), or TeSR ™ -AOF ( Catalog #100-0401 ) medium to provide a defined culture system for the maintenance of ES and iPS cells and greater control over the culture environment, resulting in more consistent在下游应用中,细胞群体和可重复的结果。人类ES和IPS细胞在玻璃连蛋白XF™上培养的细胞保留多能性和正常菌落形态,而无需适应步骤(图1)。与温和的细胞解离试剂(GCDR;目录#07174)或RELESR™(目录#05872)搭配以维持高质量的培养物。
Celladhere™层粘连蛋白-521是一种定义的,无XENO的细胞培养基质,可支持在无进料器条件下的人类胚胎干细胞(ES)细胞(ES)细胞(ES)细胞(ES)细胞(EPS)细胞的长期维持。使用Celladhere™层粘连蛋白521作为细胞培养矩阵增加了与其他矩阵相比,增加了单细胞的附着和存活率,并且不需要在电镀过程中添加凋亡抑制剂(请参见注释和尖端)(Lu等人。; Rodin等,2014a; Rodin等,2014b)。与MTESR™1(目录#85850)一起使用时,MTESR™plus(目录#100-0276),TESR™-AOF(目录#100-0401)或TESR™-E8™(目录#05990),该系统允许整个培养环境的完整范围,并遍及整个环境。申请。
1产品描述和重要笔记 - 生物纯净的人血清白蛋白是一种无XENO的补充剂,尤其有资格在未分化的多能人体胚胎(HES)细胞(HES)细胞和诱导的多能茎(HIPS)细胞的生长和扩展中,均具有依赖和饲养者的无饲料和饲养者的条件。人血清白蛋白(HSA)是一种培养基补充剂,其中含有高分子量的高度溶解渗透蛋白。-HSA可有效地维持HES细胞生长和扩张。它在维持细胞膜稳定性方面特别有价值。HSA既可用于结合阴离子,阳离子和中性分子,又有其隔离和稳定多种离子和其他小分子的能力。
项目摘要:Xeno核酸(XNAS)是天然出现的RNA和DNA的合成类似物,但其氮基碱,骨干糖单位或磷酸二酯链接的变化。具有不同氮基碱基的XNA通常称为非自然基对(UBP)XNA。UBP只能与自己搭配,而不能与天然出现的碱基对A-T或G-C相对。这有可能通过这些非天然UBP碱基扩大遗传密码并进行合成生物学;但是,这依赖于将其作用于它们的酶的工具。在传统的分子生物学中,我们通常会使用“限制 - 连接克隆”(通常与PCR)一起将新的DNA碎片引入基因组或生产人造DNA。PCR扩大了感兴趣的基因,因此我们有许多副本。然后,我们使用限制性核酸内切酶,该核酸内切酶在DNA中的特定位点识别和切割,从而形成粘合性的悬垂(也称为“粘性端”非正式),可以重新加入。最后,我们使用DNA连接酶密封这些粘性末端,并将所得的DNA引入细胞中。UBPS的问题是酶并不总是识别并使用不自然的碱基工作。为了克服这一点,我们已经测试了一系列核酸酶和连接酶,以剪切和加入UBP-XNA,并找到了两个具有合适活性的核酸酶和连接酶。这些将是您研究的主题。在此项目中,您将组合测试这些酶为: