智力残疾,癫痫,赫希斯普朗氏病和各种先天性畸形(Garavelli and Mainardi,2007年)。此外,Zeb2的过表达与不同形式的癌症的进展有关(Fardi等,2019)。虽然已经对Zeb2蛋白的功能进行了广泛的研究,但目前缺乏可用的Zeb2缺乏的人类细胞模型,无法在胚胎发育过程中进一步删除Zeb2依赖性调节网络,并且可以取消抗癌药物的发展。为此,我们使用CRISPR/CAS9介导的编辑系统生成了人类IPSC线,耗尽了Zeb2蛋白(表1)。我们分别应用了两个靶向Zeb2外显子5和外显子6的GRNA(图1 a),在父母IPSC线上Kicri002a(表1;(Uhlin等,2017)。通过LiPofection将包含两个GRNA的构建体引入IPSC系,并通过荧光激活的细胞分选(FACS)选择转染的细胞以表达绿色荧光蛋白。单细胞克隆在LN521上扩展,并通过基因组DNA上的Sanger测序分析基因编辑。分析显示了具有纯合790 bp缺失的克隆线kicri002a-4,跨越了内含子5和外显子5和6的一部分(chr2:g.144,404,077 - 144,404,404,404,867del;1 a;补充。图1 A-B)。 外显子5和外显子6的其余部分被融合,预测氨基酸194上的截短的Zeb2 mRNA,其截短的Zeb2 mRNA(PTC)(P.THR188888888888888888888888;图1 A-B)。外显子5和外显子6的其余部分被融合,预测氨基酸194上的截短的Zeb2 mRNA,其截短的Zeb2 mRNA(PTC)(P.THR188888888888888888888888;图1 a)。与136PTC位于编码N末端锌指(NZF)域的区域以及更C末端的R-SMAD结合域(SBD),CTBP相互作用结构域(CID)(CID)和C-末端的c-terminal Zinc Zinc Finger(CZF(CZF)和Homeododomain(例如Domains)(epifa)(epifa)。
摘要 .目的 .三阴性乳腺癌(TNBC)是女性最常见的恶性、高度异质性肿瘤之一。miR-200c等微小RNA(miRNA)在包括TNBC在内的多种恶性肿瘤中发挥重要作用。但miRNA-200c在TNBC中的生物学作用尚不十分清楚。本研究探讨miR-200c在TNBC生长中的作用机制。方法 .采用逆转录定量聚合酶链式反应检测TNBC组织和TNBC细胞中miR-200c的表达。细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验、划痕愈合实验和transwell实验分别观察miR-200c对TNBC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。用Western印迹法检测上皮间质转化(EMT)标志物的表达。使用双荧光素酶报告基因检测来测试 ZEB2 是否是 miR-200c 的新靶点。结果。我们的结果表明 ZEB2 是 miR-200c 的新靶点,并且 ZEB2 通过 EMT 介导三阴性乳腺癌的转移。结论。miR-200c 通过靶向 ZEB2 来减弱 TNBC 细胞侵袭和 EMT。因此,我们的数据表明 miR-200c 可用于开发新的 TNBC 早期诊断和治疗策略。
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先天性心脏缺陷 GATA6 0.174 3 2 0 0 0 2.5×10 -5 3.5×10 -6 KMT2A 0.065 5 0 1 0 0 3.2×10 -4 5.0×10 -5 ADNP 0.123 4 0 0 0 1 5.8×10 -4 3.1×10 -4 KDM5B a 0.572 4 0 0 2 4 0.012159 5.2×10 -4 NR2F2 0.217 2 1 0 0 0 0.014122 0.002103 FOXP1 a 0.175 2 1 0 0 0 0.029404 0.003100 TBX5 0.135 1 1 0 1 0 0.031389 0.053298 GATA4 0.527 2 0 0 2 1 0.040077 0.050796 TCF12 0.372 1 1 0 2 1 0.051542 0.068473 ZEB2 0.107 1 1 0 1 0 0.058741 0.131609 KLF2 a 0.710 1 1 0 0 0 0.204573 0.032261 SMAD4 0.222 0 2 0 0 0 0.209108 0.035057 MEIS2 a 0.184 2 0 0 0 0 0.271015 0.055872 CTCF a 0.148 0 2 0 0 0 0.278293 0.058374 颌面裂 SATB2 0.091 7 5 0 0 0 3.86×10 -14 5.77×10 -15 TFAP2A 0.261 2 3 0 1 0 2.84×10 -6 7.70×10 -6 CTCF b 0.148 0 3 0 0 0.011737 0.001484 IRF6 0.132 1 0 3 1 0 0.002951 0.007637 TP63 0.267 1 1 0 3 0 0.003631 0.072430 SOX5 b 0.188 1 1 0 1 0 0.018728 0.058691 ADNP b 0.123 2 0 0 0 1 0.092444 0.088307 GRHL2 b 0.270 2 0 0 0 0 0.328840 0.076571 213
