摘要:锰(MN)是一种用于各种酶类别的辅因子,是所有生物体的必需痕量金属。但是,过度暴露于MN会导致神经毒性。在这里,我们评估了暴露于Mn氯化物(MNCL 2)对生存力,形态,突触功能(基于神经素表达)和斑马鱼幼虫行为的影响。MNCL 2从受精后2.5 h暴露导致受精后5天的生存率降低(60%)。表型变化影响了身体长度,眼睛和嗅觉器官的大小以及视觉背景适应。这伴随着神经素免疫染色的荧光强度和神经素蛋白编码基因NRGNA和NRGNB的表达水平的降低,表明存在突触改变。此外,过度暴露于MNCL 2导致幼虫表现出姿势缺陷,运动活动的减少以及对光环境的偏爱受损。从鱼类水中去除MNCL 2后,斑马鱼幼虫恢复了它们的色素沉着模式并使其运动行为归一化,表明MN神经毒性的某些方面是可逆的。总而言之,我们的结果表明,MN过度暴露会导致斑马鱼幼虫中明显的形态改变,神经素表达的变化和行为障碍。
摘要:成人神经发生是所有脊椎动物中发生的进化保守过程。然而,考虑到构成和损伤引起的条件下的神经源性壁ni,神经干细胞(NSC)身份,神经干细胞(NSC)身份以及大脑可塑性之间观察到明显的差异。斑马鱼已成为研究成人神经发生涉及的分子和细胞机制的流行模型。与哺乳动物相比,成年斑马鱼显示出大脑分布在整个大脑中的大量神经源性壁ni。此外,它表现出强大的再生能力,没有疤痕形成或任何明显的残疾。在这篇综述中,我们将首先讨论有关(i)成年斑马鱼和哺乳动物(主要是小鼠)和(ii)主脑脑脑壁iches中神经干细胞的性质的神经源性壁ches的分布。在第二部分中,我们将描述斑马鱼和小鼠端脑损伤后发生的一系列细胞事件。我们的研究清楚地表明,大多数早期事件发生在斑马鱼和小鼠之间,包括细胞死亡,小胶质细胞和少突胶质细胞募集,以及损伤引起的神经发生。在哺乳动物中,受伤后的后果之一是形成了持续存在的神经胶质疤痕。在斑马鱼中不是这种情况,这可能是斑马鱼表现出更高再生能力的主要原因之一。
斑马鱼是被选为实验室使用的流行研究生物,部分原因是宠物贸易的广泛差异。许多实验室斑马鱼的当代菌落都保存在水产养殖设施中,这些设施监测并旨在遏制可能会对菌落健康和混淆实验产生负面影响的感染。与宠物贸易相比,在研究环境中,实验室控制对与斑马鱼相关的微生物成分的影响尚不清楚。在两个环境中,未知原因的疾病都是常见的。我们进行了一项元文字组合调查,以广泛比较宠物贸易和实验室环境中斑马鱼相关的微生物。我们从宠物贸易中发现了许多微生物在实验动物中未发现的微生物。同居实验揭示了几个可传播的微生物,包括新描述的未发育的,duble stanand的RNA病毒,在Birnaviridae家族中,我们将Rocky Mountain Birnavirus(RMBV)命名。感染,但是当传播到实验动物时,rmBV与明显的抗病毒药反应和出血性疾病有关。这些实验将宠物贸易作为与斑马鱼相关的不同微生物的独特来源,并为发现新描述的病原病毒和其他传染性微生物的发现范式建立了范式,这些微生物可以在实验室中进行研究。
对羟基苯甲酸酯是化妆品,加工食品和药物的防腐剂。最常见的对羟基苯甲酸酯之一(PRP)对中枢神经系统的有害影响尚不清楚,尤其是在发育过程中。在这项研究中,使用综合方法在斑马鱼模型中研究了PRP和长期神经毒性的神经发育作用。暴露于两种不同浓度的PRP(10和1000μg/L)的斑马胚,然后检查幼虫的行为表型(开放式行为,惊厥反应和昼夜节律节奏)和相关的脑标记(CYP19A1B,PAX6A,SHANK3A,SHANK3A和GAD1B)。在30 dpf和60 dpf的少年上还检查了脑功能不对称和thigmotaxis的长期行为和认知对社交性的影响。此外,在60 dpf斑马鱼的大脑中评估了蛋白质组学和基因表达分析。有趣的是,幼虫中的高剂量减少了thigmotaxis,并在少年中增加了低剂量。shank3a和gad1b基因的表达均被PRP浓度抑制,表明PRP对神经发育的可能影响和
塑料,持续有机污染物(POP)和重金属的人为释放可能会影响包括水生生态系统在内的环境。纳米塑料(NP)最近出现为普遍的环境污染物,具有吸附流行的能力并可能引起生物体的压力。在流行音乐中,DDT及其代谢产物是由于持久性的持续性而是ubiq是ubiq的环境污染物。尽管在欧洲停产的DDT使用,但DDT及其代谢产物(主要是P,P'-DDE)仍在鲑鱼水产养殖中使用的饲料中可检测到的水平上发现。我们的研究旨在将NP(50 mg/L聚苯乙烯)和DDE(100μg/L)的个体和联合毒性使用作为模型。我们没有发现单独暴露于NP的斑马鱼幼虫的形态,心脏,呼吸或行为变化。相反,在暴露于DDE和NPS + DDE的斑马鱼幼虫中观察到形态,心脏和呼吸道改变。有趣的是,仅在暴露于NPS + DDE的斑马幼虫中观察到行为变化。这些发现得到了RNA-Seq结果的支持,这表明仅在暴露于NPS + DDE的斑马幼虫中,某些心脏,血管和免疫原性途径被下调。总而言之,我们发现与NP结合使用DDE的毒理学影响增强。
微塑料已成为全球一个巨大的问题,因此,研究其对人类和环境健康的可能影响很重要。在这项研究中,斑马鱼胚胎分别比较了两种不同尺寸的聚苯乙烯微塑料(PS -MP),分别为1 µm和3 µm,在0.01、0.1、1.0、1.0和10.0 mgl -1时,并监测高达72小时。毒性测试表明,PS-MP都没有改变胚胎的存活率和正常的孵化过程。相反,两种大小的浓度较高,导致心率和表型变化的增加。以10.0 mgl -1的浓度在幼虫中输入和积累的两个大小的PS -MP,相同的浓度导致凋亡过程的增加与氧化还原稳态变化相关。报告的结果对暴露于PS-MP的负面影响并提供了有关其毒性的新信息的现实看法,也考虑了其尺寸。
1 列日大学 GIGA 研究所器官发生与再生实验室 (LOR),比利时列日 4000; ratish.raman@uliege.be 2 GIGA CRC 体内成像,列日大学,Sart Tilman,4000 列日,比利时; m.external@uliege.be(人与生物圈计划); christian.degueldre@uliege.be (光盘); alain.plenevaux@uliege.be (AP) 3 拉里博伊西及雷医院,罕见骨病参考中心,INSERM U1132,巴黎西岱大学,F-75010 巴黎,法国; communication@hotmail.com(CCdS); agnes.ostertag@inserm.fr (AO); corinne.collet@aphp.fr(抄送); martine.cohen-solal@inserm.fr (MC-S.) 4 肌肉骨骼创新研究实验室,列日大学医学跨学科研究中心,比利时列日 4000; christelle.sanchez@uliege.be (客户服务); yhenrotin@uliege.be (YH) 5 UF de Génétique Moléculaire,Hospital Robert Debré,APHP,F-75019 Paris,法国 * 通信地址:m.muller@uliege.be;电话:+32-473993074
摘要虽然斑马鱼正在成为研究人类疾病的新模型系统,但仍缺乏一种有效的方法来产生高效率的精确点突变。在这里,我们表明基本编辑者可以在没有其他不必要的靶向突变的情况下生成具有高效率的C-T点突变。此外,我们还建立了一个新的编辑变体,以识别NAA原始探针相邻基序,从而扩大了斑马鱼中的基本编辑可能性。使用这些方法,我们首先在CTNNB1基因中产生了基本变化,模仿了已知的人类基因的突变,从而导致内源性Wnt信号传导的组成型激活。此外,我们精确地针对了包括癌症相关的几个基因,包括CBL。使用了最后一个目标,我们创建了一个新的斑马鱼矮人模型。一起,我们的发现扩大了斑马鱼作为模型系统的潜力,允许新的方法调节细胞信号通路和人类遗传疾病相关突变的精确模型的生成。
摘要 虽然斑马鱼正在成为研究人类疾病的新模型系统,但仍然缺乏高效产生精确点突变的有效方法。在这里,我们展示了碱基编辑器可以高效地产生 C 到 T 的点突变,而不会产生其他不必要的靶向突变。此外,我们建立了一种识别 NAA 原型间隔区相邻基序的新编辑器变体,扩展了斑马鱼的碱基编辑可能性。利用这些方法,我们首先在 ctnnb1 基因中产生了碱基变化,模仿已知会导致内源性 Wnt 信号组成性激活的人类基因致癌突变。此外,我们精确靶向了包括 cbl 在内的几种癌症相关基因。利用最后一个目标,我们创建了一种新的斑马鱼侏儒症模型。我们的研究结果共同扩展了斑马鱼作为模型系统的潜力,为内源性调节细胞信号通路和生成人类遗传疾病相关突变的精确模型提供了新方法。
这里介绍的方法是由一位使用过 Alt-R CRISPR-Cas9 系统的客户提供的。这可以作为在类似模型生物中使用 Alt-R CRISPR-Cas9 系统的起点,但可能并未针对您的基因或应用进行完全优化。IDT 不保证这些方法,IDT 的应用专家只能提供一般指导以及有限的故障排除和支持。