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体外诱导辅助人的训练有素的免疫力...
6。第7天或更高版本：ELISA评估细胞因子水平。按照制造商的说明执行ELISA。上清液中细胞因子的浓度通常高于商业试剂盒的检测极限，因此需要在制造商指定的稀释缓冲液中稀释样品。对于R＆D Duoset Elisa试剂盒，从单核细胞中稀释的稀释剂培训了用B -glucan或bcg训练并在第6天用LPS添加的稀释剂为10 3 –20 3 TNF A和25 3 –100 3 - 100 3稀释3 –100 3以检测IL -6。每个刺激需要优化稀释液，并且在实验室，批次刺激和供体之间可能有所不同。The appropriate controls for the assay are the following: - Non-trained, non-rechallenged cells: No detectable cytokine production - Trained, non-rechallenged cells: No detectable cytokine production - Non-trained, rechallenged cells: High cytokine production - Trained, rechallenged cells: Very high cytokine production
EIF2AK4-EIF2A/eIF2 alpha-ATF4 通路的激活可触发对克罗恩病相关粘附侵袭性大肠杆菌感染的自噬反应
摘要 克罗恩病 (CD) 患者的肠粘膜被粘附侵袭性大肠杆菌 (AIEC) 异常定植。AIEC 感染后，宿主细胞中会诱导自噬以抑制细菌细胞内的复制。但其潜在机制仍然未知。在这里，我们研究了 EIF2AK4-EIF2A/eIF2 a -ATF4 通路在 AIEC 感染自噬反应中的作用。我们发现，用 AIEC 参考菌株 LF82 感染人肠上皮 T84 细胞会激活 EIF2AK4-EIF2A-ATF4 通路，磷酸化 EIF2AK4、磷酸化 EIF2A 和 ATF4 水平升高就是明证。EIF2AK4 耗竭抑制了 LF82 感染后自噬激活，导致 LF82 细胞内复制增加和促炎细胞因子产生增加。从机制上讲，EIF2AK4 耗竭抑制了 LF82 诱导的 ATF4 与多个自噬基因（包括 MAP1LC3B、BECN1、SQSTM1、ATG3 和 ATG7 ）的启动子结合，进而抑制了这些基因的转录。LF82 感染野生型 (WT) 而非 eif2ak4 ¡ / ¡ ，小鼠激活了 EIF2AK4-EIF2A-ATF4 通路，诱导了肠细胞中的自噬基因转录和自噬反应。因此，eif2ak4 ¡ / ¡
红树皮和叶提取物的抗粘附作用及其化合物对三角棘阿米巴基因型 4 中 β-微管蛋白相互作用影响的计算预测
本费萨尔大学，达曼，沙特阿拉伯； 11. 印度科学技术高等研究院 (IASST) 生命科学部，Vigyan Path, Paschim Boragaon, Garchuk, Guwahati, Assam, 印度； 12. 生物技术系，Aarupadai Veedu 理工学院，Vinayaka Mission 研究基金会，Paiyanoor，钦奈，泰米尔纳德邦，印度； 13. 塔斯马尼亚大学药学与药理学学院，霍巴特，TAS 7001，澳大利亚。通讯作者：Veeranoot Nissapatorn，电子邮件：nissapat@gmail.com 共同作者：SC：siriphon.chi@mail.wu.ac.th，IS：imran.sa@wu.ac.th，SS：suthinee.9938@gmail.com，WM：watcharapong.mi@wu.ac.th，JC：julalak.cu@wu.ac.th，RB：rachasak.bo@mail.wu.ac.th，DAK：dhrubokhan8360@gmail.com，PB：partha_160626@just.edu.bd，MNH：mn.hasan@just.edu.bd，HAT：halt070707@gmail.com，CCS：cristinacsalibay@gmail.com，PW：polrat.wil@mahidol.ac.th，MLP：mlourdespereira@ua.pt， MN：nawwaz@gmail.com，RB：ragini.bodade@iasst.gov.in，SSS：sundarannauniv85@gmail.com，AKP：alok.paul@utas.edu.au 收讫日期：01-06-2024，接受日期：12-11-2024，在线发表日期：18-12-2024
程序和清单 - 使用Nanobind试剂盒从培养的粘附细胞中提取HMW DNA
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