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CTAB/氯仿 - 异糖DNA提取方案
与研磨过程。我通常更喜欢类似于水稻颗粒的沉淀尺寸，无论是冷冻的还是新鲜的。我去除了多余的液体，因为它使磨石变得困难（藻类倾向于漂浮！）。我检查了显微镜下的样品，以评估磨削的进展，并观察CTAB溶液的绿色。通常，我将每个样品磨碎大约一分钟。•或者，您可以使用自动涡流适配器（例如Mobio）同时处理多个样本。沉淀后，将二氧化硅砂和细胞与CTAB放在管中。让其在架子上站立5分钟，然后将其转移到热块20分钟。如果CTAB缓冲区在此步骤之后没有变成绿色，请重复涡旋过程。一般规则，尤其是在仅氯仿提取物中，添加更多的组织可以产生更多的DNA到一定点，但它还增加了样品中污垢或杂质的量。DNA中的残基可以氧化样品，从而导致降解，并且可能会干扰下游应用中使用的酶。因此，必须在所用的组织量与提取的DNA质量之间找到适当的平衡，以确保在进一步的实验中获得可靠的结果。
血淀粉样蛋白和Tau生物标志物作为脑脊液谱的预测指标。
摘要简介血液生物标志物是改善阿尔茨海默氏病（AD）的管理，诊断和监测的重大进步。然而，它们与常规的脑脊液（CSF）分析有关淀粉样蛋白肽和tau蛋白的定量分析尚待确定。我们在两个独立的队列中研究了血液生物标志物在检测“非人性化”（a-/t-/n-），淀粉样蛋白（A+）或神经退行性（T+/N+）CSF概况方面的表现。结果等离子体Aβ1-42/Aβ1-40比和磷酸化的tau（p-tau（181））是独立的，并且具有不同CSF谱的互补预测指标，尤其是非人性化（A-/T-/N-）的敏感性和特异性接近85％的敏感性和特异性。这些性能和相应的生物标志物阈值与与AD检测有关的阈值显着不同。结论使用血液生物标志物来识别可能受益于二级CSF测试的患者，这代表了访问记忆诊所的患者临床管理中的一种有吸引力的分层策略。这可以减少对腰椎穿刺的需求，并预示对较大人群的血液测试的使用。
时机问题：建模妊娠大麻暴露对发展中杏仁核中社会行为和小胶质细胞的影响
大麻是怀孕期间最常用的非法药物，随着合法化和非刑事化扩展到更多州，美国的使用稳步增加。许多怀孕的人使用大麻来减少怀孕的不良症状，因为它比其他药物或酒精危害不大。大麻的主要精神活性成分，Delta-9-四氢大麻酚（THC）作用于内源性大麻素（ECB）系统，但是胎儿的神经发育是否鲜为人知。以前我们已经表明，雄激素介导的杏仁核中的欧洲央行促进了新生儿星形胶质细胞的小胶质细胞吞噬作用，这对调节社会行为中性别差异的神经回路产生了持久的后果。小胶质细胞是大脑的驻留免疫细胞，并表达欧洲央行系统CB1R和CB2R的受体，使它们可能通过THC进行调节的靶标。在不同的妊娠时间点上接触THC也可能导致不同的预后，与酒精暴露一样。为了在妊娠晚期或怀孕初期对人类大麻的使用进行建模，我们在产后早期通过腹膜内（IP）注射（IP）注射直接将啮齿动物暴露于THC。在这里我们表明，产后THC暴露会导致在发育期间的小胶质细胞吞噬作用以及少年时期的社会行为的性别变化。有趣的产前暴露于THC导致吞噬作用和社会行为的反比变化。这些发现突出了THC在妊娠中暴露的差异效应。
人类单神经元活性受基底外侧杏仁核的颅内theta爆发刺激调节
。cc-by 4.0国际许可（未经Peer Review尚未获得认证）是作者/资助者，他已授予Biorxiv的许可证，以永久显示预印本。这是该版本的版权持有人，该版本发布于2025年2月15日。 https://doi.org/10.1101/2024.11.11.622161 doi：Biorxiv Preprint
视觉脑机接口作为肌萎缩侧索硬化症患者的沟通辅助工具 Verbaarschot，CS；Tump，D.；Lutu，A.；Borhana
目的：对于患有肌萎缩侧索硬化症 (ALS) 的患者，利用代码调制视觉诱发电位 (cVEP) 的脑机接口 (BCI) 拼写器可能为现有的视觉 BCI 拼写器提供一种快速且更准确的替代方案。但到目前为止，cVEP 拼写器仅在健康参与者身上进行过测试。方法：我们评估了 20 名健康参与者和 10 名 ALS 患者的大脑反应、BCI 性能和 cVEP 拼写器的用户体验。所有参与者都执行了提示和自由拼写任务，以及自由选择是/否答案。结果：30 名参与者中有 27 名可以完成提示拼写任务，ALS 患者的平均准确率为 79%，健康老年参与者的平均准确率为 88%，健康年轻参与者的平均准确率为 94%。所有 30 名参与者都可以自由回答是/否问题，平均准确率约为 90%。结论：对于平均每分钟输入 10 个字符的 ALS 患者，本文介绍的 cVEP 拼写器的表现优于其他视觉 BCI 拼写器。意义：这些结果支持 cVEP 信号对 ALS 患者的普遍可用性，这可能远远超出测试的拼写器，例如控制智能家居中的警报、自动门或电视。2021 年国际临床神经生理学联合会。由 Elsevier BV 出版这是一篇根据 CC BY 许可开放获取的文章（http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/）。
横跨陆地节肢动物的分散，生命史和热壁细分市场的一致协变
建立肽序列与原纤维形成之间的基本关系对于理解蛋白质错误折叠过程和指导生物材料设计至关重要。在这里，我们将全原子分子动力学（MD）模拟与人工intel-ligence（AI）相结合，以研究短肽序列排列的细微变化如何影响其形成原纤维的倾向。我们的结果表明，疏水残基的分布和电荷簇的分布很小，可以显着影响成核速率和跨β结构的稳定性。为了快速扩展此分析，我们开发了一个主动学习 - 增强的框架 - 用于分子动力学的机器学习（ML4MD），从而根据MD衍生的聚合数据迭代地完善了其预测。ML4MD有效筛选了许多肽排列，并指导发现先前未识别的原纤维式序列，从而在接收器操作特征（ROC）曲线（AUC）下达到0.939的接收器下方。总体而言，ML4MD通过将详细的原子模拟与快速和高敏锐的ML预测整合在一起，简化了淀粉样蛋白样肽的合理设计。
Cas9和雷帕霉素诱导的CRE重组酶的本构表达促进了Berghei疟原虫中的条件基因组编辑
疟疾是由疟原虫属的原生动物寄生虫引起的，并且仍然是全球健康问题。寄生虫具有高度适应的生命周期，其中包括脊椎动物宿主中的连续无性复制和蚊子载体围绕中的性成熟。寄生虫的遗传操纵对破译疟原虫基因功能的功能具有重要作用。常规的反向遗传工具不能用于研究无性血液阶段的基本基因，从而需要制定条件策略。在各种此类策略中，雷帕霉素可诱导的可二聚化CRE（DICRE）重组酶系统是一种有条件地编辑人类感染的恶性疟原虫和啮齿动物疟疾模型寄生虫寄生虫P. Berghei的强大方法。我们先前生成了表达二甲虫的berghei线，并通过有条件地删除了几个必不可少的无性阶段基因来验证它，从而揭示了它们在孢子虫中的重要作用。另一个有效的工具是CRISPR/CAS9技术，该技术已启用了具有更高精度和特异性的目标基因组编辑，并且在疟原虫属中具有大量先进的基因组工程。在这里，我们通过在寄生虫中整合了Dicre盒和荧光标记来开发新的Berghei寄生虫线，以组成表达Cas9。由于CRISPR/CAS9和DICRE的双重整合，这些新系列允许同时进行无与伦比的基因修饰和条件调节。为了说明这种新工具的多功能性，我们有条件地淘汰了编码贝尔格（P. Berghei）类似claudin的apicomplexan微米蛋白（夹具）的基本基因，并确认了夹具在侵入红细胞细胞中的作用。
DiamyDmedical宣布扩大了财政支持...
新闻稿，2025年2月12日，Diamyd Medical宣布，突破性T1D Diamyd Medical的资金支持将获得175万美元的资金，从突破性T1D（以前是JDRF）的扩大协作支持（以前是JDRF），这是全球领先的1型糖尿病型糖尿病研究和提倡组织，以支持诊断3阶段的Files 3阶段试验，以供您批准的征用，以供您进行批准的征用。这笔额外的资金建立在现有的合作基础上，以支持正在进行的诊断3试验，该试验评估了自身免疫性糖尿病的精密医学抗原特异性免疫疗法。通过突破性T1D的行业发现与发展合作伙伴关系（IDDP）计划提供资金，该计划的重点是推进创新的治疗方法和设备的商业化，以治疗1型糖尿病及其并发症。“我们很高兴加强与突破性T1D的合作，因为我们努力将特定于抗原的免疫疗法推向市场。” Diamyd Medical首席执行官Ulf Hannelius说。“这笔额外的资金证明了我们在潜在的加速批准之前加速患者招募和准备的潜力。” “突破性T1D，我们致力于推动可以改变1型糖尿病进程的变革性疗法，” Breakthrough T1D研究高级主任Joshua Vieth博士说。“我们很高兴能与Diamyd Medical的3阶段试验合作，以支持持续的努力以及对1型糖尿病社区的潜在影响。电话：+46 8 661 00 26，传真：+46 8 661 63 68电子邮件：info@diamyd.com reg。否。关于Diamyd Medical Diamyd Medical开发了预防和治疗1型糖尿病和LADA（成人潜伏自身免疫性糖尿病）的精确医学疗法。DIAMYD®是一种研究性抗原特异性免疫调节治疗，用于保存专门针对携带HLA DR3-DQ2基因的个体的内源性胰岛素产生。diamyd®已在美国授予孤儿药物名称，并由美国FDA快速指定，用于治疗3期（临床诊断为症状）1型糖尿病。Diamyd®还获得了快速轨道名称，用于治疗1阶段和第2阶段（症状前）1型糖尿病。Diagnode-3，一项验证性III期试验正在积极招募八个欧洲国家和美国60个诊所的近期发病患者（第3阶段）1型糖尿病。先前已经在大型遗传义的患者组中显示了重要的结果 - 在大规模的荟萃分析以及该公司的前瞻性欧洲IIB期试验中，DIAMYD®被直接用于儿童和年轻人的浅表淋巴结中，并具有最近诊断为1型糖尿病的儿童和年轻人。诊断3试验仅招募该患者组，该患者群携带了称为HLA DR3-DQ2的常见基因型，该基因型占欧洲和美国1型糖尿病患者的约40％。可以在几分钟内进行浅表淋巴结中的注射，并旨在优化治疗反应。瑞典Umeå的生物制造设施正在开发，用于生产重组GAD65蛋白，这是抗原特异性免疫疗法DIAMYD®的活性成分。Diamyd Medical是干细胞公司NextCell Pharma AB和人工智能公司Makyai AB的主要股东。Diamyd Medical的B份额在纳斯达克第一北增长市场上交易，这是该公司的认证顾问。有关更多信息，请联系：总裁兼首席执行官Ulf Hannelius电话：+46 736 35 42 42 41电子邮件：ulf.hannelius@diamyd.com diamyd.com Diamyd Medical AB（PUBL）BOX 7349，SE-103 90 SEWHOLM，瑞典。：556242-3797网站：https：//www.diamyd.com
认知时间的大脑信号箭头
在发育中的人脑皮质中，神经发生的发生率特别缓慢，部分原因是皮质神经祖细胞在相对较长的时间内保存其祖细胞状态，同时产生神经元。对祖细胞和神经源性状态之间的这种平衡受到调节，以及它是否有助于物种特定的大脑时间模式，对此有鲜为人知的理解。在这里，我们表明，人类神经祖细胞（NPC）在祖细胞状态下生成神经元的特征潜力长时间需要淀粉样蛋白前体蛋白（APP）。相比之下，小鼠NPC中的APP是可分配的，该APP以更快的速度进行神经发生。从机械上讲，APP细胞自治通过抑制后尿激活蛋白的抑制作用，从而有助于神经发生 - 1转录因子和规范WNT信号传导的促进。我们建议，自我更新和差异之间的良好平衡受APP调节，这可能有助于神经发生的人类特定的时间模式。