– FirePlex 多重测定. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 – Fireplex-96 免疫测定. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... 9 – 高通量 FirePlex 免疫测定 . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... . ... 9 – Abcam 如何帮助您为工作流程选择合适的多重免疫测定法?.................... ... .... .... .... .11
检测设置 在第二个案例研究中,我们开发了一种 CBA,使用重组 HEK-Blue™ 报告细胞来检测针对药物的 NAbs,这是一种与细胞因子结合的融合抗体。HEK-Blue™ 报告细胞系统由 HEK293 细胞组成,这些细胞经过基因改造,可表达细胞因子特异性受体和主要信号蛋白,从而获得完全活跃的信号通路(图 2. A)。细胞因子激活受体会触发下游信号传导和分泌性胚胎碱性磷酸酶 (SEAP) 报告基因的表达。细胞上清液中分泌的 SEAP 量可以用 SEAP 检测培养基(比色酶测定)测量,并且与细胞因子活性成正比,与抗细胞因子 NAbs 的浓度成反比
大规模并行报告基因检测 (MPRA) 是一种高通量方法,用于评估数千个候选顺式调控元件 (CRE) 的体外活性。在这些检测中,候选序列被克隆到由独特 DNA 序列标记的报告基因的上游或下游。然而,标签序列本身可能会影响报告基因的表达,并导致测量的顺式调控活性出现重大潜在偏差。在这里,我们提出了一种基于序列的方法来校正标签序列特异性效应,并表明我们的方法可以显著减少这种变异源并提高 MPRA 对功能性调控变体的识别。我们还表明我们的模型可以捕获与 mRNA 转录后调控相关的序列特征。因此,这种新方法不仅有助于提高 MPRA 实验中对调控信号的检测,而且还有助于设计更好的 MPRA 协议。
摘要:果蝇果蝇(果蝇)模型正在作为研究肿瘤进展的基本机制并鉴定新的治疗剂的强大工具。快速且价格便宜,可以比脊椎动物生物进行遗传和药物筛查。这种基于全生物的药物筛查允许评估药物吸收和毒性,从而减少了假阳性的可能性。在许多上皮癌症中,Wnt和Ras信号通路中的激活突变很常见,当在成年果蝇中肠驱动时,它会诱导侵袭性的肠道肿瘤样产物,这些产物概括了人类结肠癌(CRC)的许多方面。在这里,我们采用了果蝇CRC模型,其中肿瘤细胞用GFP和萤光素酶报告基因标记,并开发了新型的高通量测定法以量化肿瘤负担。利用这些测定法,我们发现果蝇CRC模型对使用标准CRC-drugs的治疗迅速响应,为未来快速遗传和药物筛查打开了大门。
(crRNA)或单个诱导RNA(SGRNA)将CAS ector蛋白引导至用于加工的特定核酸序列,例如,结合和/或裂解。在CRISPR - CAS技术之前,其他核酸结合蛋白,例如锌nger核酸酶(ZFN),6个转录激活剂核酸蛋白酶(tal-ens),7和8个转录激活蛋白,8个,8个,8次,工程为与特定c c and c cy c c c c c c c demomic cynomic cytemic cytemic contimic contimic cypeci c necy。9,10麦尿素,例如laglidadg归核核酸内切酶,特定识别14至40个碱基对的双链DNA序列,并启用DNA序列的修改和缺失。8个ZFN要求将多个锌nger基序连接起来,每个基序都针对一个核苷酸三重态。10 Talens需要一个DNA结合结构域,其中每个氨基酸与四种类型的核苷酸之一的特异性结合。10这些系统需要针对不同目标位点的工程不同的融合蛋白,因此并不广泛适用。CRISPR - CAS技术克服了这个问题。可以通过使用设计用于识别基因序列的cRRNA来实现不同的基因序列。CRRNA介导的CRISPR指导的可编程特征尤其有利。因此,CRISPR - CAS
生物测定法(也称为生物测定)是许多生物和一些非生物药品生产和销售所需的质量评估的一个组成部分。常用于药物效力评估的生物测定法与化学测试的区别在于,生物测定法依赖于生物基质(例如动物、活细胞、靶受体的功能复合物)。本章简要介绍了 USP-NF 章节或专论中生物测定法的某些基本生物统计学程序,即异常值识别、相对效力测量的置信区间和独立测定法的组合。旨在传达监管机构可执行的要求。