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监测抗原特异性记忆 B 细胞的重要性以及 ImmunoSpot 检测如何适合这项任务
摘要：确定个体对病原体、自身抗原或环境因子的体液免疫反应性传统上是通过评估血液中的特定抗体水平来实现的。然而，在许多情况下，特异性抗体的滴度会随着时间的推移而下降，因此不能如实地反映先前的抗原暴露或免疫记忆的建立。因此，为了评估个体的体液免疫能力，有必要评估功能性 B 细胞记忆。在这里，我们描述了新的 B 细胞 ELISPOT 和 FluoroSpot 检测（统称为 ImmunoSpot），这些检测可以快速开发和验证，以在体外和单细胞分辨率下表征对任何所需抗原特异的记忆 B 细胞 (B mem ) 库。此外，B 细胞 FluoroSpot 检测的多重变体能够以最少的细胞材料要求对分泌不同抗体类别和/或 IgG 亚类的抗原特异性 B 细胞进行高通量测试。 B 细胞 ImmunoSpot 检测还可以测量抗原特异性 B mem 区室内的亲和力分布，并允许进行交叉反应测量，从而可以深入了解针对未来病原体变体建立的 B mem。总的来说，这里介绍的 ImmunoSpot ® 系统具有高度可重复性，并且可以轻松验证是否适用于受监管的测试。新获得的监测抗原特异性 B mem 区室的能力应该会促进对健康和疾病中的体液免疫的更全面了解。
配对的酵母单杂交测定法，以检测转录因子范围内DNA结合的合作性和拮抗作用
。cc-by-nc 4.0国际许可证未获得同行评审的认证）是作者/筹款人，他已授予Biorxiv的许可证，以永久显示预印本。它是此预印本的版权持有人（该版本发布于2023年4月14日。; https：//doi.org/10.1101/2023.04.14.14.536894 doi：biorxiv Preprint
解释性信息：对P190或P210定量测定的诊断定性BCR-ABL1分析
方法论：RNA与全血或骨髓分离并反转录。所得的cDNA经过多重PCR扩增，旨在扩增P190，P210或P230 BCR-ABL1融合转录本，涉及ABL1外显子2。ABL1参考基因也被放大以进行标本质量控制并确保RNA的完整性。PCR产物通过毛细管电泳解决，并评估存在表明阳性结果的扩增子的存在。阳性普通P210或P190结果将触发定量P210或P190测试，以提供定量水平作为监测治疗反应的诊断基线。p210的成绩单水平报告为国际量表百分比（％is）。P190转录水平报告为归一化拷贝数（NCN）。这些定量结果被整合到最终报告中。如果初始定性测试为阴性，或者检测到罕见的P230，则不会进行反射测试。
选定的富含微藻胞外多糖提取物的抗菌特性：抗菌检测和目标微生物的影响
从微藻中提取的富含胞外多糖 (EPS) 的提取物具有广泛的生物活性，包括抗菌和抗真菌特性。然而，这些特性因微藻种类、所用的抗菌检测方法和所选的目标微生物而异。这项研究旨在调查从五种很少在此方面研究的微藻中获得的富含胞外多糖的提取物的抗菌特性。本研究选定的目标微生物包括革兰氏阳性菌 (枯草芽孢杆菌) 和革兰氏阴性菌 (铜绿假单胞菌)、真菌 (枝孢菌) 和微藻 (小球藻)。使用扩散测定法、肉汤微量稀释测定法和使用吸光度的生长测量来比较方法并充分评估抗菌特性。使用吸光度测量，对于至少一种富含 EPS 的微藻提取物，所有目标物种的生长率抑制率至少达到 80%。在 500 mgGlcEq · L − 1 的浓度下，枯草芽孢杆菌的活性提取物大部分来自莱茵衣藻（生长抑制率 87.1%）、普通念珠藻（53.7%）和多色紫球藻（46.4%）。发现莱茵衣藻（86.2%）、普通念珠藻（59.9%）和紫球藻（31.1%）的富含 EPS 的提取物对铜绿假单胞菌最有效。微绿球藻（86.0%）、莱茵衣藻（16.6%）和多色紫球藻（17.8%）的 EPS 提取物的抗真菌活性最高。结果表明，富含 EPS 的 N. commune 提取物（99.3%）、C. reinhardtii 提取物（84.8%）和 M. gaditana 提取物（84.1%）可抑制微藻生长。据我们所知，这项研究首次探索了富含 EPS 的微藻提取物的杀藻特性，为未来研究其潜在应用确定了有希望的候选物。
使用人IPSC衍生的细胞类型的商业可用来源启用高通量3D细胞的测定
具有人IPSC衍生细胞类型的三维（3D）球体已成为一种有希望的药物筛查和疾病模型的体外模型系统。最近的出版物表明，IPSC衍生的皮质球体具有更大的“大脑般”复杂性，并且是HTS的强大测定平台。A.示意图，用于设计自己的ICELL神经球，用于“脑中的大脑”研究； B.细胞在ULA板上自组装，在24-28小时内形成3D结构； C.来自25K细胞输入的神经球直径约为400 µm。D. 384W中的图像，在incucyte上，带有掩模用于分析（黄色）或cal6染料； E.具有APOE 4/4细胞的AD疾病模型产生峰值计数较低和幅度较高的Ca2+痕迹。已知药物的治疗可以逆转表型。F. GFP-Microglia是优化共培养的有用工具；但是，并非所有条件都支持纳入MGL；一旦进入，该模型对于神经炎症很有用。
针对colletotrichum物种的新物种特定的实时PCR测定
摘要：苹果的苦腐是由不同的Colletotrichum物种引起的一种经济重要的全球疾病，具体取决于许多因素，例如气候，地理，其他宿主和作物管理实践。培养，形态和基于单位液测序的方法用于识别Colletotrichum物种的有效性受到严重限制，而可用于描述物种的多核序列分型方法是昂贵，时间密集的，并且需要高专业知识。我们开发了以下九种coltotrichum物种的物种特异性水解探针实时PCR分析，在美国中大西洋中引起苦腐腐烂。来自阿司霉菌物种复合物的若虫。在搜索14个基因区域后，我们在其中5个目标物种中设计了底漆和探针。四个引物 - 探针套装对被复式。灵敏度测试显示出可检测到0.5 pg DNA。这些实时PCR分析将对这些关键的Colletotrichum物种提供快速而可靠的识别，对于旨在阐明其生物学，流行病学和管理苹果的研究至关重要，因为在美国生产和消耗的树木水果。
用于药物输送的载姜黄素介孔二氧化硅纳米粒子：合成、生物测定和治疗潜力——综述
姜黄素 (Cur) 是从姜黄 (姜黄) 根茎中分离出来的天然多酚化合物，可作为高效生物活性剂治疗多种疾病，如糖尿病、癌症、关节炎和神经系统疾病 1 (图 1)。Cur 的治疗效果主要归因于其抗炎、抗氧化，尤其是抗致癌活性。Cur 已成功用于预防临床癌症，尤其是乳腺癌。2,3 最近，对晚期和转移性乳腺癌患者进行了一项临床试验研究，以评估 Cur 与紫杉醇联合使用的安全性和有效性。4 事实上，Cur 通过诱导活性氧 (ROS) 的产生和增加癌细胞凋亡来抑制癌细胞的生长。5,6 Cur 表现出很高的安全性
无细胞试验表明 HIV-1 衣壳可保护逆转录产物免受 cGAS 免疫感应的影响
逆转录病毒可被先天免疫传感器环鸟苷酸环磷酸腺苷合酶 (cGAS) 检测到，该合酶可识别逆转录 DNA 并激活抗病毒反应。然而，HIV-1 保护其基因组免受 cGAS 识别的程度仍不清楚。为了详细研究这一过程的机制，我们在无细胞系统中重建了 HIV-1 的逆转录、基因组释放和先天免疫感应。我们发现，即使在完成逆转录后，野生型 HIV-1 衣壳也能保护病毒基因组免受 cGAS 的侵害。病毒 DNA 可能因热应激、衣壳突变或肌醇六磷酸 (IP6) 浓度降低而“脱保护”，这些因素会使衣壳不稳定。令人惊讶的是，衣壳抑制剂 lenacapavir 也会破坏病毒核心并显著增强 cGAS 活性，无论是在体外还是在细胞感染中。我们的研究结果提供了生化证据，表明 HIV-1 衣壳晶格隐藏了 cGAS 的基因组，而病毒核心的化学或物理破坏可以暴露 HIV-1 DNA 并激活先天免疫信号。
神经内分泌乳腺肿瘤：多基因测定能否有助于指导治疗决策？案例表现
摘要。背景/目标：乳腺癌仍然是全球女性中最普遍的癌症，并且仍然是该人群中与癌症相关的死亡的主要原因。神经内分泌乳腺癌（NBC），一种不足的亚型，不到1％的病例，通常发生在老年妇女中，并且显示为缓慢增长的低度疾病。NBC表现出不同的组织学模式和免疫组织化学标记。鉴于NBC的数据有限，需要进行测定，以提供有关分子分析并协助临床决策的信息。该研究的目的是研究现代的多基因测定法（MGA）是否可以帮助对NBC患者的治疗计划。病例报告：使用MGA分析了四名患者的队列。所提出的案件中有年轻的，少年前女性的NBC，缺乏家族史。均为淋巴结阴性，具有神经内分泌标记的鲁棒表达。尽管激素受体表达高，但所有肿瘤的分化都与Ki67水平升高。ONCOTYPE DX分析表明，在三种情况下需要化学疗法，而不是一种化学疗法。 这强调了NBC内部的异质性，强调了个性化治疗决策的重要性。 结论：虽然NBC很少见，并且缺乏广泛的研究，但使用多基因型DX等多基因测定可能在治疗计划中起关键作用，尤其是在组织学参数不同的情况下。ONCOTYPE DX分析表明，在三种情况下需要化学疗法，而不是一种化学疗法。这强调了NBC内部的异质性，强调了个性化治疗决策的重要性。结论：虽然NBC很少见，并且缺乏广泛的研究，但使用多基因型DX等多基因测定可能在治疗计划中起关键作用，尤其是在组织学参数不同的情况下。
基于血浆的全面基因组分析DNA分析非小细胞肺癌：建议
委员会成员同意，证据支持液体活检测试（确定癌症遗传组成的血液测试）有效地识别可起作用的基因组改变（肿瘤DNA的特定遗传或分子变化，预测对靶向疗法的反应），而这些疗法被组织测试所遗漏的（涉及组织生物易于造成的组织），因为它会导致组织造成的under undor tumor turoudf samplane samplane samplane samplane samplane samplane samplane samplane samplane samplane samplane。此外，委员会承认，在所有非小细胞肺癌（NSCLC）的情况下，液体活检测试不应替代组织测试，因为与液体活检测试相比，组织测试具有较高的敏感性。委员会认识到，对可行的基因组改变的准确及时识别可以促进获得目标NSCLC治疗。