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蟋蟀 Gryllus bimaculatus 的靶向基因标记
1 德岛大学研究生院技术与科学研究所生命系统系，日本德岛市南城山岛町 201 号，邮编 770-8506 2 有机体与进化生物学系，美国马萨诸塞州剑桥市 Divinity Avenue 16 号，邮编 02138 3 德岛大学生物创新研究中心，日本德岛市明西郡石井町石井 2272-2 号，邮编 779-3233 4 雅盖隆大学生物化学、生物物理与生物技术学院，波兰克拉科夫 30-387 5 霍华德·休斯医学研究所，美国马里兰州 Chevy Chase 市 6 德岛大学，日本德岛市新仓町 2-14 号，邮编 770-8501 7 分子与细胞生物学系，美国马萨诸塞州剑桥市 Divinity Avenue 16 号02138，美国
真核基因组数据发现了广泛的寄主范围1
建立在Hemimetablos昆虫中基于CRISPR/CAS9的基于CRISPR/CAS9的敲门：目标基因1在Crcket Gryllus bimacultus中标记2 3 Yuji Matsuoka 1,3* A. Barnett 2,5，Barnett 2，5 2,7,9* 6 7 1。生命系统系，技术与科学研究所，8托库希马大学研究生院，201 Minami-Jyosanjima-Cho，Tokushima City，770-8506，日本9有机和进化生物学系，剑桥大学16号，MA 10 02138，美国11 3。当前地址：国家基本生物学研究所，Nishigonaka 38，Myodaiji，Okazaki 444-12 8585，ACHI，日本，13 4。生物创新研究中心，Tokushima University，2272-2，Her-Cho，My-Gun，14 Tokushima 779-3233，日本15 5。5.当前地址：DeSales University，宾夕法尼亚州中心谷地2755 Station Avenue，美国18034，美国16 6。生物化学，生物物理学和生物技术学院，贾吉伦大学，克拉科夫，30-17 387，波兰18 7.Howward Hughes Medical Institute，Chevy Chase MD，美国19 8。大学，2-14 Shinkur-Cho，Tokushima City，770-8501，日本20 9。<分子和细胞生物学的划分，剑桥MA 02138，21 USA 22 23 24 *通信：yuji matsuoka matsuka@nibb.nib.nib.nib.nib.nib.nib.nib.nib.nib.nib.nib.jp 25塔罗Nakamura taro@nib。 taro mito.taro@tokushima-u.ac.jp 27 Cassandra G. extavour extavour extavour@oeb.harverd.edu 28 29跑步标题：CRISPR/CAS9敲门板30 30 2
CRISPR/CAS9介导的基因组敲除酪氨酸羟化酶和板球bimaculatus中的黄色基因
gryllus bimaculatus是一种生物学领域的新兴模型生物，例如行为，神经病学，生理学和遗传学。最近，反向遗传学的应用为理解具有特定生理反应的基因调查网络的功能基因组学和操纵基因调节网络提供了机会。bimaculatus。在g中使用CRISPR/ CAS9系统。bimaculatus，我们提出了与昆虫黑色素和儿茶酚胺生物合成途径有关的酪氨酸羟化酶（Th）和黄色Y的有效敲低。作为一种酶，将酪氨酸转化为3,4-二羟基苯基甲基甲基甲烷，限制了途径中的第一步反应。黄色蛋白质（Dopachrome Convertion酶，DCE）也参与黑色素生物合成途径。色素沉着中黑色素生物发生的调节系统和分子机制及其在G中的物理功能。bimaculatus尚未因缺乏体内模型而被很好地定义。在F 0个个体和可遗传的F 1后代都检测到核苷酸的缺失和核苷酸核苷酸的插入。我们确认通过定量的实时PCR分析在突变体中下调了Th和Yel-Y-Y。与对照组相比，Th和黄色基因的突变导致色素沉着缺陷。大多数F 0若虫具有第一个幼体的基因突变，而唯一的成年人在机翼和腿部有很明显的缺陷。但是，我们无法获得第一个龄的所有F 2死亡的TH突变体的任何纯合子。bimaculatus。因此，基因对于G的生长和发展非常重要。当将黄色基因拆除时，g时为71.43％。bimaculatus是浅棕色，腹部有轻微的镶嵌物。黄色基因可以通过杂交实验稳定地遗传，没有明显的表型，除了较轻的表皮颜色。目前的功能研究表明，Th和黄色在色素沉着中的基本作用，TH具有多巴胺合成在G中胚胎发育中的深远而广泛的作用。bimaculatus。