CUT&RUN 方法 CUT&RUN 使用 CUTANA™ChIC/CUT&RUN 试剂盒进行,起始于 500k K562 细胞,含 0.5 µg IgG(EpiCypher 13-0042)、H3K4me3(EpiCypher 13-0060)、H3K27me3(EpiCypher 13-0055)或 0.125 µg CTCF(EpiCypher 13-2014)抗体,一式两份。使用 CUTANA™CUT&RUN 文库制备试剂盒(EpiCypher 14-1001/14-1002)以 5 ng DNA(或回收总量,如果少于 5 ng)进行文库制备。文库在 Illumina NextSeq2000 上运行,采用双端测序(2x50 bp)。样本测序深度为 5.5/18.8 百万个读数 (IgG Rep 1/Rep 2)、14.2/17.0 百万个读数 (H3K4me3 Rep 1/Rep 2)、24.7/18.1 百万个读数 (H3K27me3 Rep 1/Rep 2) 和 8.6/5.5 百万个读数 (CTCF Rep 1/Rep 2)。使用 Bowtie2 将数据与 T2T-CHM13v2.0 基因组比对。过滤数据以删除重复、多比对读数和 ENCODE DAC 排除列表区域。
该溶液以 6x 格式提供,包含两种用于监测 DNA 迁移的示踪染料。这些染料在 2% TAE 琼脂糖凝胶上以大约 150 bp 和 800 bp 的距离迁移,或在 1% TAE 琼脂糖凝胶上以大约 500 bp 和 4,000 bp 的距离迁移。缓冲液还含有甘油,用于在加载后将 DNA 保留在孔底,并含有 EDTA 以抑制金属依赖性核酸酶的活性。
1。使用前,涡旋DNA加载缓冲液I Fluoro在使用前持续10秒。2。用5个DNA样品和混合稀释1份DNA加载缓冲液I氟。注意:必须将DNA加载缓冲液I荧光液添加到DNA标记中,以便在电泳后与样品同时可视化阶梯带。3。加载样本并根据标准程序运行。4。电泳后,除去凝胶并放在紫外线或蓝色的透射照明器上,以立即可视化带。5。凝胶可以用ETBR染色。
图例:欧洲央行计算结果(有关建模方法,请参阅《欧元区银行业宏观审慎压力测试》,不定期论文系列第 226 号)。“释放资本和监管灵活性的使用”包括使用 P2G、通过 P2R 变化的前端加载释放的 CET1 资本以及释放的宏观审慎缓冲。“剩余缓冲(包括 CCoB)的使用”涉及 P1R 和 P2R 以上所有资本的使用,MDA 限制仍然具有约束力。该分析考虑了 2020 年 3 月 12 日和 27 日的监管支持计划中的非缓冲要素、国家延期偿付和担保计划。
使用多位逻辑器件时,输入绝不能浮动。在许多情况下,数字逻辑器件的功能或部分功能是未使用的,例如,当仅使用三输入与门的两个输入或仅使用 4 个缓冲门中的 3 个时。此类输入端不应保持未连接状态,因为外部连接处的未定义电压会导致未定义的操作状态。以下指定的规则在任何情况下都必须遵守。数字逻辑器件的所有未使用的输入必须连接到高或低偏置以防止它们浮动。应应用于任何特定未使用输入的逻辑电平取决于器件的功能。通常,它们将绑定到 Gnd 或 Vcc,以更有意义或更方便为准。
(a)ccyb:freq。危机↓达75%(前ANTE),通过“ CCYB释放”政策(c)CCYB防止2008年的危机(但随后的经济衰退)(d)在均衡中不需要干预措施,可能会降低危机的严重性(b)危机严重程度(c)的严重程度。
65040D Dynabeads™ RNA 结合缓冲液包装批次:2980952 有效期:2024 年 12 月 12 日 (DD.MM.YYYY) 储存:5±3°C 注意:仅供研究使用。不可用于诊断程序。